王靜霞，黃艷菲，＋，趙小燕，孫 美，許云章，彭鐮心，劉 圓，*

（1.西南民族大學(xué)民族醫(yī)藥研究院，四川成都 610041；2.成都大學(xué)生物產(chǎn)業(yè)學(xué)院，四川成都 610106）

蕎麥為蓼科（Polygonaceae）雙子葉植物，藥食皆可用，目前主要的栽培品種有兩個(gè)：一種是韃靼蕎麥Fagopyrucm tataricum（L.）Gaerth，稱為苦蕎；另一種是普通蕎麥Fagopyrum esculentum Moench，稱為甜蕎[1]。我國(guó)的蕎麥分布較廣，但生產(chǎn)相對(duì)集中，華北、西北、東北地區(qū)以種植甜蕎為主，西南地區(qū)的四川、云南、貴州等地以種植苦蕎為主[2]。蕎麥不僅營(yíng)養(yǎng)豐富，還含有多種黃酮類化合物[3-4]?，F(xiàn)代藥理研究表明：蕎麥具有抗氧化、降血糖、降血脂等多種藥理活性[5-9]。隨著現(xiàn)代人們保健意識(shí)的提高，蕎麥不僅作為一種食物材料進(jìn)入人們的餐桌，同時(shí)各種商品苦蕎茶作為一種具有食療保健功能的食品也進(jìn)入人們的生活，但是目前蕎麥和商品苦蕎茶的國(guó)家、地方或企業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，仍然沒(méi)有可以執(zhí)行的有效成分含量標(biāo)準(zhǔn)，因此，有必要系統(tǒng)地對(duì)蕎麥和商品苦蕎茶中總黃酮的含量進(jìn)行測(cè)定。本實(shí)驗(yàn)以蕎麥中的總黃酮含量作為蕎麥和商品苦蕎茶的評(píng)價(jià)指標(biāo)，以期為蕎麥和苦蕎系列商品的質(zhì)量控制及評(píng)價(jià)提供數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

蕎麥（種子及植株）均采自成都大學(xué)的蕎麥實(shí)驗(yàn)田，清洗干凈后在50℃的電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱中烘干至質(zhì)量恒定，粉碎過(guò)50目篩；商品苦蕎茶 購(gòu)于國(guó)內(nèi)的超市和網(wǎng)購(gòu)；蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品 中國(guó)藥品生物制品檢定所（批號(hào)：100080-200707）；無(wú)水乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉 均為分析純。

UV-8500紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì) 中國(guó)上海天美公司；METTLER AE240電子分析天平 梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；W201B恒溫水浴鍋 上海申順生物科技有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 以蘆丁為對(duì)照品，UV法測(cè)定總黃酮含量。準(zhǔn)確稱取蘆丁對(duì)照品25.05mg，加體積分?jǐn)?shù)69%的乙醇溶液定容于50mL的容量瓶中，得質(zhì)量濃度為0.501mg/mL對(duì)照品溶液。精密移取標(biāo)準(zhǔn)溶液7份，分別稀釋成0.1503、0.06012、0.03006、0.01503、0.007515、0.003006mg/mL的對(duì)照品溶液。分別精密吸取5mL上述對(duì)照品溶液置于10mL比色管中，加5%亞硝酸鈉0.5mL，放置6min，加10%硝酸鋁0.5mL，放置6min，再加4%氫氧化鈉4mL，搖勻，放置15min后于510nm處測(cè)定吸收度A。以濃度C（mg/mL）為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為：y=4.9848x-0.0006，R2=0.9999，表明在0.003006～0.1503mg/mL濃度范圍內(nèi)，蘆丁濃度C（mg/mL）與吸光度A之間具有良好的線性關(guān)系。

1.2.2 供試品溶液的制備 按課題組前期考察的蕎麥總黃酮提取的最佳工藝條件提取樣品。稱取樣品粉末0.5g，加入體積分?jǐn)?shù)69%的乙醇21mL，回流提取90min，提取2次，過(guò)濾，回收溶劑，用體積分?jǐn)?shù)69%的乙醇定容至25mL。吸取一定量樣品溶液于比色管中，加入體積分?jǐn)?shù)69%的乙醇補(bǔ)足至5mL，按1.2.1顯色方法顯色，離心后取上清液備用。

2 結(jié)果與討論

2.1 精密度實(shí)驗(yàn)

以濃度為0.06012mg/mL的對(duì)照品溶液，重復(fù)測(cè)定吸光度6次，記錄吸光度，吸光度RSD為1.51%，結(jié)果表明精密度良好。

2.2 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

取米蕎1號(hào)粉末6份，按1.2.2供試品溶液制備方法制備，測(cè)定吸光度，吸光度RSD為1.44%，結(jié)果表明重復(fù)性良好。

2.3 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

取供試品溶液，每隔0.5h測(cè)定吸光度值，連續(xù)測(cè)定4h，吸光度RSD為2.43%，結(jié)果表明，4h內(nèi)樣品穩(wěn)定性良好。

2.4 加樣回收率實(shí)驗(yàn)

稱取已知含量的米蕎1號(hào)樣品6份，分別精密加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為已知含量樣品中蘆丁含量的120%、100%、80%蘆丁對(duì)照品，按供試品溶液制備方法制備，測(cè)定吸光度，計(jì)算回收率。計(jì)算得總黃酮平均回收率為97.9%，RSD為1.95%。

2.5 樣品含量測(cè)定結(jié)果

表1數(shù)據(jù)表明，比較各個(gè)栽培品種的蕎麥種子總黃酮含量，米蕎1號(hào)中總黃酮含量最高，黑豐1號(hào)、云南旱苦、苦刺蕎、晉蕎4號(hào)次之，川渝3號(hào)中總黃酮含量最低；苦蕎的總黃酮含量在13.67～21.56mg/g之間，甜蕎總黃酮含量在5.79～7.23mg/g之間，苦蕎總黃酮含量總體高于甜蕎。

表1 不同栽培種蕎麥種子總黃酮含量Table 1 Concentration of total flavonoids in different cultivated species of buckwheat

表2 不同植物部位蕎麥總黃酮含量Table 2 Concentration of total flavonoids in different parts of buckwheat

從表2可以看出，比較各個(gè)栽培品種蕎麥的根、莖、葉、種子4個(gè)植物部位中總黃酮的含量，除西蕎2號(hào)外，每種蕎麥中葉的總黃酮含量均遠(yuǎn)高于根、莖和種子；比較這6個(gè)品種中葉的總黃酮含量，野苦6號(hào)葉中含量最高，西蕎2號(hào)葉中含量最低。

表3 商品苦蕎茶的總黃酮含量Table 3 Concentration of total flavonoids in commodities of buckwheat tea

從表3可以看出商品苦蕎茶中總黃酮的含量，在彝鄉(xiāng)人苦蕎茶的4種商品中，彝鄉(xiāng)人高寒苦蕎茶中含量最高，彝鄉(xiāng)人黑苦蕎全皮茶中含量最低；三匠苦蕎茶的4種商品中，三匠黑苦蕎全株茶的含量最高，三匠黑苦蕎全胚芽茶中含量最低；17種商品苦蕎茶中，幾木朵苦蕎茶中含量最高，藝福堂苦蕎茶中含量最低。

3 結(jié)論

各栽培品種的蕎麥均采收于成都大學(xué)的蕎麥實(shí)驗(yàn)田，所處的生長(zhǎng)環(huán)境相同，但總黃酮含量有較大差距；如果這些蕎麥品種能直接采收于原生長(zhǎng)地，對(duì)之進(jìn)行總黃酮含量的測(cè)定，將會(huì)為蕎麥的研究利用提供更多的科學(xué)依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，葉提取的總黃酮含量最高，但是與目前人們?nèi)匀徽J(rèn)為在商品茶中苦蕎果實(shí)質(zhì)優(yōu)的觀點(diǎn)不一致，本實(shí)驗(yàn)為綜合和高效地利用蕎麥植物資源提供了一定的科學(xué)依據(jù)。不同商品苦蕎茶的總黃酮含量測(cè)定為課題組的系列研究提供了科學(xué)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，更為該類商品的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供了數(shù)據(jù)參考。

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