王明躍 葉曉林

（1.成都市都江堰市第二人民醫(yī)院，四川 成都 611830；2.成都中醫(yī)藥大學藥學院，四川 成都 611137）

目前許多感冒藥中含有多種藥物成分，其含量的測定采用的方法也不同。如復方氨酚苯海拉明片（規(guī)格：每片含對乙酰氨基酚300mg、咖啡因30mg、鹽酸麻黃堿715mg、鹽酸苯海拉明715mg）國家藥品標準采用紫外分光光度法測定對乙酰氨基酚和咖啡因［1］。小兒氨酚黃那敏顆粒系由對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏等組成的復方制劑，現(xiàn)行國家標準只建立了測定對乙酰氨基酚的含量的可見／紫外分光光度法［2］。維C 銀翹片由金銀花、連翹、荊芥、對乙酰氨基酚、維生素C、馬來酸氯苯那敏等14味藥制成，乙酰氨基酚的含量采用HPLC法測定，維生素C的含量用容量滴定法測定［3］。氨酚咖黃烷胺片主要成分為對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、人工牛黃、咖啡因，乙酰氨基酚的含量測定方法為容量法［4］。本文采用HPLC 法直接測定乙酰氨基酚、咖啡因、鹽酸麻黃堿和維生素C 四種組份含量，專屬性強，操作簡捷，結果滿意。

1 材料與方法

1.1 材料

Water 1525型高效液相色譜儀；Water 2487型雙波長紫外檢測器；Water 2487型自動進樣器。RWEKA DT 800 型溶出度實驗儀。乙晴（色譜純，Korea SK）；庚烷磺酸鈉為分析純。復方氨酚咖麻片（韓國Komar公司）由對乙酰氨基酚、咖啡因、鹽酸麻黃堿和維生素C 組成。對照品對乙酰氨基酚、咖啡因、鹽酸麻黃堿和維生素C為Pharmcia產品。

1.2 方法

1.2.1 色譜條件

色譜柱：Capcell-pak C18（5μm，4.6×150 mm，Shiseido）；流動相：乙晴／緩沖液=（30／70）；緩沖液：庚烷磺酸鈉1.0g 加250ml超純水，同時加入2ml高氯酸；每1000ml乙腈加入2ml高氯酸。檢測波長為210nm；流速1.0 ml·min-1；進樣體積10μl，柱溫25℃。

1.2.2 對照品溶液制備

分別精密稱取對乙酰氨基酚（60 mg）、咖啡因（25 mg）、鹽酸麻黃堿（25 mg）和維生素C（180 mg）對照品，加100 ml的50%甲醇制成混合溶液，作為對照品溶液。

1.2.3 供試品溶液制備

取本品20片，研細，精密稱取適量（約相當于乙酰氨基酚60mg、咖啡因25mg、鹽酸麻黃堿25mg、維生素C 180mg），置100mL量瓶中，加50%甲醇，超聲處理10min，加50%甲醇至刻度。用0.45m 微孔濾膜濾過，取濾液，作為供試品溶液。取供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

1.2.4 線性關系的考察

精密稱取對乙酰氨基酚375mg、咖啡因156.25 mg、鹽酸麻黃堿156.25mg和維生素C 1000mg置同一100ml量瓶中，加50%甲醇適量使溶解，最后稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述混合對照品溶液1、2、3、4、5、6、8ml分別置25ml量瓶中，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻。根據(jù)上述色譜條件分別進樣10 μl，記錄色譜圖。以各組分峰面積之比為縱坐標，藥物濃度為橫坐標繪制標準曲線，并對所得數(shù)據(jù)進行回歸分析，得回歸方程。

1.2.5 精密度試驗

取同一標準溶液按上述色譜條件連續(xù)進樣6次，記錄各組分的面積，計算RSD 值。

1.2.6 穩(wěn)定性試驗

取同一供試品溶液，間隔2小時進樣一次，共計8h，記錄各組分峰面積，計算RSD 值。

1.2.7 回收率試驗

精密稱取對乙酰氨基酚120 mg、咖啡因50 mg、鹽酸麻黃堿50mg和維生素C 360mg置同一100ml量瓶中，加50%甲醇適量使溶解，最后稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述混合對照品溶液10、12.5、15ml分別置25ml量瓶中，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，分別相當于處方量的80%、100%和120%。根據(jù)上述色譜條件分別進樣10μl，記錄色譜圖，測定各組分峰面積，計算回收率，共進樣6次，以平均值計算。

1.2.8 樣品含量測定

精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積之計算含量，共測定3個樣品。以下式計算分析含量百分比（Assay）：測定含量／標注含量（35 mg）×100%。

2 結果

2.1 線性關系的考察

結果表明，四種組分可以很好的分離，峰形對稱、無拖尾現(xiàn)象（圖1）。乙酰氨基酚在15mg·100ml-1～120mg·100ml-1范圍內，峰面積與濃度呈現(xiàn)良好的線性關系，線性方程為y=287919x+187227，r=0.9999?？Х纫蛟?.25mg·100ml-1～50mg·100ml-1范圍內，峰面積與濃度呈現(xiàn)良好的線性關系，線性方程為y=695624x-35886，r=0.9994。鹽酸麻黃堿在6.25mg·100ml-1～50mg·100ml-1范圍內，峰面積與濃度呈現(xiàn)良好的線性關系，線性方程為y=201088x+389167，r=0.9998。維生素C 在40mg·100ml-1～320mg·100ml-1范圍內，峰面積與濃度呈現(xiàn)良好的線性關系，線性方程為y=27965x+188324，r=0.9994。

圖1 對乙酰氨基酚、咖啡因、鹽酸麻黃堿和維生素C的色譜圖

2.2 精密度試驗

同一標準溶液按上述色譜條件連續(xù)進樣6次，結果對乙酰氨基酚、咖啡因、鹽酸麻黃堿和維生素C 的RSD 分別是0.81%、0.71%、0.38%和0.22%。

2.3 穩(wěn)定性試驗

同一供試品溶液，間隔2h進樣一次，共計8h，結果對乙酰氨基酚、咖啡因、鹽酸麻黃堿和維生素C 的RSD 分別是0.70%、0.83%、0.45%和0.56%。表明供試品溶液在8h內穩(wěn)定，儀器性能穩(wěn)定。

2.4 回收率試驗

分別取供試液進樣6次進行測定，相當于處方量的80%、100%和120%，測定各組分峰面積，計算回收率，以平均值計算。其回收率以及RSD 值，平均回收率非常接近100%，RSD在允許范圍內，見表1。

表1 回收率測定結果

2.5 樣品含量測定

精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積之計算含量，共測定3個樣品。以下式計算分析含量百分比（Assay）：測定含量／標注含量×100%。結果顯示，3個樣品對乙酰氨基酚、咖啡因、鹽酸麻黃堿和維生素C的含量百分比均值結果見表2。

3 討論

作者采用高效液相色譜同時檢測復方氨酚咖麻片中對乙酰氨基酚、咖啡因、鹽酸麻黃堿和維生素C 的含量，以210nm為檢測波長，在同一條件下可以很好的分離四種藥物成分，色譜圖顯示無拖尾現(xiàn)象，顯示該法靈敏度高，準確度和精密度好，操作簡便，可作為該類制劑的含量測定和質量評價監(jiān)控方法。

表2 樣品含量測定結果（%）

1 國家藥品監(jiān)督管理局.國家藥品標準12冊.復方氨酚苯海拉明片試行標準：WS2100012（HD21152）22.［S］／／國家藥典委員會.國家藥品標準化學藥品地方標準上升國家標準，2002：162.

2 國家藥品監(jiān)督管理局.小兒氨酚黃那敏顆粒試行標準：WS2100012（HD20214）22002［S］／／國家藥典委員會.國家藥品標準化學藥品地方標準上升國家標準，2002：53.

3 國家食品藥品監(jiān)督管理局國家藥品標準WS32B2400029822003［S］.

4 國家藥典委員會.國家藥品標準化學藥品地方標準上升國家標準［S］.第七冊.2002：7-240.