阮汝明張學寧
1.鶴慶縣人民醫(yī)院檢驗科,云南大理671500;2.昆明醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院檢驗科,云南昆明650101
系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)有多種自身抗體存在,一般認為抗核抗體(ANA),抗ds-DNA抗體對SLE診斷有著重要的價值[1]。為進一步探討ANA與抗ds-DNA抗體的滴度高低與SLE的活動性的關(guān)系,該文報告了2007年6月—2012年6月21例SLE活動期患者與47例SLE非活動期患者的ANA與抗ds-DNA抗體的檢測結(jié)果,探討有關(guān)問題如下。
21例活動期患者,全為女性。47例非活動期患者,其中男性患者5例,女性患者42例。全組患者年齡介于12~64歲之間。
1.1.1 病例選擇標準 所選患者均為確診的SLE患者。其分期標準符合JiangX,Chen,F的標準[2],即ANA、抗ds-DNA、ENA三項抗體均為陽性,且IgG>16.8 g/L,補體C3,C4降低的 患者為活動期患者。凡有一條不符合以上條件的為非活動期患者。
1.2.1 ANA的檢測方法及操作步驟 ①檢測方法:用間接免疫熒光法(IIF)檢測ANA。采用ANA檢測試劑盒,其每個反應測試區(qū)都有人上皮細胞(HEP-2)和靈長類肝冰凍組織切片。②操作步驟:將待測血清用 PBS-T ween緩沖液稀釋為 1:100、1:1000等不同稀釋度,然后加樣25 uL于反應區(qū)上,在室溫下溫育30 min后,用PBS-T ween緩沖液沖洗并浸泡1 min以上,然后加20uL IgG熒光抗體至反應區(qū)上,同前溫育及沖洗。最后滴加甘油-PBS封片,置于熒光顯微鏡下觀察。
1.2.2 抗ds-DNA抗體的檢測方法及操作步驟 ①檢測方法:用金標免疫斑點法測抗ds-DNA抗體。采用抗ds-DNA抗體檢測試劑盒。②操作步驟:加TBS緩沖液2滴于反應區(qū)→加樣品4滴→去除濾蓋→加膠體金標記抗體3滴→加 TBS緩沖液1~2滴→觀察結(jié)果[3]。
21例活動期患者均ANA陽性,陽性率為100%。47例非活動期患者ANA陽性為27例,陰性20例,陽性率為57.4%。兩組比較活動期陽性率明顯高于非活動期(P<0.05),而且活動期患者抗體的滴度也明顯高于非活動期患者,經(jīng)比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01),見表 1。
表1 ANA滴度與SLE活動期、非活動期的關(guān)系
21例活動期患者抗ds-DNA抗體陽性為21例,陽性率為100%。47例非活動期患者抗ds-DNA抗體陽性為27例,陽性率為57.4%。兩組比較活動期陽性率明顯高于非活動期 (P<0.05),而且活動期患者抗體的滴度也明顯高于非活動期患者,兩者差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01),見表 2。
表2 抗ds-DNA抗體滴度與SLE活動期、非活動期的關(guān)系
ANA是自身對各種細胞核成分產(chǎn)生相應抗體的總稱,常見于SLE,類風濕性關(guān)節(jié)炎、硬皮病和干燥綜合癥等,在SLE中包含有抗糖蛋白抗體、抗脫氧核糖核酸(DNA)抗體和抗鹽水可提取性核抗原(ENA)抗體。目前診斷SLE和觀察SLE病情的常見檢測為間接免疫熒光法測定ANA,ANA陽性率及陰性率,在活動期患者與非活動期患者之間有著明顯的差異,且滴度變化也存在明顯的差異[4]。故對患者ANA及抗ds-DNA滴度的檢測可估計SLE患者的病情。但據(jù)謝紅付等的報道[5],憑借單純的ANA陰性既不能排除SLE的診斷,也不能否定病情的活動性。
抗ds-DNA抗體變化與ANA試驗結(jié)果在一些方面存在一致性,但也不完全等同??筪s-DNA陽性患者,ANA也為陽性,而抗ds-DNA陰性者,ANA可能為陽性[6]。該研究表明,SLE活動期組患者的抗體滴度顯著大于非活動期組患者,同樣也能用于估計患者的病情及預后。而徐世正等的報道[7]也指出了ANA、抗ds-DNA的消長同臨床活動有著非常密切的聯(lián)系,因而定期檢查患者抗ds-DNA、ANA等,對于監(jiān)察患者的病情變化,預測復發(fā)和指導治療,提供實驗室依據(jù)。
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