蔡君，萬(wàn)佳

（重慶市超臨界精細(xì)化工生產(chǎn)力促進(jìn)中心有限公司，重慶 401123）

辣椒（Capsecum annuum L.）是茄科辣椒屬植物的果實(shí)，目前，世界辣椒主載品種有幾十種，在我國(guó)南北廣泛栽種，產(chǎn)量位具世界第一。辣椒油樹脂（Capsicum oleoresin）是從辣椒中提取、濃縮而得到的一種油狀液體，色香味俱佳，是廣泛應(yīng)用的食品添加劑原料，也是進(jìn)一步提取辣椒紅素（Capsanthin）和辣椒素（Capsaicinoids）的重要中間體。辣椒素在辣椒中的含量因辣椒產(chǎn)地品種不同而異，一般為0.1 %～1 %。辣椒素主要用在調(diào)味品、醫(yī)療、生化農(nóng)藥、軍事等方面，其價(jià)值已廣泛倍受關(guān)注。辣椒紅素不僅色價(jià)高，天然安全無(wú)毒，且具有抗癌美容等功效，目前已廣泛用于食品、醫(yī)藥、化妝品、兒童玩具等領(lǐng)域。傳統(tǒng)的辣椒油樹脂提取方法是溶劑提取法，缺點(diǎn)是溶劑用量大，生產(chǎn)周期長(zhǎng)，生產(chǎn)環(huán)境受溶劑污染性強(qiáng)，更主要的是辣椒油樹脂的辣香味欠佳，辣椒素含量較低，含果膠、蛋白質(zhì)等多糖類雜質(zhì)較多，不利于辣椒素的進(jìn)一步純化提取。因此，國(guó)內(nèi)企業(yè)在普遍重視進(jìn)一步提取辣椒紅素的過(guò)程中多數(shù)將辣椒素作為廢棄物被除去[1-2]。超臨界流體萃取被譽(yù)為“超級(jí)綠色”技術(shù)，具有清潔、安全、高質(zhì)、高效等優(yōu)點(diǎn)，已成功用于食用香料、抗氧化劑、色素、醫(yī)藥中間體等天然產(chǎn)物有效成分提取等生產(chǎn)領(lǐng)域。國(guó)內(nèi)關(guān)于超臨界CO2萃取辣椒油樹脂提取工藝的研究文獻(xiàn)已有較多報(bào)道[2-5]，但對(duì)于辣椒中辣椒油樹脂及其辣椒紅素和辣椒素等多成分綜合提取工藝的研究文獻(xiàn)報(bào)道還較少，僅張晶等用溶劑法對(duì)辣椒油樹脂、辣椒紅素及辣椒素提取工藝的研究[6]。本實(shí)驗(yàn)用超臨界CO2萃取法對(duì)辣椒中辣椒油樹脂及其中的辣椒素、辣椒紅素的綜合提取效果的相關(guān)影響因素進(jìn)行探討，同時(shí)研究辣椒整粒粉碎細(xì)度對(duì)辣椒中各成分提取效果的影響，并對(duì)不同產(chǎn)地辣椒品種提取的辣椒油樹脂的品質(zhì)和得率進(jìn)行比較，旨在對(duì)辣椒成分的綠色提取、綜合利用及重慶產(chǎn)地辣椒品種的深加工產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料，試劑及儀器

干辣椒：重慶石柱朝天椒，貴州小米椒，河南洛陽(yáng)新一代，印度Pimento，市售，各45 ℃烘干，待用；乙醇，分析純；二氧化碳，食品級(jí)，純度99%。

HA221-50-06-C 型超臨界萃取儀：江蘇南通華安超臨界萃取有限公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE-52A：上海雅蓉儀器設(shè)備有限公司；UV-1200 型紫外/可見(jiàn)分光光度計(jì)：上海美譜達(dá)儀器有限公司。

1.2 方法

1.2.1 辣椒油樹脂的超臨界CO2提取工藝的正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

以重慶石柱朝天椒為原料，整粒粉碎，過(guò)篩（孔徑4 mm）后混勻，稱取200 g 與夾帶劑充分混合，投料進(jìn)行超臨界CO2萃取，分離塔出料合并，進(jìn)行純化后處理，得到辣椒油樹脂，以實(shí)際重量計(jì)算得率。以辣椒油樹脂的提取得率及其中的辣椒紅素色值E460和辣椒素的含量為考查目標(biāo)，以萃取壓力，萃取溫度，萃取時(shí)間，乙醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)，乙醇體積分?jǐn)?shù)為5 個(gè)因素，每個(gè)因素根據(jù)超臨界CO2萃取法常用條件及辣椒中主要成分的理化性質(zhì)設(shè)定4 個(gè)水平，采用L1（645）正交表，進(jìn)行辣椒油樹脂及其中的辣椒紅素和辣椒素的綜合提取，各實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次取平均值。通過(guò)正交試驗(yàn)確定辣椒超臨界CO2萃取的最佳工藝條件。

1.2.2 辣椒油樹脂的純化

合并分離塔1 出料和分離塔2 出料，進(jìn)行真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收溶劑，真空干燥，得到辣椒油樹脂。

1.2.3 辣椒紅素的純化及色值測(cè)定

稱取一定量的辣椒油樹脂，用體積分?jǐn)?shù)60%的乙醇溶解，料液比1 ∶5～1 ∶3，室溫下攪拌萃取2 h，靜置分層、離心過(guò)濾，反復(fù)萃取多次，直到萃取液無(wú)辣味為止，所得油層真空干燥，得到脫辣后的辣椒紅素純品。按照GB10783-2008《食品添加劑 辣椒紅》[7]方法測(cè)定辣椒紅素色值E460。

1.2.4 辣椒素的純化及含量測(cè)定

稱取一定量的辣椒油樹脂，按照標(biāo)準(zhǔn)GB28314-2012《食品添加劑辣椒油樹脂》[8]中辣椒素含量測(cè)定方法二的操作步驟，準(zhǔn)確加入100 mL 體積分?jǐn)?shù)70%的甲醇溶液，充分振搖20 min，靜置5 min 后過(guò)濾，保留濾液。按上述標(biāo)準(zhǔn)中表A.1 的要求制備試樣液，用方法二分光光度法測(cè)定辣椒素含量。

1.2.5 辣椒油樹脂的香辣味評(píng)定

隨機(jī)邀請(qǐng)10 名調(diào)香師為一組，對(duì)不同產(chǎn)地辣椒供試品種提取的辣椒油樹脂的香辣味進(jìn)行評(píng)定，以10 分為滿分，9 分以上為很好，7 分以上為較好，6 分及以上為合格，6 分以下為較差。對(duì)評(píng)分結(jié)果作統(tǒng)計(jì)分析。

4.監(jiān)督評(píng)價(jià)機(jī)制的建設(shè) 完善的監(jiān)督評(píng)價(jià)機(jī)制有利于提高內(nèi)部控制體系的執(zhí)行效率，提高醫(yī)院的經(jīng)營(yíng)效益。監(jiān)督評(píng)價(jià)機(jī)制有利于提高各部門的工作效率，制定相應(yīng)的激勵(lì)機(jī)制，有利于提高醫(yī)院?jiǎn)T工的積極性和熱情。監(jiān)督評(píng)價(jià)機(jī)制與三道防線結(jié)合，可以更好的發(fā)揮內(nèi)部控制的作用，提高醫(yī)院的運(yùn)行效率，實(shí)現(xiàn)風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)評(píng)估的最佳效益。

2 結(jié)果與討論

2.1 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

辣椒油樹脂提取工藝的L16（45）因素及水平設(shè)計(jì)見(jiàn)表1。

表1 辣椒油樹脂提取工藝的L16（45）正交因素水平表Table 1 Capsicum oleoresin extraction of L16（45）orthogonal level of form factors

正交設(shè)計(jì)及試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

辣椒油樹脂提取得率的方差分析結(jié)果見(jiàn)表3。

辣椒紅素色值E460的方差分析結(jié)果見(jiàn)表4。

辣椒素含量的方差分析結(jié)果見(jiàn)表5。

表2 辣椒油樹脂提取工藝的L16（45）正交試驗(yàn)結(jié)果Table 2 Capsicum oleoresin extraction of L16（45）orthogonal test results

表3 辣椒油樹脂得率方差分析Table 3 Capsicum oleoresin yield variance analysis

表4 辣椒紅素色值E460方差分析Table 4 Capsanthin color value E460variance analysis

表5 辣椒素含量方差分析Table 5 Capsaicin content analysis of variance

對(duì)正交試驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)做級(jí)差分析，結(jié)果見(jiàn)表2，由表中的R 值分析可知，乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)于辣椒油樹脂的提取得率及其中辣椒紅素色值及辣椒素的含量影響程度最大。從R1可知各因素對(duì)辣椒油樹脂得率的影響程度為E＞A＞D＞B＞C，從R2可知對(duì)辣椒紅素色值的影響程度為E＞B＞D＞A＞C，從R3可知對(duì)辣椒素含量的影響程度為E＞B＞C＞D＞A。由方差分析表3～5 可知，乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)于辣椒紅素色值的影響差異極顯著，而對(duì)于辣椒油樹脂得率和辣椒素含量的影響無(wú)明顯差異，考慮到辣椒紅素和辣椒素的脂溶性較強(qiáng)，因此直觀分析選第4 水平（E4）；因素A 對(duì)于辣椒油樹脂的提取得率有一定影響，而對(duì)于辣椒紅素色值和辣椒素含量的影響無(wú)明顯差異，因此綜合分析選第2 水平（A2）；因素B 和因素D 對(duì)于辣椒紅素色值有一定影響，而對(duì)于辣椒油樹脂得率和辣椒素含量的影響無(wú)明顯差異，因此分別選第2 水平（B2）和第3 水平（D3）；因素C 對(duì)于三者提取均無(wú)明顯影響，根據(jù)級(jí)差綜合分析選第2 水平（C2）。

綜上所述，兼顧辣椒油樹脂得率，辣椒紅素色值和辣椒素含量，自辣椒中綜合提取多種有效成分的超臨界CO2萃取最佳工藝條件為A2B2C2D3E4，即萃取壓力25 MPa，萃取溫度40 ℃，萃取時(shí)間4 h，乙醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%，乙醇體積分?jǐn)?shù)95%。

按照最佳工藝條件A2B2C2D3E4進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次取平均值，獲得辣椒油樹脂提取得率為6.70%，辣椒紅素色值E460=26.9，辣椒素含量為8.54%。實(shí)測(cè)結(jié)果也驗(yàn)證了最佳提取工藝的可靠性。

2.2 整粒粉碎細(xì)度效果的確定

表6 辣椒粉碎細(xì)度效果的比較Table 6 Capsicum crushing fineness effect comparison

表6 可知，用辣椒整粒直接提取辣椒中各有效成分效果均差，篩孔徑4 mm 的辣椒粉碎細(xì)度對(duì)于辣椒油樹脂提取得率和辣椒紅素色值的影響差異均較明顯，而對(duì)于辣椒素含量的影響不太明顯，因此，適宜選擇篩孔徑4 mm 的辣椒粉碎細(xì)度進(jìn)行超臨界CO2萃取。

2.3 不同產(chǎn)地辣椒提取辣椒油樹脂的品質(zhì)和得率比較

采用篩選的最佳工藝參數(shù)及適宜的辣椒粉碎細(xì)度，選擇重慶石柱朝天椒、貴州小米辣、河南洛陽(yáng)新一代、印度Pimento 等辣椒品種進(jìn)行超臨界CO2萃取，各品種重復(fù)實(shí)驗(yàn)三次取平均值，所得各品種的辣椒油樹脂得率，辣椒紅素色值及辣椒素含量見(jiàn)表7。

表7 不同產(chǎn)地辣椒超臨界CO2提取辣椒油樹脂的品質(zhì)和得率比較Table 7 Different areas of supercritical CO2extraction capsicum oleoresin compare the quality and yield

從表7 可知，供試?yán)苯菲贩N中，印度Pimento 辣椒原料中辣椒素含量明顯高于國(guó)內(nèi)辣椒品種，印度辣椒油樹脂中的辣椒素含量也明顯高于國(guó)內(nèi)產(chǎn)品；國(guó)內(nèi)辣椒比較，重慶石柱朝天椒的辣椒素含量較高，其超臨界CO2提取的辣椒油樹脂的香辣味很好，得率較高6.70%，色值E460=26.9，辣椒素含量較高8.54%，其次是貴州小米辣及河南洛陽(yáng)新一代辣椒品種。因此，重慶石柱朝天椒的超臨界CO2萃取辣椒油樹脂是國(guó)內(nèi)較好的食品添加劑調(diào)味原料，也可作為進(jìn)一步提取天然辣椒素的較好中間體原料。

但結(jié)合國(guó)際市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)現(xiàn)狀，目前，印度等進(jìn)口辣椒油樹脂大量沖擊國(guó)內(nèi)市場(chǎng)，主要原因是印度進(jìn)口辣椒油樹脂中的天然辣椒素含量普遍在10%以上，高的可達(dá)到40%，用于進(jìn)一步提取純化辣椒素等高附加值的深加工產(chǎn)品具有明顯的成本競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)。因此，進(jìn)一步改進(jìn)重慶辣椒品種的種植技術(shù)，提高原料中的辣椒素含量用于深加工開發(fā)，提高市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力，是突破重慶辣椒深加工產(chǎn)業(yè)發(fā)展的技術(shù)瓶頸之一。

3 結(jié)論

1）設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)L1（645），得出了超臨界CO2萃取辣椒中辣椒油樹脂及其中辣椒素、辣椒紅素的最佳工藝條件是：萃取壓力25 MPa，萃取溫度40 ℃，萃取時(shí)間4 h，夾帶劑乙醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%，乙醇體積分?jǐn)?shù)95%。

2）考查了辣椒整粒粉碎細(xì)度對(duì)超臨界CO2萃取辣椒中多種有效成分提取效果的影響。結(jié)果表明，適宜以過(guò)篩孔徑4 mm 的辣椒整粒粉碎細(xì)度進(jìn)行超臨界CO2萃取。

本實(shí)驗(yàn)以辣椒油樹脂得率、辣椒紅素色值、辣椒素含量、辣椒整粒粉碎細(xì)度等多因素為考查目標(biāo)，進(jìn)行超臨界CO2萃取工藝的優(yōu)化，考慮因素更全面合理，可實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化，使辣椒中的多種有效成分得到綠色提取和綜合利用。

3）供試?yán)苯菲贩N中，重慶石柱朝天椒提取的辣椒油樹脂得率較高6.7%，香辣味很好，辣椒紅素色值E460=26.9，辣椒素含量較高8.54%，是國(guó)內(nèi)較好的食品添加劑調(diào)味原料，也可作為進(jìn)一步提取天然辣椒素的較好中間體原料，其次是貴州小米辣及河南洛陽(yáng)新一代辣椒品種。

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