楊鵬,閆喜武,韓華,桑士田,霍忠明,劉振,梁健,遲吉祥,楊鳳,張國(guó)范

(1.大連海洋大學(xué)遼寧省貝類良種繁育工程技術(shù)研究中心,遼寧大連116023;2.大連海洋學(xué)校,遼寧大連116023;3.中國(guó)科學(xué)院海洋研究所海洋生物技術(shù)研發(fā)中心,山東青島266071)

鹽度對(duì)翡翠貽貝受精卵孵化及幼蟲(chóng)和稚貝生長(zhǎng)和存活的影響

楊鵬1,閆喜武1,韓華2,桑士田1,霍忠明1,劉振1,梁健1,遲吉祥1,楊鳳1,張國(guó)范3

(1.大連海洋大學(xué)遼寧省貝類良種繁育工程技術(shù)研究中心,遼寧大連116023;2.大連海洋學(xué)校,遼寧大連116023;3.中國(guó)科學(xué)院海洋研究所海洋生物技術(shù)研發(fā)中心,山東青島266071)

在室內(nèi)可控條件下,研究了不同鹽度梯度(10、15、20、25、30、35、40、45)對(duì)翡翠貽貝Perna viridis受精卵孵化及幼蟲(chóng)和稚貝生長(zhǎng)、存活的影響。結(jié)果表明:鹽度為10、40時(shí),貽貝受精卵不能發(fā)育至D形幼蟲(chóng);鹽度為15、30、35時(shí),受精卵可以孵化,但D形幼蟲(chóng)畸形率較高;鹽度為20～25時(shí),受精卵的孵化率較高,畸形率較低,為適宜孵化鹽度;幼蟲(chóng)階段,鹽度為20～25時(shí)存活率和變態(tài)率最高,鹽度為10、45時(shí)幼蟲(chóng)無(wú)法完成變態(tài),幼蟲(chóng)生存的適宜鹽度為20～35;稚貝階段,生長(zhǎng)存活的適宜鹽度為15～35,鹽度為20～25時(shí)生長(zhǎng)速度最快、存活率最高。研究表明,翡翠貽貝幼蟲(chóng)和稚貝對(duì)高鹽度和低鹽度均有很強(qiáng)的適應(yīng)能力。

翡翠貽貝;胚胎發(fā)育;幼蟲(chóng);稚貝;鹽度;生長(zhǎng)發(fā)育;存活

翡翠貽貝Perna viridis屬暖水性海洋貝類,分布于印度洋的東岸、西岸和西北太平洋沿岸,在中國(guó)分布于南海、東海南部和臺(tái)灣海峽沿岸[1]。翡翠貽貝的貝殼呈楔形,殼面光滑,通常為綠色或綠褐色,生長(zhǎng)紋細(xì)密,無(wú)放射肋[2]。翡翠貽貝味道鮮美,含有多種不飽和脂肪酸,市場(chǎng)價(jià)格高于其他貽貝,有廣闊的開(kāi)發(fā)前景。翡翠貽貝的工廠化育苗在南方沿海曾有開(kāi)展[3-5],但對(duì)于育苗過(guò)程中適宜鹽度的把握仍憑經(jīng)驗(yàn)。關(guān)于海水鹽度對(duì)貝類生長(zhǎng)發(fā)育的影響國(guó)內(nèi)外已有不少報(bào)道[6-9],但關(guān)于鹽度對(duì)翡翠貽貝生長(zhǎng)發(fā)育的影響目前尚未見(jiàn)報(bào)道。為此,作者通過(guò)室內(nèi)試驗(yàn),進(jìn)行了鹽度對(duì)翡翠貽貝受精卵孵化及幼蟲(chóng)和稚貝生長(zhǎng)、存活影響的研究,旨在為其人工育苗技術(shù)的完善提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)用2～3齡翡翠貽貝親貝于2012年6月取自廣東湛江。

1.2 方法

在經(jīng)過(guò)兩次沙濾的海水中,加入海水晶或消毒后的自來(lái)水,分別配制成鹽度梯度為10、15、20、25、30、35、40、45的試驗(yàn)用水,用日本ATAGO公司生產(chǎn)的手持鹽度折射儀測(cè)定鹽度。

1.2.1 受精卵的孵化 親貝采回后在大連市莊河貝類養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行人工繁育,受精后計(jì)算受精率。取部分受精卵作為孵化期的試驗(yàn)材料;余下的受精卵孵化后選取活力較好的D形幼蟲(chóng),放入大水槽中培育。培育期間水溫為24.3～29.2℃,鹽度為26～28,pH為7.5～8.4。

1.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1)受精卵發(fā)育試驗(yàn)。取鹽度梯度為10～40的試驗(yàn)用水各2 L,分別加入到3 L的試驗(yàn)桶中,每組均設(shè)2個(gè)平行。將測(cè)定好孵化率的受精卵濃縮后均分到各個(gè)試驗(yàn)桶中,微充氣并加蓋,防止蒸發(fā)后鹽度改變。受精卵發(fā)育試驗(yàn)為從受精后至發(fā)育為D形幼蟲(chóng)結(jié)束,期間D形幼蟲(chóng)出現(xiàn)殼變形扭曲、左右殼不對(duì)稱等異常者均計(jì)為畸形個(gè)體[7]。

2)幼蟲(chóng)培育試驗(yàn)。選取大水槽中活力好、規(guī)格一致的D形幼蟲(chóng)(殼高為89 μm±3.45 μm),均分到盛有鹽度梯度為10～45試驗(yàn)海水的70 L聚乙烯透明桶中,保證每桶幼蟲(chóng)密度均為5～7個(gè)/mL。試驗(yàn)期間合理投餌,每次投餌后調(diào)整鹽度。每?jī)扇胀耆珦Q水一次,變態(tài)期間換水次數(shù)及換水量均減半,變態(tài)結(jié)束后恢復(fù)換水量。

3)稚貝培育試驗(yàn)。對(duì)變態(tài)期存活率達(dá)到30%以上的試驗(yàn)組,選取活力較好、變態(tài)完全的稚貝各200枚,放入之前與其生存鹽度一致的3 L白桶中培育。

收集在各鹽度試驗(yàn)組中活力較好的60日齡稚貝,裝袋后掛入海區(qū)進(jìn)行恢復(fù)生長(zhǎng),20 d后進(jìn)行測(cè)量。

1.3 數(shù)據(jù)處理

幼蟲(chóng)和稚貝的殼長(zhǎng)、殼高在40×目微尺下測(cè)量,后期幼貝用電子卡尺測(cè)量,測(cè)量時(shí)每次隨機(jī)抽取30個(gè)個(gè)體。各指標(biāo)的計(jì)算公式如下:

受精卵孵化率=D形幼蟲(chóng)總個(gè)數(shù)/受精卵總個(gè)數(shù)×100%,

D形幼蟲(chóng)畸形率=畸形D形幼蟲(chóng)總個(gè)數(shù)/D形幼蟲(chóng)總個(gè)數(shù)×100%,

生長(zhǎng)速率=(試驗(yàn)結(jié)束時(shí)的殼長(zhǎng)-試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)的殼長(zhǎng))/試驗(yàn)天數(shù),

幼蟲(chóng)存活率=浮游末期的幼蟲(chóng)數(shù)量/D形幼蟲(chóng)總個(gè)數(shù)×100%,

變態(tài)率=稚貝(以出次生殼為標(biāo)志)數(shù)/足面盤(pán)幼蟲(chóng)數(shù)量×100%,

稚貝存活率=稚貝存活個(gè)體數(shù)/剛變態(tài)稚貝數(shù)×100%。

2 結(jié)果與分析

2.1 鹽度對(duì)受精卵孵化的影響

在水溫為24.5～26.0℃的條件下,鹽度為10、40的組受精卵均無(wú)法發(fā)育至D形幼蟲(chóng);鹽度為40的組多數(shù)胚胎發(fā)育至擔(dān)輪幼蟲(chóng)期前后發(fā)育停止,10 h后擔(dān)輪幼蟲(chóng)出現(xiàn)破裂死亡的現(xiàn)象;鹽度為10的組胚胎早期分裂異常較多,極少能發(fā)育至擔(dān)輪幼蟲(chóng);鹽度為15、30、35的組孵化較好,但有較高的畸形率,其中鹽度為20～25的組孵化率較高,且畸形率低,為受精卵孵化的最適鹽度(圖1)。

圖1 各鹽度組受精卵的孵化率和D形幼蟲(chóng)的畸形率Fig.1 The hatching rate and D larval abnormal rate at different salinity

2.2 鹽度對(duì)幼蟲(chóng)生長(zhǎng)、存活和變態(tài)的影響

鹽度為10、45的組幼蟲(chóng)無(wú)法完成變態(tài),但鹽度為45的組幼蟲(chóng)前期仍有生長(zhǎng),且存活幼蟲(chóng)多數(shù)處于殼頂中期階段,5 d后開(kāi)始大量死亡,9 d時(shí)的存活率低于10%;鹽度為10的組幼蟲(chóng)有明顯的低滲反應(yīng),游動(dòng)異常,不久沉底,僅胃部和面盤(pán)微弱活動(dòng),16 h后出現(xiàn)死亡現(xiàn)象,72 h后死亡率極高,且無(wú)生長(zhǎng),仍處于D形幼蟲(chóng)階段;鹽度為40的組幼蟲(chóng)生長(zhǎng)存活和變態(tài)率較低;鹽度為15的組優(yōu)于鹽度為40的組,但仍次于鹽度為20～35的組(表1、表2)。

表1 各鹽度組浮游幼蟲(chóng)不同日齡時(shí)的生長(zhǎng)情況Tab.1 The growth of pelagic larvae at different salinities at various days

表2 各鹽度組幼蟲(chóng)的生長(zhǎng)、存活和變態(tài)情況Tab.2 The growth,survival and metamorphosis of the larvae at different salinities μm/d

從試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看,鹽度為20～35時(shí),浮游期幼蟲(chóng)的生長(zhǎng)存活率較高,都能附著變態(tài)。因此,翡翠貽貝浮游期幼蟲(chóng)的較適宜生存鹽度為20～35。同時(shí),鹽度為20～25時(shí)幼蟲(chóng)生長(zhǎng)快速,存活變態(tài)率較高,為變態(tài)期幼蟲(chóng)生長(zhǎng)和存活的最適鹽度范圍。

2.3 鹽度對(duì)稚貝生長(zhǎng)和存活的影響

經(jīng)過(guò)一個(gè)月的觀測(cè),發(fā)現(xiàn)各鹽度組稚貝的生長(zhǎng)存活情況與浮游幼蟲(chóng)相近,最適鹽度仍為20～25;鹽度為15的組稚貝的后期生長(zhǎng)優(yōu)于鹽度為35的組;鹽度為40的組稚貝生長(zhǎng)依然為所有試驗(yàn)組中最差的(圖2)。這表明,稚貝期生長(zhǎng)存活的適宜鹽度為15～35。

圖2 各鹽度組稚貝的生長(zhǎng)速度和存活率Fig.2 The daily growth and survival rate of the juveniles exposed to different salinities

2.4 稚貝在自然海區(qū)的恢復(fù)生長(zhǎng)和存活情況

在莊河自然海區(qū),溫度和鹽度都比較穩(wěn)定(溫度16.6～18.2℃,鹽度26)的條件下,經(jīng)過(guò)20 d的恢復(fù)生長(zhǎng),各組稚貝的生長(zhǎng)及存活情況如圖3所示。鹽度為15、30、35的組均有不同程度的恢復(fù)生長(zhǎng),且生長(zhǎng)速度與鹽度為20、25的組差異不顯著。存活率仍以鹽度為20～25時(shí)最高,但鹽度為15的組幼貝的存活率高于鹽度為30和35的組。

圖3 恢復(fù)生長(zhǎng)期間各鹽度組稚貝的存活率和生長(zhǎng)速度Fig.3 The survival rate and daily growth of the juveniles in different salinity groups during the recovery growth

3 討論

鹽度的變化對(duì)不同海洋生物的生理生存影響是不同的[7,10]。翡翠貽貝屬于廣鹽性貝類,對(duì)鹽度變化的適應(yīng)能力較強(qiáng)。本試驗(yàn)結(jié)果表明,翡翠貽貝孵化期、浮游幼蟲(chóng)期和稚貝變態(tài)期最適鹽度均為20～25,而孵化期的適宜鹽度與浮游幼蟲(chóng)期、稚貝期卻有明顯不同;早期胚胎發(fā)育對(duì)鹽度的適應(yīng)范圍要比幼蟲(chóng)和稚貝的存活、生長(zhǎng)鹽度范圍狹窄[6],而幼蟲(chóng)變態(tài)以后,各器官逐步完善,表現(xiàn)出對(duì)不利鹽度耐受力逐漸增強(qiáng)的趨勢(shì),對(duì)鹽度的耐受范圍便進(jìn)一步擴(kuò)大。這與何義朝等[6]報(bào)道的鹽度對(duì)海灣扇貝不同發(fā)育階段的影響結(jié)果相吻合。

從本試驗(yàn)結(jié)果還可以看出,在不利鹽度條件下,翡翠貽貝表現(xiàn)出低孵化率及較高的畸形率,說(shuō)明鹽度對(duì)胚胎發(fā)育有顯著影響。浮游幼蟲(chóng)期間,鹽度為45的高鹽度組中幼蟲(chóng)仍有一段時(shí)間的生長(zhǎng),但鏡檢觀察發(fā)現(xiàn),在高鹽度脅迫下,浮游幼蟲(chóng)逐漸表現(xiàn)出活動(dòng)能力減弱,攝食能力下降,最終死亡。可能是由于幼蟲(chóng)原來(lái)飼育在適宜的環(huán)境中,體內(nèi)積累了一定量的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),當(dāng)移入不利環(huán)境中后,幼蟲(chóng)仍然可依靠自身的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及卵中所帶來(lái)的蛋白質(zhì)、碳水化合物和類脂物所提供的能量繼續(xù)生長(zhǎng);但當(dāng)體內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗殆盡后生長(zhǎng)則停止[9]。而鹽度為10時(shí),幼蟲(chóng)死亡極快,說(shuō)明低滲的負(fù)面影響更嚴(yán)重[11]。

稚貝期間,鹽度為15的組翡翠貽貝的生長(zhǎng)超過(guò)鹽度為35的組,說(shuō)明隨著稚貝的生長(zhǎng)發(fā)育,對(duì)低鹽度的適應(yīng)能力強(qiáng)于對(duì)高鹽度[12]的適應(yīng)能力,這與翡翠貽貝所處南方海域降水頻繁的生存環(huán)境有一定關(guān)系。幼貝在自然海區(qū)恢復(fù)生長(zhǎng)階段,鹽度為15～35時(shí)幼貝都有不同程度的恢復(fù)生長(zhǎng),進(jìn)一步說(shuō)明翡翠貽貝稚貝及幼貝對(duì)鹽度適應(yīng)的廣泛性。

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The influence of salinity on hatching,growth and survival of larvae and juveniles in green mussel Perna viridis

YANG Peng1,YAN Xi-wu1,HAN Hua2,SANG Shi-tian1,HUO Zhong-ming1,LIU Zhen1, LIANG Jian1,CHI Ji-xiang1,YANG Feng1,ZHANG Guo-fan3
(1.Engineering Research Center of Shellfish Culture and Breeding in Liaoning Province,Dalian Ocean University,Dalian 116023,China;2.Dalian Ocean School,Dalian 116023,China;3.Research and Development Center of Marine Biotechnology,Institute of Oceanology,Chinese Academy of Sciences,Qingdao 266071,China)

The influences of salinity(10,15,20,25,30,35,40,and 45)on hatching,growth and survival of larvae and juveniles were studied in green mussel Perna viridis in indoor controlled conditions from July to August in 2011.The results showed that no D larvae were found in the development of fertilized egg exposed to a salinity of 40 and 10.The fertilized eggs were shown to hatch at salinity of 15,30,and 35,with higher deformity rate in D larvae.The higher hatching rate,and lower deformity rate were observed at the optimal salinity from 20 to 25.At larval stage,the maximal survival and metamorphic rate were observed in 20 salinity group and 25 salinity group,no metamorphosis at salinity of 10 and 45,and salinity adaptability of 20-35 for the larvae.The mussel juveniles showed suitable salinity from 15 to 35,and had the best survival at salinity of 20-25,indicating that green mussel have very strong adaptive ability to high salinity and low salinity.

Perna viridis;embryonic development;larva;juvenile;salinity;growth and development;survival

S968.3

A

2013-04-08

國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)(CARS-48)

楊鵬(1986-),男,碩士研究生。E-mail:495326388@qq.com

閆喜武(1962-),男,教授。E-mail:yanxiwu@dlou.edu.cn

2095-1388(2013)06-0549-04