宋洪文,周 鑫
(黑龍江林業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院,黑龍江 牡丹江 157011)
郁李(PrunusjaponicaThunb)屬薔薇科、櫻屬。落葉灌木,高約1.5m,小枝纖細(xì),葉卵圓形,長(zhǎng)3~7cm,寬1.5~2.5cm,先端漸尖,基部圓形,邊緣有淺重鋸齒,花先于葉或與葉同時(shí)開(kāi)放,花梗長(zhǎng)5~10mm,花直徑約2cm,倒卵形,花瓣粉紅色或近白色,核果近球形,直徑約1cm,暗紅色,光滑而有光澤,花期3~5月,是園林中重要的觀花、觀果樹(shù)種,常與棣棠、迎春等其他花木配植,也可作花籬栽植。郁李常規(guī)用種子繁殖,花色變化大,花色的不確定性加大了植物配置難度,限制了郁李的使用,而微型繁殖技術(shù)不但可以快速繁殖,同時(shí)使花色穩(wěn)定,利于園林利用。
選取健壯的枝條,用飽滿而未萌發(fā)的側(cè)芽作為外植體,切成小段,每段長(zhǎng)2~3cm。每段帶有1個(gè)側(cè)芽,用自來(lái)水沖洗15min,在無(wú)菌條件下用75%的酒精消毒30s,再用0.1%升的汞消毒7~8min,最后用無(wú)菌水沖洗6~8遍,在超凈工作臺(tái)上把它們接種于不同的培養(yǎng)基上。
2.2.1 側(cè)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)
以MS為基本培養(yǎng)基,不同種類(lèi)、濃度的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑組合形成1~48號(hào)側(cè)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基(表1),將外植體接種于不同的培養(yǎng)基上,培養(yǎng)2周后,觀測(cè)生長(zhǎng)情況。
表1 不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑組合培養(yǎng)基編號(hào)
2.2.2 增殖培養(yǎng)
根據(jù)2.2.1實(shí)驗(yàn)結(jié)果,將誘導(dǎo)培養(yǎng)中高達(dá)到1cm的側(cè)芽,接種于以MS為基本培養(yǎng)基,KT濃度分別為2.0mg/L、2.5mg/L、3.0mg/L、3.5mg/L、4.0mg/L,IBA濃度分別為0.1mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L、1.5 mg/L的叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,培養(yǎng)2周后,觀測(cè)生長(zhǎng)情況。
2.2.3 生根培養(yǎng)
將誘導(dǎo)培養(yǎng)中高達(dá)到1cm的側(cè)芽,接種于以1/2 MS為基本培養(yǎng)基,KT濃度分別為0.1mg/L、0.2mg/L、0.4mg/L,IBA濃度分別為0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L的生根培養(yǎng)基上,培養(yǎng)2周后,觀測(cè)生長(zhǎng)情況。
外植體在不同的側(cè)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基生長(zhǎng)15d,每種培養(yǎng)基隨機(jī)抽取10個(gè)樣本,統(tǒng)計(jì)分析誘導(dǎo)率結(jié)果,從表2可以看出NAA對(duì)側(cè)芽誘導(dǎo)結(jié)果有一定影響,但差異不顯著;IBA對(duì)側(cè)芽誘導(dǎo)結(jié)果有顯著影響,以0.1mg/L最好,0.5mg/L次之,1.0mg/L最差;BA 對(duì)側(cè)芽誘導(dǎo)結(jié)果有顯著影響;KT對(duì)側(cè)芽誘導(dǎo)結(jié)果有極顯著影響;NAA×BA的交互作用對(duì)側(cè)芽誘導(dǎo)不顯著;NAA×KT和IBA×BA的交換作用對(duì)側(cè)芽誘導(dǎo)均顯著;IBA×KT交換作用對(duì)側(cè)芽誘導(dǎo)極顯著。IBA與KT組合好于其他組合,從圖1可以看出IBA與KT組合的28號(hào)培養(yǎng)基側(cè)芽誘導(dǎo)率最高,達(dá)到87.9%,即 MS+KT1.5+I(xiàn)BA0.1側(cè)芽誘導(dǎo)效果最好。
表2 不同培養(yǎng)基側(cè)芽誘導(dǎo)率方差分析結(jié)果
圖1 不同培養(yǎng)基平均側(cè)芽誘導(dǎo)率統(tǒng)計(jì)
隨機(jī)抽取培養(yǎng)基樣品各40個(gè),統(tǒng)計(jì)分析叢生芽有效(不含玻璃化或形成愈傷組織的芽)增值率(表3),KT濃度變化對(duì)叢生芽有效增值率影響顯著(P<0.05),KT促進(jìn)芽分化效果顯著(P<0.05),過(guò)高濃度KT產(chǎn)生玻璃化或形成愈傷組織,使叢生芽有效增值率降低;IBA促進(jìn)芽生長(zhǎng)作用顯著(P<0.05),在同一KT濃度下,隨著IBA濃度的升高芽的高生長(zhǎng)加大,增值率降低,而 KT在3.0mg/L,IBA 0.10mg/L有效增值率最高,因而最佳叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+KT3.0mg/L+I(xiàn)BA0.1mg/L,有效增值率5.9。
表3 不同培養(yǎng)基側(cè)芽有效增值率方差分析
隨機(jī)抽取不同培養(yǎng)基各40個(gè)樣品,統(tǒng)計(jì)有效根發(fā)生率(表4),IBA促進(jìn)生根效果顯著(P<0.05),濃度低于1.0mg/L時(shí)隨著濃度增加促進(jìn)生根效果明顯,濃度大于1.0mg/L時(shí),形成愈傷組織、出現(xiàn)玻璃化現(xiàn)象增加,因而隨著濃度增加有效根數(shù)量減少;KT抑制根的發(fā)生,隨著濃度的增加有效生根率較低。最佳根誘導(dǎo)培養(yǎng)基為1/2MS+I(xiàn)BA0.5,生根率達(dá)85%。
表4 不同培養(yǎng)基有效生根率方差分析
郁李微型繁殖誘導(dǎo)側(cè)芽分化最佳培養(yǎng)基:MS+KT1.5+I(xiàn)BA0.1mg/L,誘導(dǎo)率達(dá)到87.9%;叢生芽誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基:MS+KT3.0mg/L+I(xiàn)BA0.1mg/L,增值率為5.9;生根最佳培養(yǎng)基:1/2MS+I(xiàn)BA0.5mg/L,生根率85%。
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