王慧等

摘要：為篩選防治蘋果霉心病高效、低毒、低殘留的藥劑，采用生長速率法測定了6種殺菌劑對蘋果霉心病菌（粉紅單端孢菌，Trichothecium roseum Bull）的室內(nèi)毒力。結(jié)果表明，6種藥劑對蘋果霉心病菌菌絲生長的抑制效果不同，涂干劑EC抑菌效果最好，其EC50為3.715 μg/mL；78%波爾·錳鋅WP、70%丙森鋅WP及10%苯醚甲環(huán)唑WG的抑菌效果差別不大，EC50在19.011～87.700 μg/mL之間；80%代森錳鋅WG EC50為7.161 μg/mL，抑菌效果也較好；75%百菌清WP的抑菌效果較差，EC50為3 169.567 μg/mL。

關(guān)鍵詞：蘋果霉心病；粉紅單端孢菌；殺菌劑；毒力測定

中圖分類號：S436.611 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）06-1309-03

中國是傳統(tǒng)的蘋果生產(chǎn)大國，不論是蘋果的栽培面積還是產(chǎn)量都穩(wěn)居世界第一，自20世紀(jì)60年代以來，蘋果產(chǎn)量逐年增加，對經(jīng)濟(jì)發(fā)展起到了良好的促進(jìn)作用[1]。蘋果霉心病是由粉紅單端孢菌（Trichothecium roseum Bull）引起的一種真菌性病害，多發(fā)生于中國遼寧、山東、山西、陜西、四川、北京等地區(qū)，引起生長期落果和貯藏期果實(shí)腐爛，發(fā)病嚴(yán)重時(shí)，果實(shí)可見褐色水漬狀、不規(guī)則的濕腐斑 塊，最后全果腐爛，果肉味苦，嚴(yán)重影響蘋果的產(chǎn)量及商品性[2-5]。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，貴州省貴陽地區(qū)已有該病發(fā)生，隨著貴州山區(qū)農(nóng)業(yè)開發(fā)和產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整，蘋果種植面積逐年擴(kuò)大，霉心病也隨之加重[6]。有效控制霉心病的發(fā)生與危害已成為當(dāng)前蘋果種植亟待解決的重要課題，有必要進(jìn)行該病的防治技術(shù)研究。為篩選出高效、低毒、低殘留的防治藥劑，進(jìn)行了6種藥劑對蘋果霉心病菌的室內(nèi)毒力試驗(yàn)。

1 材料和方法

1.1 供試藥劑

供試藥劑為6種殺菌劑，詳情見表1。

1.2 培養(yǎng)基

PDA培養(yǎng)基，配方：去皮馬鈴薯200 g，瓊脂20 g、葡萄糖15 g、水1 L；含藥培養(yǎng)基，將殺菌劑用無菌水稀釋后與PDA培養(yǎng)基混合均勻，制成系列濃度梯度含藥平板培養(yǎng)基[7，8]，各處理藥劑濃度見表2。

1.3 供試菌

2011年8月采集貴州省貴陽市白云區(qū)、花溪區(qū)的感病蘋果，采用實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法分離純化[9]，得到供試菌。經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定及DNA測序，確定供試菌為粉紅單端孢菌，屬半知菌亞門（Deuteromycotina） 肉座菌目（Hypocreales）。

1.4 毒力的測定

無菌條件下將供試菌菌株接種于PDA培養(yǎng)基上，放入溫度為25 ℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。10 d后用打孔器在菌落邊緣、菌絲生長旺盛處制作菌餅，菌餅轉(zhuǎn)接到含藥PDA培養(yǎng)基上，菌絲一面接觸培養(yǎng)基。以不加藥劑而加等量無菌水的PDA培養(yǎng)基為對照（CK），每個(gè)處理設(shè)3次重復(fù)。25 ℃恒溫培養(yǎng)6 d后用十字交叉法測量菌落直徑，取平均值，計(jì)算抑制率。

抑制率=（對照菌落直徑-處理菌落直徑）/（對照菌落直徑-菌餅直徑）×100%。

以處理濃度（μg/mL）值的對數(shù)值為橫坐標(biāo)（x）、抑制率值為縱坐標(biāo)（y）求出毒力回歸方程，并計(jì)算抑制中濃度（EC50）及相關(guān)系數(shù)，以上過程通過SPSS軟件輔助完成[10]。

2 結(jié)果與分析

2.1 殺菌劑對蘋果霉心病菌的抑制作用

6種殺菌劑對蘋果霉心病菌菌絲的抑制作用測定結(jié)果（表2）表明，在設(shè)定的藥劑濃度范圍內(nèi)，供試菌菌絲的生長均受到不同程度抑制。從抑制率變化情況來看，隨著藥劑濃度增加，抑制率增大；各藥劑中，百菌清濃度較大，但抑制率卻不大；涂干劑處理濃度較小，抑制效果整體較好。整體上，各藥劑都表現(xiàn)出處理濃度與抑制率呈正相關(guān)關(guān)系。

2.2 殺菌劑對蘋果霉心病菌的毒力比較

通過不同藥劑的毒力回歸方程、EC50和相關(guān)系數(shù)比較各殺菌劑對蘋果霉心病菌的毒力（表3）可知，6種供試藥劑的濃度與抑菌率的相關(guān)性均達(dá)顯著水平，處理濃度值的對數(shù)值和抑制率值呈線性相關(guān)。6種藥劑對蘋果霉心病菌菌絲生長的抑制效果不同，利用EC50來比較殺菌劑對供試菌的毒力，可知涂干劑抑菌效果最好，EC50達(dá)到3.715 μg/mL；百菌清抑菌效果差，EC50為3 169.567 μg/mL；波爾·錳鋅、丙森鋅及苯醚甲環(huán)唑的抑菌效果差別不大，EC50為19.011～87.700 μg/mL；代森錳鋅抑菌作用也較強(qiáng)，EC50為7.161 μg/mL。

3 小結(jié)

毒力試驗(yàn)結(jié)果表明，6種殺菌劑對蘋果霉心病菌菌絲生長均有抑制作用，但作用大小有所不同，EC50由大到小依次為百菌清、丙森鋅、波爾·錳鋅、苯醚甲環(huán)唑、代森錳鋅、涂干劑；6種藥劑中，涂干劑的抑菌效果明顯優(yōu)于其他5種，75%百菌清WP的抑菌效果最差，其他4種藥劑抑菌效果介于兩者之間。試驗(yàn)結(jié)果表明，由貴州道元生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的中藥復(fù)配劑涂干劑EC對蘋果霉心病菌室內(nèi)抑制效果比較好，大田應(yīng)用情況有待進(jìn)一步試驗(yàn)驗(yàn)證。

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