李桂明 林樹乾 趙增成等

作者簡介：李桂明（1980-），男，助理研究員，碩士，研究方向為新獸藥研發(fā)。

通訊作者：宋敏訓(xùn)（1963-），男，研究員，博士，主要研究方向為禽病診斷與新獸藥研發(fā)。

摘要：自行研制的環(huán)糊精包合碘具有有效碘含量高、質(zhì)量穩(wěn)定和刺激性小等優(yōu)點。參考《消毒技術(shù)規(guī)范2002版》的方法，分別以木質(zhì)桌面、自然水體和雞舍為消毒對象，驗證其臨床消毒效果。結(jié)果表明，環(huán)糊精包合碘1∶ 800倍（W/V）樣品稀釋液，對木質(zhì)桌面消毒作用10 min，對物體表面自然菌的平均殺滅對數(shù)值為243；1∶ 10 000倍（W/V）投入自然水體，10 min大腸桿菌殺滅率為100%，10～30 min自然菌殺滅率為9965%～100%；1∶ 500倍（W/V）樣品稀釋液，60 min對雞舍地面、墻壁自然菌殺滅率為9273%和9358%。

關(guān)鍵詞：環(huán)糊精包合碘；消毒；自然菌

中圖分類號：S857.12+3 文獻標識號：A 文章編號：1001-4942（2013）06-0099-03

在畜禽養(yǎng)殖過程中，碘制劑以其消毒效果好、毒副作用低、刺激性小、無殘留[1，2]以及無生態(tài)毒性等優(yōu)點而被廣泛應(yīng)用。其中，季銨鹽碘和聚維酮碘目前已在臨床中廣泛使用[3]。但有機絡(luò)合碘制品有效碘釋放率較低、環(huán)境消毒成本高，制約了在獸醫(yī)臨床中的推廣應(yīng)用[4]?！碍h(huán)糊精包合碘”是碘單質(zhì)被β-環(huán)糊精包合形成的超分子結(jié)構(gòu)，其有效碘（I）含量高、穩(wěn)定性好、水溶性強。本試驗參考《消毒技術(shù)規(guī)范2002》進行物體表面消毒、水體消毒和雞舍消毒試驗，驗證其消毒效果，為開發(fā)新型消毒劑提供有效依據(jù)，降低畜禽傳染病對養(yǎng)殖業(yè)的危害，保障食品安全。1 材料與方法11 試劑與儀器

111 物體表面消毒 消毒劑：環(huán)糊精包合碘（有效碘169%）稀釋成1∶ 800倍，山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所提供。

中和劑：含05%硫代硫酸鈉+02%卵磷脂+3%吐溫-80的磷酸鹽緩沖液。

培養(yǎng)基：胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基。

稀釋液：02%吐溫-80磷酸鹽緩沖液（PBS）。

無菌棉拭子：一次性醫(yī)用棉簽滅菌后備用。

規(guī)格板：50 mm × 50 mm無菌不銹鋼規(guī)格板。

受試對象：山東省實驗動物中心微生物準備室木質(zhì)桌面。

112 水體消毒 消毒劑：環(huán)糊精包合碘（有效碘169%），稀釋成1∶ 10 000倍，山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所提供；以聚維酮碘為對照消毒劑。

中和劑：含05%硫代硫酸鈉+02%卵磷脂+3%吐溫-80的磷酸鹽緩沖液。

自然菌采用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，大腸桿菌采用麥康凱培養(yǎng)基。

受試對象：濟南郊區(qū)自然水樣。

113 雞舍消毒 消毒劑：環(huán)糊精包合碘（有效碘169%）稀釋成1∶ 500倍，山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所提供。

試驗動物與條件：200只50日齡育成雞，雞舍長×寬×高=3 m × 57 m × 28 m。

培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

無菌棉拭子：一次性醫(yī)用棉簽滅菌后備用。

培養(yǎng)皿：統(tǒng)一采用內(nèi)徑90 mm培養(yǎng)皿。

12 試驗方法

121 物體表面消毒 參考《消毒技術(shù)規(guī)范》（2002年版） 2129，將規(guī)格板放于木質(zhì)桌面，30個區(qū)塊作為陽性對照區(qū)，樣本不擦拭消毒液進行采樣；30個區(qū)塊為試驗區(qū)，將配好的消毒液對木質(zhì)桌面噴灑至濕潤，消毒作用10 min。用棉拭子涂抹法進行采樣，統(tǒng)計自然菌落數(shù)，計算殺滅對數(shù)值。另設(shè)陰性對照，即將同批次中和劑、稀釋液各取10 ml培養(yǎng)基，檢測中和劑和稀釋液中是否有自然菌。

殺滅對數(shù)值=消毒前菌數(shù)對數(shù)值-消毒后菌數(shù)對數(shù)值

122 水體消毒 取9份水樣，每份水樣1 L，其中4份分別加入01 g的環(huán)糊精包合碘，另外4份加入01 g聚維酮碘，1份不加消毒劑，攪拌均勻，記錄時間。根據(jù)加入消毒劑時間，第1份水樣加入環(huán)糊精包合碘10 min后加入中和劑，迅速取樣，進行原液、1∶ 10、1∶ 100三個濃度進行計數(shù)；第2份20 min后加入中和劑，同樣方法進行細菌計數(shù)，依次類推。聚維酮碘采取相同辦法。每個濃度重復(fù)2次，計算平均值。不加消毒劑及加入消毒劑后不同時間點進行自然菌和大腸桿菌培養(yǎng)計數(shù)。

123 雞舍消毒 地面消毒先由外向內(nèi)噴霧1次，噴藥量為250 ml/m²，待室內(nèi)消毒完畢后，再由內(nèi)向外重復(fù)噴霧1次。墻壁消毒噴灑量為100 ml/m²。 于消毒前、消毒30 min、60 min進行采樣?？諝?個點（墻角12 m處4個點加室中心1個點）、地面3個點（東、中、西）、墻面4個點（12 m處4個墻角）。空氣采樣參考GB/T 17093-1997采用自然沉降法；墻面和地面采樣方法如下：將無菌棉拭子在含 10 ml 稀釋液（09%生理鹽水）試管中浸濕，于管壁上擠干，對采樣區(qū)（選定5 cm×5 cm范圍）涂抹采樣，橫豎往返各 8次。采樣后，以無菌操作方式將棉拭采樣端剪入原稀釋液試管內(nèi)，電動混勻器振蕩20 s或在手掌振打200次，做適當(dāng)稀釋后備用。采樣后實驗室進行自然菌計數(shù)，計算單位體積（或面積）的自然菌數(shù)。

2 結(jié)果與分析

21 物體表面消毒效果

由表1可知，所試環(huán)糊精包合碘1∶ 800倍（W/V）樣品稀釋液，對木質(zhì)桌面噴灑至濕潤，消毒作用10 min，其物體表面自然菌的殺滅對數(shù)值

綜合分析數(shù)據(jù)，殺滅對數(shù)值基本在平均值附近，考慮菌落計數(shù)的實際操作誤差，認為本次試驗可以證明環(huán)糊精包合碘對物體表面消毒有效。22 水體消毒效果

由表2可知， 10 min環(huán)糊精包合碘和聚維酮碘對自然菌殺滅率為9965%和9947%，20 min均為9982%，30 min殺滅率則為100%；環(huán)糊精包合碘和聚維酮碘均能在10 min內(nèi)殺滅水體大腸桿菌。環(huán)糊精包含碘在效用上與市面流行的產(chǎn)品——聚維酮碘消毒效果相當(dāng)，但環(huán)糊精包合碘為水溶性、成本低，所以推定新型殺毒劑環(huán)糊精包合碘水體消毒效果良好。

23 雞舍消毒效果

由表3可知，30 min地面和墻面自然菌殺滅率為7971%和7775%，60 min殺滅率分別為9273%和9358%?？梢钥闯觯?0 min時地面自然菌殺滅率較墻面高，可能是由于液體存留地面起到較長時間的消毒效果；60 min時地面自然菌殺滅率反而較低，可能是由于隨著時間的推移，地面更易受菌落沉降的影響。同時發(fā)現(xiàn)，該新型消毒劑對空氣也有一定的殺菌作用，30 min和60 min自然菌殺滅率分別為1767%和1164%，但是殺滅效果不理想。

3 結(jié)論與討論

桌面消毒試驗用于鑒定消毒劑對一般物體表面自然菌的殺滅作用，以驗證消毒劑的使用劑量。本試驗所試環(huán)糊精包合碘1∶ 800倍（W/V）樣品稀釋液，對木質(zhì)桌面噴灑至濕潤，消毒作用10 min，對物體表面自然菌的平均殺滅對數(shù)值為243，>10，符合2002年版《消毒技術(shù)規(guī)范》的要求。熊鴻燕等（1999）[5]采用交聯(lián)淀粉碘（有效碘含量6393 mg/g）為消毒劑對自來水進行消毒試驗， 結(jié)果認為5 g/L（有效碘含量為每升水3197 mg）作用5～10 min可殺滅自然菌的9973% ～ 9994%。本試驗有效碘含量為每升水169 mg，10 min殺滅率達到9965%，取得了較好的殺菌效果。在雞舍中使用環(huán)糊精包合碘對墻面和地面進行消毒，60 min自然菌殺滅率達到92%以上。同時發(fā)現(xiàn)，本消毒劑對空氣自然菌具有一定的殺滅作用，但殺滅作用有限；60 min空氣中細菌總數(shù)反而多于30 min，推測隨著時間的延長糞便中的細菌繼續(xù)擴散至空氣中，在下一步試驗中需要增加空氣噴霧消毒以達到消毒效果。參 考 文 獻：

[1] Durani P，Leaper DPovidone-iodine： use in hand disinfection， skin preparation and antiseptic irrigation[J]Int Wound J， 2008，5（3）： 376-87

[2] Mbithi J N， Springthorpe V S， Satta S A rChemical disinfection of hepatitis a virus on environmental surfaces[J]Appl Envir Microbiol， 1990，56： 3601-3604

[3] Elisabeth P， Miranda S， Michaela E， et al Effects of alcohols， povidone-iodine and hydrogen peroxide on biofilms of Staphylococcus epidermidis[J] J Antimicrob Chemother，2007，60： 417-420

[4] Maenthaisong R， Chaiyakunapruk N， Thamlikitkul V Cost- effectiveness analysis of chlorhexidine gluconate compared with povidone-iodine solution for catheter-site care in Siriraj Hospital， Thailand[J] J Med Assoc Thai， Nov， 2006， 89 Suppl 5： S94-101

[5] 熊鴻燕， 張 凌， 劉育京， 等交聯(lián)淀粉碘的制備及對水中細菌殺滅效果的研究[J]中國消毒學(xué)雜志，1999，16（1）：1-6