謝宏峰 遲玉成 許曼琳等

作者簡介：謝宏峰（1980-），女，碩士，助理研究員，研究方向?yàn)橹参锉Ｗo(hù)。

通訊作者：遲玉成（1969-），男，博士，副研究員，研究方向?yàn)橹参锉Ｗo(hù)。

摘要：采用生長速率法研究了蓖麻籽粗提物對花生網(wǎng)斑病菌的抑制作用。結(jié)果表明：不同濃度的蓖麻籽粗提物對花生網(wǎng)斑病菌均有不同程度的抑制作用，且隨著藥劑濃度的增加，抑制率增大；但隨著時間的推移，抑制效果逐漸減弱，24、48、96 h的EC50分別為2183、36727和43878 mg/L。

關(guān)鍵詞：蓖麻籽；粗提物；花生網(wǎng)斑??；抑制作用

中圖分類號：S435.652 文獻(xiàn)標(biāo)識號：A 文章編號：1001-4942（2013）06-0081-03

花生網(wǎng)斑病是花生生產(chǎn)上的一種重要的葉部病害[1]。該病在花生整個生長期均可發(fā)生，以花生生長中后期發(fā)病最重，主要危害葉片，其次危害葉柄和莖部，一般減產(chǎn)10%～20%，嚴(yán)重的達(dá)30%以上[2]。目前，化學(xué)防治仍是植物病害最主要的防治措施，但化學(xué)藥劑存在毒性大、殘留高、成本高、污染環(huán)境等問題。植物源活性殺菌劑具有分解快、殘留低、污染少和毒性小等特點(diǎn)，因此利用植物源活性物質(zhì)防治植物病害的研究逐漸受到重視并引起廣泛關(guān)注[3]。

蓖麻（Ricinus communus L） 屬大戟科蓖麻屬，為雙子葉一年生或多年生植物。蓖麻是具有特殊工業(yè)用途的油料植物，是集多種開發(fā)功能于一體的生物資源，也是一種重要的生物殺蟲、抗癌和生物抗污染源[4]。 從蓖麻中提取的蓖麻毒素具有較強(qiáng)的殺蟲、殺菌作用，是制造生物農(nóng)藥的重要來源[5]。已有研究表明，蓖麻籽粗提物對黃瓜褐斑病、玉米小斑病病菌有明顯的抑制作用[6，7]。 本試驗(yàn)以花生網(wǎng)斑病病菌為研究對象，研究了蓖麻籽粗提物對花生網(wǎng)斑病病菌的生物活性，以期為花生網(wǎng)斑病的生物防治提供依據(jù)。1 材料與方法

11 供試材料

蓖麻籽購自青島市李滄區(qū)農(nóng)貿(mào)市場；網(wǎng)斑病病菌（Phoma arachidicola Marasas，Pauer & Boerema）由山東省花生研究所病害與微生物實(shí)驗(yàn)室分離、保存。

12 試驗(yàn)方法

121 蓖麻籽粗提物的制備 蓖麻籽粗提物采用索氏提取法抽提[8]。將蓖麻籽置于40～50℃烘箱中恒溫干燥，粉碎后過0180～0425 mm孔篩。取50 g粉末，包好，放入提取器中（不超過虹吸管），再加入5倍植物粉末量的95%乙醇，抽提24 h后取出抽濾，旋轉(zhuǎn)濃縮至1 g/ml （干物質(zhì)量計(jì)），裝入棕色玻璃瓶中，置4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

122 對網(wǎng)斑病菌的生物活性測定 無菌條件下，將PDA培養(yǎng)基與粗提液充分混勻，粗提液濃度分別為50、100、200、300、500 mg/L，制備直徑90 mm的固體平板培養(yǎng)基，以不添加粗提液的PDA培養(yǎng)基為對照。網(wǎng)斑病菌培養(yǎng)5天后，用滅菌的打孔器制備菌餅（直徑為5 mm），將菌餅接種到固體培養(yǎng)基中央，每皿一塊，菌絲面朝下放置，每處理重復(fù)3次。置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，28℃黑暗條件下培養(yǎng)，分別在24、48、96 h采用十字交叉法測量菌落直徑，計(jì)算生長抑制率：

由表1可以看出，蓖麻籽粗提物在50～500 mg/L之間，花生網(wǎng)斑病菌均受到不同程度的抑制作用，且隨著藥劑濃度的增加，抑制率也增加。但隨著時間的推移，抑制效果逐漸減小，24、48、96 h的EC50分別為2183、36727、43878 mg/L。3 討論

隨著人們食品安全意識的不斷增強(qiáng)和對農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留問題的關(guān)切，利用非化學(xué)方法控制病蟲害受到植物保護(hù)工作者越來越多的重視，開發(fā)對有害生物高效、對非靶標(biāo)生物安全、對環(huán)境友好的生物農(nóng)藥己成為新的研究熱點(diǎn)[8]。 蓖麻種子、

葉片中含有多種殺菌生物活性物質(zhì)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，蓖麻籽粗提物對花生網(wǎng)斑病菌在一定濃度范圍內(nèi)具有不同程度的抑制作用，隨著時間的推移，抑制作用逐漸減小。其原因可能是由于非藥劑因素隨著時間的推移逐漸加強(qiáng)，從而消弱了藥劑的作用。另外，抑制細(xì)菌生長需要粗提物的濃度較高，可能是由于提取的純度不夠，導(dǎo)致用藥量過大。

蓖麻不同組織由于所含活性物質(zhì)的成分和含量不同[5]，其對病菌的作用效果存在明顯的差異。本試驗(yàn)只研究了蓖麻籽粗提物的殺菌作用，要有效利用蓖麻的生物活性物質(zhì)進(jìn)行植物病害防治，還需要對蓖麻不同部位活性物質(zhì)的抑菌效果進(jìn)行研究，并且對抑菌活性物質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步分離純化，真正的應(yīng)用于生產(chǎn)還需做大量研究工作。參 考 文 獻(xiàn)：

[1] 樊堂群， 遲玉成， 謝宏峰，等 不同抗性花生感染網(wǎng)斑病菌的酶活性及丙二醛含量變化[J] 花生學(xué)報(bào)， 2009，38（4）：31-34

[2] 徐秀娟，石延茂，徐明顯，等 花生網(wǎng)斑病的發(fā)生與防治研究[J] 山東農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2009，4：29-30

[3] 文艷華， 馮志新， 徐漢虹， 等 植物抽提物對幾種植物病原線蟲的殺線活性篩[J] 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)， 2001，20（3）：235-238

[4] 黃家祥 蓖麻生產(chǎn)及綜合開發(fā)利用技術(shù)[M] 北京： 中國農(nóng)業(yè)出版社， 2005

[5] 溫燕梅， 馮亞非， 鄭明珠 蓖麻不同部位殺蟲活性成分蓖麻堿的提取及含量[J] 農(nóng)藥， 2008， 47 （8）：584-585

[6] 吳雪平， 田雪亮， 項(xiàng)志鋒 蓖麻籽水提物對黃瓜褐斑病菌的生物活性研究[J] 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)， 2006，15 （6）：215-216

[7] 吳雪平， 鄧天福， 項(xiàng)志鋒 蓖麻籽水提物對玉米小斑病菌的毒力測定[J] 古林農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2006，31（4）：43-44， 52

[8] 周福才， 顧愛祥， 周桂生， 等 蓖麻葉片粗提物對黃瓜瓜絹螟的作用[J] 中國生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)， 2012，20（5）：629 -624