陳建衡等

【摘 要】目的：研究和探討中藥水蛭素的藥理作用，為臨床開發(fā)應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法：取小鼠和大鼠，隨機(jī)分模型對(duì)照組、中藥水蛭素大劑量組、中藥水蛭素小劑量組，連續(xù)灌胃給藥6-15天。單核細(xì)胞吞噬活性實(shí)驗(yàn)，小鼠腹腔注射0.5%的雞紅細(xì)胞懸液，取腹腔洗液，電熱恒溫水浴箱中孵浴，丙酮、甲醇液固定，染色，油鏡下觀察單核細(xì)胞吞噬雞紅血球的數(shù)目。足跖腫脹抑制實(shí)驗(yàn)，最后一次給藥1h后，于大鼠右后跖腱膜下注入1%角叉菜膠，分別測定致炎后不同時(shí)間內(nèi)足跖腫脹程度。結(jié)果：各用藥組與模型對(duì)照組相比較，具有顯著性差異。結(jié)論：中藥水蛭素能明顯提高小鼠單核細(xì)胞的吞噬活性，具有促進(jìn)細(xì)胞免疫的作用，同時(shí)水蛭素對(duì)角叉菜膠致炎的大鼠足跖腫脹具有較強(qiáng)的抑制功效。

【關(guān)鍵詞】中藥水蛭素；單核細(xì)胞吞噬活性；足跖腫脹

水蛭的應(yīng)用在我國已有兩千多年的歷史，是傳統(tǒng)醫(yī)藥中經(jīng)典的活血化瘀中藥，為環(huán)節(jié)動(dòng)物水蛭科螞蟥寬體金線蛭（Whitmania pagra Whitman）的全體， 其主要有效成分是水蛭素，廣泛用于臨床治療各種疑難病癥，且無明顯的毒副作用。為了更深入的開發(fā)中藥水蛭素的藥理作用，我們對(duì)該藥進(jìn)行了基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 動(dòng)物：昆明種健康小白鼠，雄性，體重20±0.5g，合格證號(hào)：動(dòng)管質(zhì)字（2010）第189號(hào)，山東省動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。Wistar大白鼠，雄性，體重150±5g，合格證號(hào)：動(dòng)管質(zhì)字（2010）第256號(hào)，山東省動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。

1.2 藥品：中藥水蛭素，山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院中醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)室提供。

1.3 試劑：丙酮溶液（分析純），甲醇溶液（化學(xué)純），山東新華制藥總廠生產(chǎn)，批號(hào)20100802。角叉菜膠，廣東宏發(fā)試劑有限公司生產(chǎn)，批號(hào)20090819。

1.4儀器：雙目電子顯微鏡，江蘇南京醫(yī)療器械公司生產(chǎn)。精密扭力天平，山東永遠(yuǎn)科技公司生產(chǎn)。電熱恒溫水浴箱，上海實(shí)驗(yàn)儀器總廠生產(chǎn)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1中藥水蛭素對(duì)單核細(xì)胞吞噬活性的影響

① 動(dòng)物分組：取雄性小鼠45只，隨機(jī)分成3組，每組15只。模型對(duì)照組、

中藥水蛭素大劑量組，中藥水蛭素小劑量組。

② 動(dòng)物用藥：模型對(duì)照組給予同體積的生理鹽水；實(shí)驗(yàn)大劑量組給予中藥水蛭素2.8g/kg；實(shí)驗(yàn)小劑量組給予中藥水蛭素1.4g/kg，每日灌胃給藥1次，每次0.6ml。連續(xù)灌胃給藥15天，于第16天小鼠腹腔注射0.5%的雞紅細(xì)胞懸液，次日處死動(dòng)物，取腹腔洗液滴于玻璃片上，置37℃電熱恒溫水浴箱中孵浴30分鐘，丙酮、甲醇液中固定，瑞氏液染色，電子顯微油鏡下觀察單核細(xì)胞吞噬雞紅血球的數(shù)目，并計(jì)算吞噬指數(shù)及吞噬率。

2.1中藥水蛭素對(duì)足跖腫脹的抑制作用：

① 動(dòng)物分組：取雄性大鼠36只，隨機(jī)分成3組，每組12只。模型對(duì)照組、中藥水蛭素大劑量組，中藥水蛭素小劑量組。

② 動(dòng)物用藥：模型對(duì)照組給予同體積的生理鹽水；實(shí)驗(yàn)大劑量組給予中藥水蛭素2.8g/kg；實(shí)驗(yàn)小劑量組給予中藥水蛭素1.4g/kg，每日灌胃給藥1次，每次1.5ml。連續(xù)給藥6天，最后一次給藥1h后，于大鼠右后跖腱膜下注入1%角叉菜膠0.5u/只，分別測定致炎后不同時(shí)間內(nèi)足跖腫脹程度。

3 結(jié)果

3.1統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析t檢驗(yàn)，研究數(shù)據(jù)均以 ±S表示。各用藥組與模型對(duì)照組相比較，具有顯著性差異。

3.2.實(shí)驗(yàn)表明：中藥水蛭素能明顯提高小鼠單核細(xì)胞的吞噬活性，具有促進(jìn)細(xì)

胞免疫的作用，大小劑量組吞噬指數(shù)和吞噬率均P< 0.02，見表1。同時(shí)中藥水

蛭素對(duì)角叉菜膠致炎的大鼠足跖腫脹具有較強(qiáng)的抑制功效，大小劑量組P<0.05～0.01，見表2。

4 討論

中藥水蛭味咸性苦，歸肝經(jīng)，具有活血化瘀、通經(jīng)絡(luò)的功效，廣泛用于臨床治療各種疑難病癥，受到國內(nèi)外醫(yī)學(xué)工作者的高度關(guān)注。水蛭素是中藥水蛭的活性成分，一種多肽類蛋白。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，水蛭素活性成分是一種強(qiáng)有力的抗凝素，含有凝血酶抑制劑，凝血因子Xa抑制劑，血小板聚集抑制劑，血小板糖蛋白拮抗劑。水蛭素能顯著的降低血液粘度，中和凝血酶元，阻止血液凝固，促進(jìn)血液循環(huán)，對(duì)抗ADP誘導(dǎo)的血栓形成，同時(shí)中藥水蛭素還具有良好的鎮(zhèn)痛和抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用。本課題組所做的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，水蛭素能明顯提高小鼠單核細(xì)胞的吞噬活性，具有促進(jìn)細(xì)胞免疫的作用，同時(shí)對(duì)角叉菜膠致炎的大鼠足跖腫脹具有較強(qiáng)的抑制功效。中藥水蛭素含有多種藥理活性，具有非常廣闊的應(yīng)用前景。

傳統(tǒng)醫(yī)藥是一個(gè)偉大的寶庫，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)已逐漸打開了它古老的大門，并用藥理實(shí)驗(yàn)和基礎(chǔ)研究來闡述中醫(yī)學(xué)的理論，必將產(chǎn)生廣闊的市場前景和深遠(yuǎn)的社會(huì)意義。

參考文獻(xiàn)：

[1] 吳淑一、劉有名、王光生等.活血化瘀中藥的應(yīng)用。中國醫(yī)藥雜志，2009，18（9）：173-176。

[2] 王曉國、章大鳴、溫容飛等.中藥水蛭素的抗癌作用。中國海洋藥物雜志，2010，21（16）：202-206。

[3] 劉澤幕、張中康、吳曉寧等.中藥對(duì)免疫功能的影響。中國康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志，2011，17（8）：168-202。

[4] 任鐘林、孫佛力、馬東亮等. 水蛭素對(duì)微循環(huán)的影響。實(shí)用中西醫(yī)結(jié)合雜志，2011，12（8）：216-219。

[5] 徐流東、劉小清、代明明等. 水蛭近年來的研究進(jìn)展，中國基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2011，19（10）：：315-318。