韓國慶

【摘 要】目的：探討HIF-1α、VDGF-C在宮頸鱗癌組織中的表達(dá)及臨床意義。方法：運(yùn)用免疫組化S-P法檢測HIF-1α、VDGF-C在145例宮頸鱗癌組織、16例宮頸CIN組織、16例正常宮頸組織中的表達(dá)。結(jié)果：HIF-1α、VDGF-C在宮頸鱗癌組織中的表達(dá)陽性率分別為82.1%（119/145）、86.2%（125/145）；在CIN組織中分別為37.5%（6/16）、31.3%（5/16）；在正常宮頸組織中分別為6.3%（1/16）、12.5%（2/16）。宮頸鱗癌組織中HIF-1α、VDGF-C的表達(dá)均與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P<0.05），均與患者年齡、腫塊大小無關(guān)（P>0.05）。兩蛋白陽性表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.398，P<0.01）。隨訪5年的107例患者中HIF-1α、VDGF-C陽性患者5年生存率均低于HIF-1α、VDGF-C陰性患者。結(jié)論：HIF-1α、VDGF-C的高表達(dá)參與宮頸鱗癌的發(fā)生發(fā)展，并且兩蛋白具有協(xié)同作用，檢測兩蛋白的表達(dá)情況可作為臨床腫瘤生物學(xué)行為和患者預(yù)后判斷的參考指標(biāo)。

【關(guān)鍵詞】HIF-1α；VDGF-C；宮頸鱗癌；判斷預(yù)后

在世界范圍內(nèi)，子宮頸癌是女性第二位常見的惡性腫瘤，其中以鱗狀細(xì)胞癌為主。低氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）是介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞缺氧適應(yīng)的關(guān)鍵性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，與腫瘤的增殖、浸潤密切相關(guān)。血管內(nèi)皮生長因子-C（VDGF-C）是特異性的淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子，與腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移有關(guān)。本研究采用免疫組化S-P法檢測HIF-1α、VDGF-C在宮頸鱗癌組織、癌前組織及正常宮頸組織中的表達(dá)，結(jié)合臨床資料探討其關(guān)系及臨床病理意義。

1 材料與方法

1.1 材料 選用2005年7月～2012年7月在我院收治的宮頸鱗癌、CIN等患者，實(shí)驗(yàn)標(biāo)本分為3組。①正常組：正常宮頸組織15例，平均年齡45.4歲；②宮頸CIN組：15例，平均年齡42.5歲；③鱗癌組：鱗癌150例，平均年齡54.2歲。按國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FIGO）2009年宮頸癌臨床分期標(biāo)準(zhǔn)，臨床早期83例，臨床晚期67例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移65例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移85例。所有病例臨床、病理資料完整，患者術(shù)前均未進(jìn)行過抗腫瘤治療。術(shù)后隨訪資料完整107例，隨訪時(shí)間12～66個(gè)月，中位隨訪時(shí)間25個(gè)月，死亡6例。

1.2 免疫組化染色 采用S-P法，HIF-1α抗體、VDGF-C抗體、通用型S-P試劑盒及DAB顯色試劑盒均購自上海長島生物技術(shù)有限公司，染色方法及步驟按說明書進(jìn)行，用PBS代替一抗作為陰性對照，已知陽性切片作為陽性對照。

1.3 結(jié)果判讀 細(xì)胞漿或細(xì)胞核見到清晰的棕褐色顆粒者為陽性細(xì)胞。每例標(biāo)本觀察5個(gè)高倍視野，通過綜合染色強(qiáng)度指數(shù)均值進(jìn)行半定量分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 用SPSSl6.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行分析，組間差異比較采用x?檢驗(yàn)，兩分類變量之間的關(guān)聯(lián)性分析采用Pearson列聯(lián)系數(shù)度量，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HIF-1α的表達(dá) HIF-1α在鱗癌組、宮頸CIN組及正常組陽性表達(dá)率為82.1%（119/145）、37.5%（6/16）、6.3%（1/16）。HIF-1α蛋白陽性表達(dá)與腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和腫瘤臨床分期有密切相關(guān)（均P<0.05），低分化組表達(dá)高于高、中分化組（x?=6.74，P<0.01）；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（x?=16.65，P<0.01），臨床分期晚期高于臨床分期早期（x?=10.12，P<0.01），與患者年齡、腫塊大小無關(guān)（P>0.05）。

2.2 VDGF-C的表達(dá) VDGF-C在鱗癌組、宮頸CIN組及正常組陽性表達(dá)率為86.2%（125/145）、31.3%（5/16）、12.5%（2/16）。VDGF-C的表達(dá)在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（x?=15.25，P<0.01），在臨床晚期的表達(dá)高于I臨床早期 （x?=12.95，P<0.01），與患者年齡、腫塊大小及分化程度無關(guān)（P>0.05）。

2.3 HIF-1α、VDGF-C表達(dá)的相關(guān)性分析 結(jié)果顯示，HIF-1α、VDGF-C在宮頸鱗癌組織中陽性表達(dá)呈正相關(guān)（r0.398，P<0.01）。

2.4 HIF-1α、VDGF-C的表達(dá)與病人預(yù)后關(guān)系 術(shù)后隨訪完整資料107例，HIF-1α陽性病人5年生存率14%，明顯低于HIF-1α陰性病人的27%。VEGF-C陽性病人5年生存率12%，明顯低于VEGF-C陰性病人的31%。

3 討論

宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤之一，盡管臨床上采用宮頸刮片、液基細(xì)胞涂片、HPVDNA檢測、陰道鏡等多種檢測手段進(jìn)行宮頸癌的早期檢測，對早期宮頸癌的排查起了一定作用，大大提高了宮頸癌的早期檢出率。但由于女性對惡性腫瘤缺乏有效的認(rèn)識和監(jiān)控手段，仍有許多患者死于復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。

HIF-1α可調(diào)節(jié)多種靶基因的表達(dá)。對維持腫瘤細(xì)胞的能量代謝、促進(jìn)新血管生成及腫瘤增殖和轉(zhuǎn)移起重要作用，且受多種癌基因的調(diào)控。HIF-1α可以引起新的血管形成，使腫瘤細(xì)胞適應(yīng)乏氧微環(huán)境，而得以持續(xù)生長和擴(kuò)散轉(zhuǎn)移。本研究結(jié)果顯示，HIF-1α在宮頸鱗癌組織中表達(dá)升高，明顯高于宮頸CIN及正常宮頸組織，其陽性表達(dá)與腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和腫瘤臨床分期有密切相關(guān)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，臨床分期晚期組高于臨床分期早期組，HIF-1α的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和腫瘤臨床分期密切相關(guān)。

VDGF-C是一種分泌性多肽，又稱淋巴管生長因子，是血管內(nèi)皮生長因子家族成員，研究報(bào)道認(rèn)為其可促進(jìn)淋巴管生長，與腫瘤細(xì)胞增殖及向區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、抑制腫瘤細(xì)胞凋亡、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞侵襲能力有關(guān)。VDGF-C可誘導(dǎo)實(shí)體瘤組織內(nèi)或腫瘤組織周的淋巴管生成及充盈擴(kuò)張，促進(jìn)惡性腫瘤細(xì)胞進(jìn)行淋巴道轉(zhuǎn)移。本組實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，VDGF-C在腫瘤組織表達(dá)升高，在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，臨床晚期組的表達(dá)高于臨床早期組，VDGF-C的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期密切相關(guān)。

結(jié)果還顯示HIF-1α、VDGF-C在宮頸鱗癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)；術(shù)后隨訪資料表明，HIF-1α、VDGF-C高表達(dá)患者術(shù)后生存率低于其低表達(dá)組。這些研究結(jié)果表明，HIF-1α、VDGF-C的高表達(dá)在宮頸鱗癌的增殖過程中及其對患者預(yù)后有著重要的作用。

綜上所述，HIF-1α、VDGF-C蛋白在宮頸鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)升高與鱗癌的發(fā)生、浸潤及轉(zhuǎn)移過程密切相關(guān)，HIF-1α、VDGF-C表達(dá)升高提示患者臨床預(yù)后不良，可作為中老年宮頸鱗癌病人判斷預(yù)后及生物學(xué)行為的參考指標(biāo)。

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