陸祥彬　徐妍

【摘 要】目的：了解泰州市區(qū)從業(yè)人員攜帶沙門菌菌型分布和藥物敏感情況，為制定有效防治措施及指導(dǎo)合理用藥提供科學(xué)依據(jù)。方法：對(duì)我中心2009-2010年度飲服從業(yè)人員健康體檢中初篩分離到的148株疑似沙門菌株進(jìn)行系統(tǒng)生化和血清分型鑒定并采用紙片擴(kuò)散法（ K- B）檢測(cè)抗生素耐藥性， 依據(jù)NCCLS規(guī)定判斷結(jié)果。結(jié)果：2009-2010年度檢出的沙門菌中 ，E群占62.96% ，D群占12.96% ， B群占10.18%、 C群占8.33%，A群和其他群各占2.78%，其中中以E群的山夫登堡和火雞沙門菌為優(yōu)勢(shì)菌型，分別為29.63%、25.00%。108株沙門菌藥敏實(shí)驗(yàn)表明沙門菌對(duì)頭孢噻肟、環(huán)丙沙星、復(fù)方新諾明高度敏感，但有耐藥株出現(xiàn)；諾氟沙星、氨芐青霉素、慶大霉素、四環(huán)素、萘啶酸出現(xiàn)不同程度耐藥，其中萘啶酸耐藥率達(dá)100.00%，結(jié)論：泰州市區(qū)從業(yè)人員攜帶沙門菌血清型以山夫登堡和火雞沙門菌為主，耐藥分析提示應(yīng)加強(qiáng)沙門菌耐藥性監(jiān)測(cè)，對(duì)合理選擇及使用抗生素提供指導(dǎo)。

【關(guān)鍵詞】沙門菌；菌型分布；耐藥性；血清學(xué)鑒定

沙門氏菌在自然界中有2000多種血清型[1]，在我國(guó)檢出的沙門菌血清型約有200多種[2]，幾乎所有的血清型都會(huì)污染食物引起發(fā)病， 是人畜共患的腸道病原菌。飲食和服務(wù)行業(yè)的從業(yè)人員帶菌往往會(huì)引起食物中毒和腸道傳染病的發(fā)生或流行。為了解泰州市飲食、公共場(chǎng)所服務(wù)的從業(yè)人員腸道沙門氏菌帶菌和藥物敏感狀況，進(jìn)一步加強(qiáng)飲食、公共場(chǎng)所服務(wù)

行業(yè)的衛(wèi)生監(jiān)督管理及合理的用藥指導(dǎo)。本文對(duì)泰圳市2009-2010年度從業(yè)人員健康體檢初步分離出的148株疑似沙門菌進(jìn)行系統(tǒng)生化和血清學(xué)鑒定，并對(duì)沙門菌株進(jìn)行耐藥性試驗(yàn)分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料和方法

1.1 菌株來(lái)源 菌株系泰州市疾病預(yù)防控制中心2009-1010年對(duì)38018名從業(yè)人員健康體檢的肛拭標(biāo)本按國(guó)標(biāo)經(jīng)初步培養(yǎng)分離獲得的148份疑似菌株（2009年80株，2010年68株）。菌株收集于MicobankTM凍存管中置-75℃冰箱保存。

1.2 主要試劑與儀器 營(yíng)養(yǎng)肉湯、SS 培養(yǎng)基、MIU、 三糖鐵培養(yǎng)基（北京陸橋生物技術(shù)有限責(zé)任公司）、MH瓊脂和10種藥敏紙片（氨芐西林、阿莫西林 /克拉維酸、頭孢噻吩、環(huán)丙沙星、萘啶酸、諾氟沙星、頭孢噻肟、 慶大霉素、 復(fù)方新諾明、四環(huán)素由江蘇省疾病預(yù)防控制中心提供（由北京天壇藥物生物技術(shù)開發(fā)公司生產(chǎn)），細(xì)菌鑒定儀由法國(guó)梅里埃生物制品有限公司生產(chǎn)，沙門菌診斷血清系衛(wèi)生部蘭州生物制品研究所生產(chǎn)。均在有效期內(nèi)使用。

1.3 菌株復(fù)活、系統(tǒng)生化和血清學(xué)鑒定 將含收集菌株的MicobankTM迅速置于38℃恒溫培養(yǎng)箱中融化15分鐘，用無(wú)菌接種環(huán)挑2-3粒吸附菌株的磁珠放入營(yíng)養(yǎng)肉湯增菌液中37℃ 培養(yǎng) 18 h后，劃線轉(zhuǎn)種SS瓊脂平板 ， 37℃培養(yǎng) 24 h后 ，挑取可疑菌落進(jìn)行革蘭染色鏡檢 ，將革蘭陰性桿菌及初步生化符合沙門菌特點(diǎn)的單個(gè)菌落純培養(yǎng)物進(jìn)一步經(jīng)ATB自動(dòng)生化系統(tǒng)鑒定 ，再將系統(tǒng)生化鑒定結(jié)果屬于沙門菌屬的單個(gè)菌株進(jìn)行血清學(xué)鑒定和分型。

1.4 藥敏試驗(yàn) 試驗(yàn)方法和判斷標(biāo)準(zhǔn)均按美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（NCCLS ） 標(biāo)準(zhǔn)，采用K-B 紙片擴(kuò)散法，用大腸埃希菌ATCC25922 作為標(biāo)準(zhǔn)菌株[3] 。

2結(jié)果

2.1菌株鑒定結(jié)果 148份疑似菌株經(jīng)系統(tǒng)生化和血清學(xué)鑒定，檢出沙門菌株108株。其中2009年75株沙門菌，5株弗勞地枸櫞酸桿菌；2010年33株沙門菌，25株弗勞地枸櫞酸桿菌，5株奇異變形桿菌，5株系統(tǒng)生化提示沙門菌屬，但A-F-O多價(jià)不凝。

2.2帶菌狀況分析 從38018份標(biāo)本中，檢出腸道沙門菌帶菌者108例，平均檢出率0.28%，其中2009年從業(yè)人員18650人，檢出沙門菌75株 ，檢出率為0.4%；2010年從業(yè)人員19368人，檢出沙門菌33株，檢出率0.17%，較上年度檢出率降低，經(jīng)卡方檢驗(yàn)兩者具有顯著性差異 （ χ2= 18.02，P<0.05）。導(dǎo)致沙門菌檢出率降低可能與以下因素有關(guān)：由于生活條件的改善導(dǎo)致個(gè)人防護(hù)意識(shí)增強(qiáng)，衛(wèi)生習(xí)慣的改變；衛(wèi)生監(jiān)管部門的管理力度加強(qiáng)等。在108例帶菌者中，男性36人，女性72人，可能與該行業(yè)中女性占大多數(shù)有關(guān)。

2.3沙門菌群型分布 根據(jù)ATB系統(tǒng)生化反應(yīng)，血清學(xué)凝集，將108株沙門菌分為6個(gè)群（E群分E1，E4亞群），21個(gè)血清型。E群所占比例最高，68株占62.96%，D群居第2位，占12.96%，其次是B群占10.18%、C群8.33%、A群和其他群分別占2.78%。（表1）

3討論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在疑似沙門菌株中除沙門菌外還檢出30株弗勞地枸櫞酸桿菌、5株奇異變形桿菌，其原因：同屬腸桿菌科其抗原有部分相同，甚至少數(shù)種完全相同，其中弗勞地枸櫞酸桿菌與沙門菌間抗原關(guān)系可能更密切些，因此細(xì)菌與診斷血清間交叉凝集反應(yīng)現(xiàn)象甚為普遍。相關(guān)報(bào)道也甚為不少[4-6]。這提示我們應(yīng)對(duì)這兩種條件致病菌加以關(guān)注，因?yàn)樗麄円矔?huì)引起食源性感染的發(fā)生。另外，有6株未鑒定出血清型，推測(cè)原因是可能受到血清分型試劑的限制，或與菌種凍存造成部分抗原缺失有關(guān)，或者是非A-F群沙門菌（有待進(jìn)一步分析研究），由于沙門菌血清型種類繁多，新的血清型又不斷出現(xiàn)，單純的血清分型已不能滿足需要，迫切需要新分型標(biāo)準(zhǔn)和檢驗(yàn)方法來(lái)研究沙門菌的生物學(xué)特性。

本研究發(fā)現(xiàn)泰州市區(qū)飲服從業(yè)人員沙門菌平均檢出率為0.28%，與有關(guān)報(bào)道基本相符[7]。同時(shí)，從業(yè)人員攜帶的沙門菌主要菌型是E群中的山夫登堡、火雞沙門菌，分別占29.63%（26/108）和25.00%（27/108）以及D群中的都伯林沙門菌。該結(jié)果與我市2011年度哨點(diǎn)醫(yī)院主動(dòng)監(jiān)測(cè)分離到的沙門菌主要血清型大體相符[8]，但與其他地方還存在地區(qū)差異[9-10]。隨著服務(wù)業(yè)的迅速發(fā)展，地區(qū)間物資交流頻繁，外來(lái)人口的增多，特別飲服從業(yè)人員的流動(dòng)性很強(qiáng)導(dǎo)致沙門氏菌在該人群的分布有很大的不確定性，一旦外來(lái)少見菌型的進(jìn)入，容易引起廣泛的感染，導(dǎo)致嚴(yán)重的公共衛(wèi)生事件[11]。因此衛(wèi)生部門必須加強(qiáng)食品和飲水環(huán)境衛(wèi)生管理，特別是飲服從業(yè)人員的健康管理，要連續(xù)長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)及時(shí)發(fā)現(xiàn)和治療帶菌者，才能最大限度地防止從業(yè)人員帶菌污染食品，而造成疾病的流行與傳播。

本文藥敏結(jié)果顯示，108株沙門菌對(duì)頭孢噻肟、復(fù)方新諾明、阿莫西林/棒酸的耐藥率為0，對(duì)環(huán)丙沙星耐藥率僅僅為7.41%，提示本地可用這幾種藥物有效治療沙門菌感染。而頭孢噻吩、諾氟沙星、氨芐青霉素、慶大霉素、四環(huán)素、萘啶酸出現(xiàn)不同程度耐藥，其中萘啶酸完全耐藥達(dá)100.00%，這情形與吳偉元等人[12]的研究結(jié)果相似，但與王曉泉等人的研究稍有差異[13]，主要是出現(xiàn)對(duì)諾氟沙星耐藥菌株，應(yīng)引起重視。因?yàn)榉Z酮類和第三代頭孢類藥物是目前臨床治療沙門菌感染的一線藥物[14，15]。本實(shí)驗(yàn)中阿莫西林/棒酸的中介率最高達(dá)21.30%，表明在我市其存在向耐藥發(fā)展趨勢(shì)。目前沙門菌耐藥現(xiàn)象日趨嚴(yán)重，大多與抗生素的廣泛應(yīng)用或使用不當(dāng)有關(guān)，尤其多重耐藥菌株的產(chǎn)生，可能是由于耐藥質(zhì)粒傳遞的結(jié)果，故定期對(duì)本地常見常見腸道感染的沙門菌的類型分析和藥物敏感性檢測(cè)，對(duì)指導(dǎo)臨床合理正確使用抗菌藥物，有效控制沙門菌引起的急性腹瀉及減少耐藥株的出現(xiàn)意義極為重大。

參考文獻(xiàn)：

[1] WHO. Collaborating Centre for Reference and Research on Salmonella .Antigenic Formulas Of The Salmonella Serovars [ R]. 2001， 8th Edition Institute Pasteur， Paris， France.

[2] 彭海濱，吳德峰，徐瓊，等.我國(guó)沙門菌污染分布概況[ J ]。中國(guó)國(guó)境衛(wèi)生檢疫雜志， 2006，29（2）：125-128

[3] 俞樹榮. 微生物學(xué)和微生物學(xué)檢驗(yàn)[M]第2 版 北京：人民衛(wèi)生出版社，1988 ：175-179 ，451-456

[4] 陳德云，梁玉萍，李笑瓊。六株與沙門菌屬具有相同抗原的弗勞地枸櫞酸桿菌的實(shí)驗(yàn)研究[ J ]。中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2010，20（12）：3314-3315

[5] 張?jiān)幔娦|，王順東，等. 三株與沙門菌有共同抗原的奇異變形桿菌的檢出與分析[ J ]。中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2003，13（6）：788-789

[6] 周旭，吳曉勵(lì)，婁美秀，等.兩株與沙門B群及F群診斷血清交叉凝莫的弗勞地拘櫞酸桿菌[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，200l，11（2）：207

[7] 林一曼， 邱亞群 .深圳市食品和公共場(chǎng)所從業(yè)人員腸道致病菌帶菌狀況調(diào)查[ J ]。中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué)， 2005， 5 （ 1）： 124 – 125

[8] 陸祥彬，趙瑾。2011年泰州市食源性疾病哨點(diǎn)醫(yī)院監(jiān)測(cè)結(jié)果分析[ J ]。江蘇預(yù)防醫(yī)學(xué)，2013，24（1）21-23

[9] 鐘學(xué)慶，陳建英，何梅芳，等. 常州市人群感染沙門菌和志賀菌血清型分布及耐藥分析[ J ]。中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2008，18（12）：2612-2615

[10] 花蕾.南京市公共場(chǎng)所從業(yè)人員沙門茵感染狀況分析[ J ]。實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，30（1）：71-72

[11] 朱錦德，張曉航，田楨干，等. 上?？诎讹嬍澈凸矆?chǎng)所從業(yè)人員腸道沙門氏菌調(diào)查分析。中國(guó)病原生物學(xué)雜志，2008，3（1）：78-803

[12]吳偉元，王輝，陸堅(jiān)，等. 深圳社區(qū)感染沙門菌耐藥基因調(diào)查與同源性分析[J]中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，2011，34（5）：431-436

[13] 王曉泉， 焦新安， 陳祥， 等. 江蘇部分地區(qū)食源性和人源沙門氏菌的多重耐藥性研究[J]。 微生物學(xué)報(bào)2007，47（2）：221-227

[14] 周世明， 賈杰. 耐藥性傷寒的抗菌治療新進(jìn)展[ J]。中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué)，2003， 3 （ 4） ：514- 515

[15] 孔繁林， 儲(chǔ)從家. 甲型副傷寒沙門菌的耐藥現(xiàn)狀與臨床用藥[ J ]。中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志， 2007， 19（ 1） ： 116- 117