李詠梅　余朋桂　肖冰梅

【摘要】 目的：建立星毛冠蓋藤藥用部位高效液相等度洗脫方法，比較不同藥用部位的差異性。方法：星毛冠蓋藤不同藥用部位70%乙醇提取，使用不同比例甲醇和乙腈系統(tǒng)等度洗脫，C18色譜柱（4.6mm x250mm，5μm）；流速：0.8ml/min；進樣量：10μl；檢測波長：254nm；柱溫：25℃。結(jié)果：甲醇-水（40：60）系統(tǒng)對藥用各部位均具有較好的分離效果；不同藥用部位化學成分差異性較大。僅莖枝含有蘆丁。結(jié)論：蘆丁的分布部位與民間習慣應(yīng)用星毛冠蓋藤地上部分較為相符。為其活性成分的進一步研究和臨床用藥提供了科學依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 星毛冠蓋藤；藥用部位；高效液相

【中圖分類號】R282.5 【文獻標志碼】A 【文章編號】1007—8517（2013）18—0017—03

星毛冠蓋藤（Pileostegia tomentella Hand.Mazz）是土家族常用藥，全年可采。具有祛風除濕，散瘀止痛，接骨的功效，臨床常應(yīng)于腰腿酸痛、風濕麻木，外用治跌打損傷、骨折、外傷出血。浙江、江西、湖南、湖北、四川、貴州、廣東、臺灣等地分布較廣，資源蘊藏量豐富。但其在應(yīng)用時隨意性較強，根、莖、花和葉可分別入藥，亦可全株入藥，直接影響到療效的可靠性與穩(wěn)定性。應(yīng)用HPLC法對星毛冠蓋藤不同藥用部位進行分析，以期了解其不同藥用部位化學成分的差異性，從而為臨床用藥選擇位及其化學成分研究提供可靠的實驗依據(jù)。

1 儀器與材料

Lc-10AT液相色譜（日本島津）；C18色譜柱4.6mm×250mm，51μm（依利特）。甲醇、乙腈為色譜純；水為純凈水，其余試劑為分析純。蘆丁購自上海源葉生物科技有限公司。星毛冠蓋藤采自湖南懷化，經(jīng)筆者鑒定為虎耳草科冠蓋藤屬星毛冠蓋藤Pileostegia tomentella Hand.Mazz。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液的制備取過50目篩的各藥用部位粉末10g，置于100ml的圓底燒瓶中。依次加入70%的乙醇100ml、50ml，在90℃恒溫水浴分別回流1.5h、1h。過濾，合并慮液。精密移取濾液1ml，用70%乙醇定容于10ml容量瓶中。微孔濾膜過濾，濾液為樣品溶液。精密稱取蘆丁，配制成濃度為0.1mg/ml對照品溶液。

2.2 黃酮類化合物鑒別取過50目篩的藥材全株粉末。按“2.1”項下方法提取后過濾。濾液與鹽酸-鎂粉反應(yīng)顏色泡沫處呈紫紅色，與醋酸鉛反應(yīng)生成淺黃色沉淀，與NaOH溶液反應(yīng)呈黃色，加鹽酸后顏色褪去。

2.3 色譜條件 分別以甲醇-水（10：90）、甲醇-水（20：80）、甲醇-水（30：70）、甲醇-水（40：60）、甲醇-水（50：50）、乙腈-水（10：90）、乙腈-水（20：80）為流動相。在流速為O.8mL/min，波長為254nm，進樣量為10μl，柱溫為室溫條件下洗脫90min。乙腈-水系統(tǒng)得到的色譜圖譜出峰數(shù)目少且保留時間短，不適合于星毛冠蓋藤。甲醇-水系統(tǒng)以甲醇-水（40：60）的分離效果較好，出峰數(shù)目較多。在保留時間33min后無峰再出現(xiàn)。

因此選擇甲醇-水（40：60）作為本實驗的流動相，洗脫時間為40min。在此條件下根、莖、葉和枝的高效液相圖譜見圖15；蘆丁與各部分峰的數(shù)目、保留時間、峰面積和峰面積百分比見表1-5所示。

3 分析與討論

在進行高效液相等度洗脫分析時，甲醇-水（40：60）對藥用各部位均具有較好的分離效果。在色譜條件下，根有四個峰，莖有十二個峰，枝有六個峰，葉有六個峰。莖和葉在29.541min與29.542min處各有一個峰保留時間接近，可視為同一類物質(zhì)，但對峰面積及其百分比相比較，該物質(zhì)在莖和葉的含量和所占比重有很大差異。枝和根在此保留時間附近內(nèi)無峰出現(xiàn)，說明不含有此成分。從各部分峰的保留時間間隔分析，根、莖較枝、葉均勻，表明枝與葉所含化合物的物理或化學性質(zhì)差異性較大，可能和根、莖與枝、葉之間新陳代謝的差異性有關(guān)系。各藥用部位在6.500-6.550min、7.217-7.285min兩區(qū)間均有且只有一個峰出現(xiàn)。反映了各藥用部位化學成分的個性與共性關(guān)系，亦為在臨床使用時是否區(qū)分藥用部位研究提供了可靠的實驗基礎(chǔ)。

黃酮類化合物是中藥中常見的一類有效成分，具有多種生物活性。如葛根總酮、葛根素和銀杏葉總黃酮等具有擴張冠狀血管的作用，臨床用于治療冠心病。蘆丁、橙皮苷等具有降低毛細血管脆性和異常通透性作用，可用做毛細血管出血的止血藥和治療高血壓的輔助藥。實驗證實，星毛冠蓋藤中含有黃酮類化合物，莖與枝含有蘆丁，為后續(xù)的開發(fā)利用及活性成分的深入研究提供科學的參考依據(jù)。

參考文獻

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（收稿日期：2013.07.13）