錢(qián)善軍，張 敏，闞 晶，楊宇清

(安徽醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校藥學(xué)系，安徽 合肥 230061)

原發(fā)性高血壓是一種臨床常見(jiàn)的多因素、多基因疾病，現(xiàn)已證明[1]內(nèi)皮素(ET)和兒茶酚胺(CA)與高血壓密切相關(guān)。該研究通過(guò)在自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)疾病發(fā)展過(guò)程中應(yīng)用中藥天麻鉤藤飲配合生活干預(yù)，觀(guān)察其對(duì)SHR大鼠高血壓的升高幅度以及ET-1、CA水平的影響，報(bào)道如下。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)12周齡雄性SHR大鼠40只,體質(zhì)量(220±10)g，隨機(jī)分為模型組、天麻鉤藤飲組、天麻鉤藤飲加生活干預(yù)組、卡托普利組、卡托普利加生活干預(yù)組，每組8只;另取相同周齡雄性正常血壓WKY大鼠8只，為正常對(duì)照組；均購(gòu)自上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.2 藥物 天麻鉤藤飲，石決明先煎0.5 h，再下川牛膝等藥，煎煮0.5 h后下鉤藤，再煎10 min，共煎煮2次，合并后將藥液濃縮至藥液含生藥2.4 g/mL?？ㄍ衅绽瑒?，購(gòu)自浙江南洋藥業(yè)有限公司，批號(hào)100412；ET試劑盒，北京北方生物技術(shù)研究所，批號(hào)20110309；兒茶酚胺ELISA測(cè)定試劑盒，上海麥莎生物工程有限公司，批號(hào)20110212。

1.3 儀器 ALC-NIBP無(wú)創(chuàng)尾動(dòng)脈血壓測(cè)定分析系統(tǒng)(上海奧爾科特生物科技有限公司，儀器編號(hào)05012618)，722s型可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海精密科學(xué)儀器有限公司出品)，SN-682γ閃爍計(jì)數(shù)器(上海核福光電儀器有限公司)，低溫冷凍離心機(jī)(美國(guó)Thermo)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 給藥方法 各干預(yù)組給予相應(yīng)的藥物灌胃，模型組及正常對(duì)照組予等量蒸餾水灌胃，每日1次,連續(xù)給藥8周。測(cè)量并記錄用藥前及用藥4、8周后血壓水平及血清ET-1、兒茶酚胺水平。

2.2 生活干預(yù)方法 包括飲食控制和運(yùn)動(dòng)。1)飲食控制：有生活干預(yù)的2組每日清晨給予正常對(duì)照組鼠糧的90%，每周調(diào)整進(jìn)食量，均給予正常對(duì)照組的90%。2)游泳方法:有生活干預(yù)的2組每日進(jìn)行游泳練習(xí)，以大鼠漂浮水面不動(dòng)并出現(xiàn)頭部下沉為停止信號(hào)。

2.3 應(yīng)用尾袖法測(cè)定大鼠的血壓 實(shí)驗(yàn)前和實(shí)驗(yàn)中，每周測(cè)量血壓1次,每次測(cè)量前和測(cè)量中進(jìn)行大鼠尾動(dòng)脈保溫(37 ℃)。每只動(dòng)物每次測(cè)量血壓時(shí)，均測(cè)量3次，取平均值。

2.4 ET-1、CA測(cè)定法 用藥前、用藥4、8周后大鼠眼眶后靜脈取血3 mL，3 000 r/min離心10 min，所得血清-80 ℃儲(chǔ)存，放免法測(cè)定血漿ET-1含量，酶聯(lián)免疫法測(cè)定CA水平，均按說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格操作。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 各組大鼠實(shí)驗(yàn)前后血壓水平比較 見(jiàn)表1。

3.2 各組大鼠血清ET-1水平比較 見(jiàn)表2。

3.3 各組大鼠血清兒茶酚胺水平比較 見(jiàn)表3。

表1 各組大鼠實(shí)驗(yàn)前后血壓水平比較(±s,n=8) mmHg

表2 各組大鼠實(shí)驗(yàn)前后ET-l水平比較(±s,n=8) pg/mL

表3 各組大鼠實(shí)驗(yàn)前后血清兒茶酚胺變化比較(±s,n=8) pg/mL

4 討論

原發(fā)性高血壓(Essential Hypertension, EH)，是指發(fā)病機(jī)制尚未完全明了，以體循環(huán)血壓高于正常水平為主要表現(xiàn)的一種疾病[2-3]。屬中醫(yī)“眩暈”“頭痛”等范疇，病機(jī)多屬于肝腎陰虛、肝陽(yáng)上亢。天麻鉤藤飲出自于《中醫(yī)內(nèi)科雜病證治新義》，具有平肝潛陽(yáng)、補(bǔ)益肝腎的功效，是治療陰虛陽(yáng)亢所導(dǎo)致的高血壓病的名方[4]。近年來(lái)許多研究[5]表明,該方具有降血壓、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜等作用。隨著生活方式與高血壓關(guān)系的明確，目前已有實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)有氧運(yùn)動(dòng)可減少高血壓患者的交感神經(jīng)活性。

ET-l是血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)的一種糖蛋白,生理狀態(tài)下可從內(nèi)皮表面少量水解脫落，游離于血漿中。當(dāng)內(nèi)皮細(xì)胞損傷時(shí)EF-1大量釋放入血，是內(nèi)皮細(xì)胞受損的標(biāo)志物之一[6]。血壓升高，內(nèi)皮細(xì)胞功能異常，ET-1釋放增加，ET-1可使血管痙攣、血管平滑肌細(xì)胞增殖，同時(shí)還可以激活腎素—血管緊張素—醛固酮系統(tǒng)(RAS)，使外周血管阻力增加，平滑肌細(xì)胞產(chǎn)生更多的ET-1，加速高血壓病進(jìn)展[7-8]。

該研究結(jié)果顯示，隨著SHR大鼠血壓水平升高，ET-1、CA水平亦明顯升高,用藥4周后，各干預(yù)組大鼠血壓、CA水平降低。用藥8周后，上述指標(biāo)進(jìn)一步下降，ET-1也降低；有生活干預(yù)者，作用更好但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。中藥天麻鉤藤飲和卡托普利有類(lèi)似的作用。推測(cè)保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞、減少ET-1的釋放、抑制交感神經(jīng)的活性、減少兒茶酚胺的產(chǎn)生，可能是中藥天麻鉤藤飲降壓的作用機(jī)制之一。

[1]趙茶,丁碧云.中醫(yī)藥治療原發(fā)性高血壓病的研究[J].長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2010,26(6):851-852.

[2]徐邦杰,符德玉,王世紅,等.原發(fā)性高血壓患者尿酸水平與心血管危險(xiǎn)因素靶器官損害及中醫(yī)證型的相關(guān)性研究[J].長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2011,27(1):22-24.

[3]陳孝銀,唐純志,嚴(yán)燦,等.肝陽(yáng)上亢證的血清學(xué)及細(xì)胞學(xué)研究[J].遼寧中醫(yī)雜志,2001,28(1):3-4.

[4]李國(guó)進(jìn),王學(xué)員.天麻鉤藤飲結(jié)合氯沙坦治療腎性高血壓臨床療效觀(guān)察[J].吉林中醫(yī)藥,2011,31(7):641-642.

[5]連偉,孔儉,葛姝穎.羅格列酮對(duì)自發(fā)性高血壓病大鼠心臟保護(hù)作用的形態(tài)學(xué)研究[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2004,24(10):937-939.

[6]李莉,農(nóng)偉虎,劉成鼎,等.山茱萸最佳配伍組分對(duì)高糖致ECV304細(xì)胞培養(yǎng)液中NO和ET含量的影響[J].吉林中醫(yī)藥,2011,31(7):695-697.

[7]龔艷春,郭冀珍.高血壓血管損傷指標(biāo)及其臨床意義[J].臨床心血管病雜志,2000,16(9):424-425.

[8]魏巖,黃永生.夏膝口服液對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠血清兒茶酚胺影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].吉林中醫(yī)藥,2008,28(3):219-220.