吳志瑰，付小梅，葛菲，褚小蘭，范崔生

[摘要] 目的：為正本清源，對金粟蘭屬Chloranthus 5種植物葉的形態(tài)與顯微特征進行生藥學(xué)研究，進行種間區(qū)別。方法：形態(tài)觀察、常規(guī)生藥制片技術(shù)鑒別葉橫切面與表面觀顯微特征。結(jié)果：該5種植物葉形態(tài)特征有細(xì)微區(qū)別， 葉橫切面特征中主脈部位結(jié)構(gòu)有不同，表面觀特征中非腺毛及附屬物等可作為區(qū)別點。結(jié)論：5種植物葉的形態(tài)與顯微特征具有鑒定意義，為金粟蘭屬植物的種質(zhì)鑒別和進一步開發(fā)應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

[關(guān)鍵詞] 生藥學(xué)；金粟蘭屬；葉；形態(tài)鑒別；顯微鑒別

金粟蘭屬Chloranthus植物主要分布于長江以南各省， 我國約有13 種5 變種[1] 。它們大多以全草或根入藥， 被《中國藥典》或地方中藥材標(biāo)準(zhǔn)收載[2]，有祛風(fēng)散寒，消腫止痛，活血化瘀等功效，用以治療跌打損傷，瘀血腫痛，風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，癤瘡腫毒等疾病。

該屬植物因莖頂部多有四片對生葉，外觀形態(tài)相似，用藥情況復(fù)雜，經(jīng)常出現(xiàn)同名異物及同物異名現(xiàn)象，藥用時應(yīng)注意在形態(tài)組織學(xué)方面正確地鑒定其植物來源，確定品種的準(zhǔn)確性。本實驗對該屬5種植物東南金粟蘭C. oldhami、及己C. serratus、銀線草C. japonicus、多穗金粟蘭C. multistachys、絲穗金粟蘭C. fortunei的葉進行了形態(tài)組織學(xué)方面的研究，以期為該類資源的評價和鑒定提供依據(jù)。

1 材料與方法

東南金粟蘭C. oldhami采于江西武功山，及己C. serratus采于江西宜春，銀線草C. japonicus 、多穗金粟蘭C. multistachys、絲穗金粟蘭C. fortunei均采于江西贛南，由本院中藥資源教研室賴學(xué)文副教授鑒定。

采用常規(guī)石蠟切片法、徒手制片、表面制片法等技術(shù)對葉進行制片[3]，Olympus光學(xué)顯微鏡觀察組織構(gòu)造特征并繪圖。所用試劑均為分析純。

2 結(jié)果

2.1 形態(tài)特征

2.1.1 東南金粟蘭C. oldhami 葉4片對生，生于莖頂呈假輪生，紙質(zhì)，寬橢圓形，圓形或?qū)捖研?。頂端漸尖或長漸尖，基部寬楔形至圓形，邊緣具細(xì)齒或銳鋸齒，齒端有一腺體。干后上表面淺棕色或棕紅色，下表面淺棕色，質(zhì)脆，氣微味淡。

2.1.2 及己C. serratus 葉對生，4～6片生于莖上部，紙質(zhì)，橢圓形，倒卵形或卵狀披針形，頂端長尖，基部楔形，邊緣具銳密鋸齒，齒尖有一腺體，兩面無毛。干后上表面黑棕色或墨綠色，下表面灰棕色。

2.1.3 銀線草C. japonicus 葉對生，常4片生于莖頂部呈假輪生，紙質(zhì)，寬橢圓形或倒卵形。頂端急尖，基部寬楔形，邊緣具齒牙狀銳鋸齒，齒尖有一腺體，近基部全緣，兩面無毛。干后上表面棕綠色或棕黑色，下表面黃棕色。

2.1.4 多穗金粟蘭C .multistachys 葉對生，常4片，堅紙質(zhì)，橢圓形至寬橢圓形寬卵形。頂端漸尖，基部寬楔形至圓形，邊緣具粗鋸齒，齒端有一腺體，背面沿葉脈有鱗屑狀毛。干后上表面棕褐色，下表面灰棕色。

2.1.5 絲穗金粟蘭C. fortunei 葉對生，常4片生于莖上部，紙質(zhì)，寬橢圓形，長橢圓形或倒卵形。頂端短尖，基部寬楔形，邊緣具圓鋸齒，齒尖有一腺體，近基部全緣。干后上表面棕綠色，下表面淡棕色。

2.2 顯微特征

金栗蘭屬植物葉橫切面及表面觀見圖1，2。

2.2.1 橫切面 東南金粟蘭C. oldhami表皮細(xì)胞方形或長方形，被角質(zhì)層，下表皮可見氣孔。葉肉的柵欄組織與海綿組織分化不明顯，其中有油細(xì)胞散在。葉脈處可見非腺毛；主脈部分上方凹陷，下方突出。表皮內(nèi)側(cè)有1～3層厚角細(xì)胞，向內(nèi)有數(shù)列薄壁細(xì)胞，外韌型維管束2個，周圍有數(shù)列厚壁細(xì)胞。及己C. serratus主脈部分表皮內(nèi)側(cè)面無厚角細(xì)胞，維管束1個。銀線草C. japonicus主脈部分表皮內(nèi)側(cè)無厚角細(xì)胞，維管束1個，僅在木質(zhì)部上方有少數(shù)厚壁細(xì)胞，無非腺毛。多穗金粟蘭C. multistachys近葉柄處具二束維管束，中部主脈維管束為1個。絲穗金粟蘭C. fortunei主脈部分表皮內(nèi)側(cè)無厚角細(xì)胞，維管束1個，無厚壁細(xì)胞（圖1）。

2.2.2 表面觀 東南金粟蘭C. oldhami上表皮細(xì)胞垂周壁波狀彎曲，無氣孔，具角質(zhì)層紋，無非腺毛。有附屬物，大小不等，由數(shù)十個呈放射狀排列的細(xì)胞組成，直徑 31.7～90.3 μm，下表面表皮細(xì)胞垂周壁波狀彎曲，氣孔平軸式，具角質(zhì)層紋。葉脈處有較多非腺毛，葉肉組織內(nèi)有多數(shù)油細(xì)胞散在。及己C. serratus上表皮細(xì)胞不具角質(zhì)層紋，附屬物直徑 18.3～85.4 μm。葉下表皮細(xì)胞亦不具角質(zhì)層紋，脈部具少數(shù)非腺毛。銀線草C. japonicus葉上表皮細(xì)胞無附屬物，下表皮細(xì)胞垂周壁深波狀彎曲，氣孔不定式，具明顯角質(zhì)層紋，葉脈無非腺毛。多穗金粟蘭C. multistachys上表皮細(xì)胞不具角質(zhì)層紋，附屬物直徑 26.8～85.4 μm，葉下表皮細(xì)胞亦不具角質(zhì)層紋。絲穗金粟蘭C. fortunei葉上表皮無附屬物（圖2）。

3 小結(jié)與討論

形態(tài)觀察發(fā)現(xiàn)金粟蘭屬植物葉片的大小、形狀、葉緣表面有無毛茸，質(zhì)地，著生方式等方面的細(xì)微差異對鑒定非常有意義。

顯微組織研究表明，主脈部位維管束成一束或二束，厚角細(xì)胞與厚壁細(xì)胞有無及其分布特點是橫切面的鑒別點為東南金粟蘭主脈維管束成二束，及己、銀線草、絲穗金粟蘭表皮內(nèi)側(cè)無厚角細(xì)胞，銀線草、絲穗金粟蘭厚壁細(xì)胞分布不明顯。除銀線草明顯無非腺毛外，其他4種植物在葉下表面葉脈處可見稀疏的小非腺毛，由1～2個細(xì)胞組成，形狀不一；除植物及己和多穗金粟蘭表皮細(xì)胞不具角質(zhì)層紋外，其他3種植物葉表面具有角質(zhì)層紋。

本研究發(fā)現(xiàn)該屬3種植物東南金粟蘭、及己、絲穗金粟蘭的葉中有特殊結(jié)構(gòu)（暫名附屬物）的存在，目前文獻(xiàn)中沒見報道[45]。這種附屬物多存在于葉的上表面，表面觀可見附屬物近圓形，由數(shù)十個至上百個徑向延長細(xì)胞呈放射狀排列組成，附屬物的發(fā)現(xiàn)可為金粟蘭屬植物增加一個新的組織形態(tài)特征，為進一步深入研究金粟蘭屬植物的分類以及生藥鑒定提供了有意義的新資料。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 中國植物志編輯委員會. 中國植物志.第20卷.第1分冊[M].北京：科學(xué)出版社，1982：80.

[2] 江蘇植物研究所. 新華本草綱要.第2冊[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1991：64.

[3] 吳德康.中藥鑒定學(xué)實驗指導(dǎo)[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2007：27.

[4] 陳吉炎，李聰， 王雪芹，等. 及己的性狀與顯微鑒別[J].中藥材，2010，33（7）：1080.

[5] 姚振生，陳麗華. 絲穗金粟蘭生藥組織學(xué)的研究[J].時珍國藥研究，1995， 6（4）：25.

Comparative research on histological and microscopical leaves characters of

five species in Chloranthus

WU Zhigui， FU Xiaomei， GE Fei， CHU Xiaolan*， FAN Cuisheng

（School of Pharmacy Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine， Nanchang 330006， China）

[Abstract] Objective： To clarify the origin and provide pharmacognostical evidences for the leaves of 5 species in Chloranthus. Method： Histological observation and microscopic identification through different slicemaking techniques were applied to the research. Result： There were subtle differences between the histological characteristics. In microscopical identification ， the different structures of vascular bundles in veins were observed，appendages and nonglandular hairs were distinct. Conclusion： The method can be used to distinguish the features of 5 species in Chloranthus. This article offers information for the further research and exploitation of Chloranthus.

[Key words] pharmacognosy； Chloranthus； leaf； histological observation； microscopic identification

doi：10.4268/cjcmm20130206

[責(zé)任編輯 呂冬梅]