劉占峰 李良君 任 征 杜曉寧

（上?；ぱ芯吭?上海穩(wěn)定性同位素工程技術(shù)研究中心 上海 200062）

葡萄糖(C6H12O6)是人們所熟悉的一種單糖，又稱右旋糖或血糖，屬于多羥基醛，是自然界中存在量最多的化合物之一。天然的葡萄糖，無論是游離的或是結(jié)合的，均屬 D構(gòu)型，在水溶液中主要以吡喃式構(gòu)形含氧環(huán)存在，為 α和 β構(gòu)型的衡態(tài)混合物[1]。

由于葡萄糖是生物體內(nèi)新陳代謝不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，加上羥基醛所具有的化學(xué)性質(zhì)，使其在食品、醫(yī)療、生物工程、印染等行業(yè)獲得了廣泛的應(yīng)用。

葡萄糖由C、H和O元素組成，每一種元素被其相應(yīng)的同位素替換，都可成為同位素標(biāo)記的葡萄糖。已知的有11C、13C、14C、D、3H等多種同位素被用于同位素標(biāo)記葡萄糖的合成[2?7]，其產(chǎn)品作為示蹤劑，被廣泛應(yīng)用于代謝、醫(yī)療診斷、有機(jī)合成等方面。

1 同位素標(biāo)記葡萄糖的合成

葡萄糖主要來源于兩方面：一為自然界的合成，由綠色植物通過光合作用將水和二氧化碳轉(zhuǎn)化為葡萄糖[8]；另一方面為人工合成，主要采用大米、玉米和馬鈴薯等所含的淀粉經(jīng)淀粉酶轉(zhuǎn)化制得[9]。同位素標(biāo)記葡萄糖的合成借鑒于葡萄糖的合成方法，最先利用光合作用法，將放射性11C標(biāo)記的二氧化碳轉(zhuǎn)化為11C標(biāo)記的葡萄糖[10]，隨后，微生物法[11]、有機(jī)合成法[12]也得到利用。隨著質(zhì)譜、核磁的應(yīng)用，穩(wěn)定同位素13C、D及18O也逐漸替代放射性同位素11C、14C，被引入葡萄糖中。

1.1 生物法合成同位素標(biāo)記的葡萄糖

生物法包括光合作用法和微生物法，可將同位素標(biāo)記的水、二氧化碳或碳酸鹽引入到葡萄糖中，獲得全標(biāo)記或多標(biāo)記的葡萄糖。

1.1.1 光合作用法合成同位素標(biāo)記的葡萄糖

同位素標(biāo)記葡萄糖合成方面的研究源于早期放射性標(biāo)記葡萄糖的合成。Lifton和 Welch[10]將采集的新鮮甜菜葉處于饑餓狀態(tài)，待葉子中的葡萄糖消耗殆盡，然后通入11C標(biāo)記的二氧化碳，在光合作用下，將11C標(biāo)記的二氧化碳轉(zhuǎn)化為11C標(biāo)記的葡萄糖。Ishiwata[13]將該合成方法加以改進(jìn)，將定時(shí)器、限位開關(guān)以及光敏感器等自動(dòng)化裝置引入合成過程。Goulding等[6]將出芽二周的蠶豆葉子進(jìn)行光和二氧化碳饑餓18 h，然后將葉子置于密閉的圓柱形容器中，以40 mL/min的流速，連續(xù)30 min通入載有11C標(biāo)記二氧化碳的氦氣流，采用125 W燈間距10 cm進(jìn)行照明。然后采用乙醇萃取，IR120(H+)樹脂分離。Denutte[3]等將培養(yǎng)好的 Scenedesmus obliquus菌株，放入吸收了11C標(biāo)記二氧化碳的磷酸氫二鉀溶液中，進(jìn)行光合作用，經(jīng)分離純化，合成11C標(biāo)記葡萄糖。

1.1.2 微生物法合成同位素標(biāo)記的葡萄糖

Robert等[11]利用1或2-13C標(biāo)記的醋酸鹽為原料，利用酵母發(fā)酵合成了葡萄糖-D-3-13C、葡萄糖-D-4-13C以及葡萄糖-D-3,4-13C2。Ehrin等[14]利用綠藻中的生柵藻作為菌種，經(jīng)生長(zhǎng)和耗糖后，將菌體分別懸浮在含有11C和14C標(biāo)記的碳酸氫鹽溶液中，在30°C下反應(yīng)45 min，間隔25 cm，用250 W燈照明，并保持光強(qiáng)度15000?20000 lux。Luthra等[15]在Ehrin實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上加以改進(jìn)，以豐度90%的13C標(biāo)記的碳酸鹽作為唯一碳源，利用微藻，合成了豐度為60%的葡萄糖-U-13C。李健等[16]利用微藻進(jìn)行光合作用，以16.8 g/L13C標(biāo)記的碳酸氫鈉作為種子標(biāo)記原料，以13C標(biāo)記的二氧化碳為發(fā)酵碳源，控制溫度 26°C ?28°C，光強(qiáng)度 600?1000 uE，通氣量0.4?0.6 L/min，發(fā)酵8 d，合成了葡萄糖-U-13C。劉占峰等[17]以畢赤酵母為出發(fā)菌株，甲醇-13C為碳源進(jìn)行發(fā)酵，得到的菌體經(jīng)處理獲得海藻糖-13C12，再經(jīng)水解和分離純化得到葡萄糖-D-13C6，產(chǎn)品的純度和豐度分別達(dá)到98%以上，豐度幾乎沒有稀釋。

1.2 有機(jī)合成法合成同位素標(biāo)記的葡萄糖

由于葡萄糖結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，有機(jī)合成法無法將同一元素都引入其中，通常用于制備單標(biāo)記或多標(biāo)記的葡萄糖。

Elander等[2]以阿拉伯糖和11C標(biāo)記的氰化氨為原料，首先合成氰醛-1-11C，再經(jīng)鎳催化劑的催化，合成葡萄糖-D-1-11C。Williams和Whaley[12]以5-氧代-1,2-O-亞異丙基-D-木-五呋喃糖和 Na13CN 為原料，合成葡萄糖-D-6-13C，產(chǎn)率48%。London等[18]以阿拉伯糖和13C標(biāo)記的氫氰酸為原料，首先合成了葡萄糖腈-D-1-13C，再經(jīng)還原、水解，合成葡萄糖-D-1-13C。

2 同位素標(biāo)記葡萄糖的應(yīng)用

由于葡萄糖是生物體內(nèi)新陳代謝不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，因此，作為示蹤劑，為科學(xué)研究提供了一個(gè)方便、有效的示蹤工具。主要用于代謝、臨床診斷以及作為其他標(biāo)記產(chǎn)品的原料等。

2.1 代謝研究

石寧寧等[19]以Bacillus subtilis NX-2為發(fā)酵菌株，在合成 Y-聚谷氨酸(y-PGA)過程中，利用葡萄糖-U-13C作為示蹤劑，研究了谷氨酸和葡萄糖兩種碳源在合成過程中所起的作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)培養(yǎng)基中葡萄糖-U-13C濃度為4%時(shí)，y-PGA的碳骨架中由葡萄糖-U-13C進(jìn)入的比例約為 9%，證明葡萄糖主要用于能量代謝和菌體合成，而谷氨酸為y-PGA單體的主要來源。為了研究芐基腺嘌呤(BA)處理后的花生葉片對(duì)葡萄糖吸收的影響，李玲等[20]發(fā)現(xiàn)，通過10?5mol/L BA處理過的花生葉片可促進(jìn)對(duì)葡萄糖-14C的被動(dòng)吸收量，減弱氯汞基苯對(duì)葡萄糖吸收的抑制作用。艾桃山等[21]將熒光極毛桿菌在含有葡萄糖-3H的培養(yǎng)基中培養(yǎng)后，獲得了葡萄糖-3H標(biāo)記的細(xì)菌，經(jīng)滅活，莨菪佐劑浸泡后，可不同程度進(jìn)入魚體，發(fā)現(xiàn)莨菪佐劑能明顯促進(jìn)魚體對(duì)標(biāo)記細(xì)菌抗原的吸收，標(biāo)記抗原在魚體各組織器官的分布由大到小依次為肝、脾、前腸、腎、血液、肌肉。Gay等[22]通過給健康女性進(jìn)食13C豐度為1.083以及含糖55%的食物，時(shí)間為3 d，然后改為進(jìn)食13C豐度為1.093的食物，時(shí)間為5 d，實(shí)驗(yàn)期間每天對(duì)尿氮、呼出的13CO2以及血漿中的13C標(biāo)記葡萄糖進(jìn)行分析，研究肝糖原的代謝動(dòng)力學(xué)和糖質(zhì)新生。楊月欣等[23]以荷蘭產(chǎn)品Custard、Hylon Ⅶ和Novelose為試驗(yàn)食物，測(cè)定7個(gè)受試者在6個(gè)小時(shí)內(nèi)血清中總糖和血清中同位素標(biāo)記的13C標(biāo)記葡萄糖的水平，比較普通淀粉、抗性淀粉2型和抗性淀粉3型在小腸中的消化吸收，獲得試驗(yàn)食物在小腸中的消化吸收率分別為 82%、44%和 43%。Hawkins等[24]利用Glucose-6-14C作為示蹤劑，研究了老鼠大腦葡萄糖的代謝速率。Peronnet等[25]選取5個(gè)年齡在25.5?36.5歲，體重在74.8?99.8 kg的人，在攝入葡萄糖-13C(1.5 g/kg)前后進(jìn)行20 d 415 km的滑雪運(yùn)動(dòng)，通過呼吸的熱量、排泄物、呼出的二氧化碳以及血糖的分析，進(jìn)行養(yǎng)分的選擇。Caron等[26]通過鍛煉前攝入13C標(biāo)記的葡萄糖，研究了鍛煉前和鍛煉期間葡萄糖的氧化效果，發(fā)現(xiàn)攝入的外源葡萄糖在鍛煉 30和 60 min期間氧化并未增加[0.36(0.03)對(duì)0.30(0.02) g/min]，90 min后氧化速度加快。鍛煉前攝入的50 g葡萄糖有26.7(2.1) g被氧化，鍛煉期間攝入的110 g葡萄糖有39.0(2.4) g被氧化。Riddell等[27]利用健康且未參加鍛煉的青少年志愿者攝取13C標(biāo)記的葡萄糖，研究鍛煉期間體內(nèi)食物的利用。通過四次鍛煉(每次 30 min，休息 5 min)，完成控制實(shí)驗(yàn)(鍛煉期間適量飲)和葡萄糖試驗(yàn)(鍛煉期間間歇食用3 g13C標(biāo)記的葡萄糖/kg體重)。在鍛煉5?10 min和25?30 min 時(shí)通過熱量以及呼氣測(cè)定，120 min CT和GT的氧化結(jié)果分別為：碳 水 化 合 物 169.1(12.9)g 和 203.1(15.9)g(p<0.01)； 脂 肪 酸 31.0(4.2)g 和 17.1(2.5)g(p<0.01)；體內(nèi)的葡萄糖 169.1(12.9)g 和145.3(11.9)g(p<0.01)，而攝取的葡萄糖在 GT 中為57.8(4.3)g。Jin 等[28]利用[3,4-13C2]葡萄糖和[6,6-2H2]葡萄糖作為示蹤劑，分析大鼠體內(nèi)葡萄糖的轉(zhuǎn)化率。在大鼠分別攝食[3,4-13C2]葡萄糖、[6,6-2H2]葡萄糖以及[3,4-13C2]葡萄糖和[6,6-2H2]葡萄糖混合物的實(shí)驗(yàn)中，經(jīng)13C NMR、1H和2H NMR分析，葡萄糖轉(zhuǎn)化率均為 42±4 μmol/kg/min，但以[3,4-13C2]葡萄糖和[6,6-2H2]葡萄糖混合物作為示蹤劑，更有利于對(duì)多條代謝途徑進(jìn)行分析。Shew等[29]對(duì)12例極低出生體重兒(VLBW)的早產(chǎn)兒，分別給與靜脈滴注13C6葡萄糖4 h，靜脈給藥前后分別采取血樣，利用氣體色譜分析質(zhì)量光譜對(duì)13C6標(biāo)記的半胱氨酸進(jìn)行分析，證明VLBW的早產(chǎn)兒可合成半胱氨酸。

2.2 臨床診斷研究

臨床診斷是13C標(biāo)記葡萄糖的主要應(yīng)用之一，如糖尿病、老年癡呆癥、柏金森氏癥、阿茲海默氏癥以及腦癌的診斷等。呼氣診斷是糖尿病臨床診斷的一種新方法[30?32]，此法無創(chuàng)傷、安全、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確。只需測(cè)試者將25 mg的葡萄糖-13C與15 g普通葡萄糖混合，用水溶解后喝下，被吸收后，將含有13CO2的氣體呼出，用同位素分析儀檢測(cè)。葡萄糖進(jìn)入人體后經(jīng)糖酵解，然后進(jìn)入三羧酸循環(huán)。二氧化碳經(jīng)肺部排出體外。2型糖尿病和其他胰島素抗性，葡萄糖的吸收將被削弱，產(chǎn)生的13CO2將減弱，呼吸樣品的基線與常規(guī)基線進(jìn)行比較，就能診斷糖尿病。與高胰島素葡萄糖鉗夾技術(shù)相比，葡萄糖-13C呼吸實(shí)驗(yàn)的技術(shù)指標(biāo)與 QUICKI類似(r=0.69，p<0.0001)，優(yōu)于HOMA的指標(biāo)(r=0.85，p=0.027)，檢測(cè)方法快速、簡(jiǎn)單，無需抽血，因此對(duì)機(jī)體無損傷。與家庭使用的檢測(cè)試劑盒相比，不僅準(zhǔn)確度更高，而且能夠確定糖尿病類型。張敏等[33,34]給糖尿病小鼠灌胃葡萄糖-13C或葡萄糖-11C(5 mg/kg)，利用紅外線同位素能譜儀測(cè)定經(jīng)多時(shí)間點(diǎn)采集的小鼠后呼出的氣樣，以90 min13CO2豐度變化值(C90 min)作為 IR 參數(shù)，得出葡萄糖-13C或葡萄糖-11C呼氣試驗(yàn)?zāi)軌蜢`敏反映糖尿病小鼠的IR變化，其檢測(cè)結(jié)果與目前臨床IR指數(shù)有良好的相關(guān)性。張昊文等[35]通過細(xì)胞培養(yǎng)液中加入葡萄糖-3H，準(zhǔn)確測(cè)量腫瘤細(xì)胞中葡萄糖代謝率，進(jìn)而為藥物干預(yù)腫瘤細(xì)胞能量的獲取，和抑制腫瘤細(xì)胞對(duì)輻射損傷的修復(fù)提供了可靠的實(shí)驗(yàn)方法。Lefebvre等[36]利用13C天然標(biāo)記的葡萄糖，通過10個(gè)對(duì)葡萄糖不耐受的病人呼氣試驗(yàn)，觀察到降糖藥丁基縮二胍與縮二胍相比，能更有效的抑制或延遲小腸對(duì)葡萄糖的吸收。Vonk等[37]為了準(zhǔn)確診斷腸乳糖酶缺乏，建立了13C/2H標(biāo)記葡萄糖測(cè)試的新方法。將乳糖耐受者和非耐受者同樣攝食25 g天然豐度的乳糖和0.5 g2H標(biāo)記葡萄糖，在45?75 min，分析血漿中13C/2H標(biāo)記葡萄糖比率，二者分別為0.93±0.17和0.26±0.09。檢測(cè)結(jié)果與乳糖氫呼氣檢測(cè)法、乳糖13CO2呼氣檢測(cè)法以及13C標(biāo)記的乳糖消化檢測(cè)法相比較，此方法精確度更高。

2.3 分析檢測(cè)應(yīng)用

王建等[38]用含20%葡萄糖-U-13C和80%天然葡萄糖的合成培養(yǎng)基喂養(yǎng)維生素 B12生產(chǎn)菌Pseudomonas denitrifican，然后將20 mg帶13C標(biāo)記菌體用1 mL 6 mol/L鹽酸在95°C下水解24 h，經(jīng)分離、濃縮、真空干燥，得到帶13C標(biāo)記的菌體蛋白氨基酸。經(jīng)MBDSTFA衍生化后得到的TBDMS衍生物，用氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)進(jìn)行分析，得到15種菌體蛋白氨基酸的13C標(biāo)記豐度信息，為13CMFA在國(guó)內(nèi)進(jìn)一步發(fā)展提供了參考意義。何紅波等[39]利用微生物將13C標(biāo)記葡萄糖轉(zhuǎn)化為氨基酸碳骨架，借助于質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)同位素的富集強(qiáng)度的變化，研究氨基酸分子中碳素轉(zhuǎn)化，建立了穩(wěn)定同位素培養(yǎng)-氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)機(jī)測(cè)定土壤氨基酸手性異構(gòu)體13C富集比例的方法，確定氨基酸手性異構(gòu)體的轉(zhuǎn)化與更新程度在表征土壤有機(jī)質(zhì)的循環(huán)轉(zhuǎn)化機(jī)制。鐘燕等[40]應(yīng)用雙標(biāo)穩(wěn)定同位素乳糖-13C和葡萄糖-2H負(fù)荷試驗(yàn)對(duì)乳糖酶缺乏者小腸粘膜乳糖酶活性進(jìn)行定量分析，他們選用43名乳糖酶缺乏者作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，根據(jù)乳糖不耐受癥狀記錄分為乳糖吸收不良組(LM)和乳糖不耐受組(LI)，以25 g乳糖-13C和0.5 g葡萄糖-2H作為受試底物，分析受試者攝入底物之后各時(shí)點(diǎn)血漿中總葡萄糖、葡萄糖-13C和葡萄糖-2H濃度，并計(jì)算各時(shí)點(diǎn)13C-葡萄糖-13C和葡萄糖-2H吸收百分率的比值，以45、60、75 min時(shí)點(diǎn)所得比值的均值作為乳糖消化指數(shù)(LDI)來反應(yīng)小腸乳糖酶活性。Tissot等[41]利用13C標(biāo)記的葡萄糖作為示蹤劑，借助于氣相色譜-同位素比率質(zhì)譜儀，研究了葡萄糖在人體中的代謝，檢測(cè)精度可達(dá)到0.001 mol%。相對(duì)比，葡萄糖-D-[1-13C]的檢測(cè)結(jié)果要比葡萄糖-D-[6,6-2H2]的值低一些，而采用葡萄糖-D-U-13C，檢測(cè)結(jié)果與放射性標(biāo)記葡萄糖的結(jié)果類似。

2.4 原材料利用

葡萄糖-13C作為原料可用于微生物發(fā)酵或有機(jī)合成過程中。張亮等[42]利用葡萄糖-D-13C6作為碳源進(jìn)行發(fā)酵，合成13C標(biāo)記的的L-亮氨酸。祁超等[43]利用葡萄糖-4-13C為標(biāo)記物，己糖激酶、葡萄糖磷酸變位酶等作為酶源，酶法合成了13C標(biāo)記的尿苷二磷酸葡萄糖。Brand等[44]根據(jù)大腸桿菌DF214利用葡萄糖轉(zhuǎn)化為葡萄糖-6-磷酸，然后轉(zhuǎn)化為海藻糖-6-磷酸，經(jīng)脫磷酸作用合成海藻糖的原理，以14C標(biāo)記的葡萄糖為原料，合成了14C標(biāo)記的海藻糖，轉(zhuǎn)化率在50%以上。徐仲杰等[45]采用濃硫酸為催化劑，以 D-葡萄糖-13C6和丙酮為原料合成了13C6-1,2,5,6-O-雙異丙叉-α-D-呋喃葡萄糖，收率為75.6%，產(chǎn)品豐度為99.2%，純度98.7%。

3 展望

自1971年Lifton和Welch開創(chuàng)性的合成了11C標(biāo)記的葡萄糖以來，同位素標(biāo)記葡萄糖方面的研究越來越多，尤其是合成方面。同位素標(biāo)記的種類由11C發(fā)展到11C 、13C、14C、D、3H等。由于穩(wěn)定性同位素，沒有放射性，安全，穩(wěn)定，質(zhì)譜、核磁共振等分析儀器的研制與應(yīng)用，標(biāo)記的同位素由放射性的11C、14C、3H，逐漸向穩(wěn)定性同位素D、13C、18O等方面發(fā)展；標(biāo)記的位置也根據(jù)需要由單標(biāo)記變成多標(biāo)記(如3、4、6)以及全標(biāo)記等；同位素豐度也從60%左右發(fā)展到98%以上。據(jù)美國(guó)劍橋同位素公司報(bào)價(jià)，最便宜的 1 g豐度為 99%的葡萄糖-D-U-13C6價(jià)格為199美元，1 g豐度為98%的葡萄糖-D-1-D價(jià)格為160美元，而其他標(biāo)記的價(jià)格更高，1 g豐度為98%的葡萄糖-D-5-13C價(jià)格高達(dá)1950美元。高昂的價(jià)格阻礙了它的應(yīng)用。因此，提高同位素的轉(zhuǎn)化率勢(shì)在必行。

1 榮國(guó)斌, 蘇克曼. 大學(xué)有機(jī)化學(xué)基礎(chǔ)[M]. 上海: 華東理工大學(xué)出版社; 北京: 化學(xué)工業(yè)出版社, 2000:492?502 RONG Guobin, SU Keman. Fundamentals of organic chemistry[M]. Shanghai: East China University of Science and Technology Press; Beijing: Chemical Industry Press, 2000: 492?502

2 Elanders S, Halldin C, Langstrom B, et al. Remotecontrolled production of [1-11C]-D-glucose and evaluation of the effect of labeling position on loss of [11C] CO2[J].Appl Radiat Isot, 1992, 43(6): 721?729

3 Denutte H, Slegers G, Goethals P, et al. Remote-controlled,photosynthetic preparation of HPLC-purified [11C]glucose[J]. Int J Appl Radiat Isot, 1985, 36(1): 82?84

4 Sturani E. Synthesis of glucose-3 and 4-14C of high specific activity and radiochemical purity[J]. Journal of Labelled Compounds, 1969, 5(1): 47?53

5 Richard Z L, Breay W P, Ellen L T. Comparison of the[13C] glucose breath test to the Hyperinsulinemic-Euglycemic Clamp when determining insulin resistance[J].Emerging Treatments and Technologies, 2004, 27(2):441?447

6 Goulding R W, Palmer A J. Aspects of the preparation of carbon-11 labelled glucose[J]. The International Journal of Applied Radiation and Isotopes, 1973, 24(1): 7?12

7 梁澤容, 楊剛毅, 李伶, 等. 6,6-D2葡萄糖和3-3H標(biāo)記葡萄糖作為示蹤劑應(yīng)用于葡萄糖鉗夾術(shù)的比較[J]. 重慶醫(yī)學(xué), 2005, 34(1): 2?6 LIANG Zerong, YANG Gangyi, LI Ling, et al.Comparison of 6,6-D2glucose and 3-3H labeled glucose as a trace in insulin clamp[J]. Chongqing Medicine, 2005,34(1): 2?6

8 黃衛(wèi)東. 氫能或電能驅(qū)動(dòng)的人工光合作用固定 CO2合成糖[J]. 中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)學(xué)報(bào), 2011, (5): 459?468 HUANG Weidong. Synthesis of sugar and fixation of CO2through artificial photosynthesis driven by hydrogen or electricity[J]. Journal of University of Science and Technology of China, 2011, (5): 459?468

9 周麗君. 大米淀粉轉(zhuǎn)化生產(chǎn)葡萄糖的研究[D]. 長(zhǎng)沙:中南林業(yè)科技大學(xué), 2011 ZHOU Lijun. The researches on production of glucose from rice starch[J]. Changsha: Central South University of Forestory and Technology, 2011

10 Lifton J F, Welch M J. Preparation of glucose labeled with 20 minute half- lived carbon-11[J]. Radiat Res, 1971, 45:35?40

11 Baxter R L, Baxter H C, Mcgregor C J. Microbiological preparation of D-[3,4-13C2] glucose[J]. Journal of Labelled Compounds and Radiophamaceuticals, 1992,31(12): 981?985

12 Williams D L, Whaley T W. Syntheses with stable isotopes: D-glucose-6-13C and 1.6-anhydro-β-L-idopyranose-6-13C[J]. Journal of Labelled Compounds and Radiophamaceuticals, 1982, 19(5): 669?679

13 Ishiwata K, Monma M, Iwata R. Automated photosynthesis of11C-glucose[J]. J Lab Cpds Radiopharm,1982, 19: 11?12

14 Ehrin E, Westman E, Nilsson S O, et al. A convenient method for production of11C labelled glucose[J]. J Lab Cpds Radiopharm, 1980, 17: 453?461

15 Luthra S K, Pike V W, BradY F, et al. The utility of13C/11C-CO-labelling and subsequent13C-NMR in the characterization of11C-labelled products[J]. J Lab Cpds Radiopharm, 1987, 25: 1070?1072

16 李健, 毛延發(fā), 劉小玲. 中國(guó), 200510006694.0[P],2005-01-27 LI Jian, MAO Yanfa, LIU Xiaoling. CN,200510006694.0[P], 2005-01-27

17 Liu Z F, Ren Z, Xu D G, et al. Biosynthesis of glucose-D-13C6from Hansenula polymorpha and methanol-13C[J]. J Lab Cpds Radiopharm, 2012, 55:44?47

18 London R E, Matwiyoff N A, Unkefer C J, et al.Synthesizing labeled compounds [J]. Los Alamos Science Summer, 1983, 66?67

19 石寧寧, 徐虹, 姚俊, 等. 利用13C標(biāo)記的葡萄糖分析γ-聚谷氨酸的代謝途徑[J]. 過程工程學(xué)報(bào), 2007, 7(1):145?148 SHI Ningning, XU Hong, YAO Jun, et al. Investigation of metabolic routes to γ-poly (glutamic Acid) by13C labeled glucose as medium carbon source[J]. The Chinese Journal of Process Engineering, 2007, 7(1): 145?148

20 李玲, 潘瑞熾. BA對(duì)14C-葡萄糖在花生葉片的吸收狀態(tài)和植物體內(nèi)分布的影響[J]. 中國(guó)油料, 1993, (2):22?24 LI Ling, PAN Ruizhi. Effect of benzyladenine on uptake and distribution14C-glucose in Arachis hypogaeal[J].Chinese Journal of Oil, 1993, (2): 22?24

21 艾桃山, 余剛, 胡勁文, 等. 草魚對(duì)3H-葡萄糖標(biāo)記熒光極毛桿菌滅活菌苗的吸收效果[J]. 淡水漁業(yè), 1993,23(3): 3?6 AI Taoshan, YU Gang, HU Jinwen, et al. The absorption effect of ctenopharyngodon idellus for3H-glucose labeled Inactivated Pseudomonasfluores-cence[J]. Freshwater Fisheries, 1993, 23(3): 3?6

22 Gay L J, Schneiter P, Schutz Y, et al. A non- invasive assessment of hepatic glycogen kinetics and postabsorptive gluconeogenesis in man[J]. Diabetologia, 1994,37(5): 517?523

23 楊月欣, Vonk R, Stellaard F. 三種類型玉米淀粉在小腸中消化吸收的研究[J]. 營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào), 1999, 21(3): 284?287 YANG Yuexin, Vonk R, Stellaard F. Digestion and absorption of three types of corn starch in small intestine[J]. Acta Nutrimenta Sinica, 1999, 21(3):284?287

24 Hawkins R A, Mans A M. Determination of Cerebral Glucose Use in Rats Using [14C]Glucose, Carbohydrates and Energy Metabolism[M]. Clifton: New Jersey:Humana Press, 1989, 11: 195?232

25 Peronnet F, Abdelaoui M, Lavoie C, et al. Effect of a 20-day ski trek on fuel selection during prolonged exercise at low workload with ingestion of glucose-13C[J].European Journal of Applied Physiology, 2009, (1):41?49

26 Caron A, Lavoie C, Francois C, et al. Oxidation of[13C]glucose ingested before and/or during prolonged exercise[J]. European Journal of Applied Physiology,2003, (2): 217?223

27 Riddell M C, Baror O, Schwarcz H P, et al. Substrate utilization in boys during exercise with [13C]-glucose ingestion[J]. European Journal of Applied Physiology,2000, (4): 441?448

28 Jin E S, Jones J G, Burgess S C, et al. Comparison of [3,4-13C2]glucose to [6, 6-2H2]glucose as a tracer for glucose turnover by nuclear magnetic resonance[J]. Magnetic Resonance in Medicine, 2005, (6): 1479?1483

29 Shew S B, Keshen T H, Jahoo R F, et al. Assessment of cysteine synthesis in very low birth weight neonates using a [13C6] glucose tracer[J]. J Pediatr Sugr, 2005, 40(1):52?56

30 Lewanczuk R Z, Paty B W, Toth E L. Comparison of the[13C] glucose breath test to the hyperinsulinemic-euglycemic clamp when determining insulin resistance[J]. Diabetes Care, 2004, 27(2): 441?447

31 Tadashi K, Isaburo H, Junko O, et al. Diagnostic agent for diabetes: JP, 97306493.4[P], 1997-08-26

32 Yatscoff R W, Foster R T, Aspeslet L J, et al.13C glucose breath test for the diagnosis of diabetes: WO,1999056790[P], 1999-02-12

33 張敏, 管樑, 朱承謨, 等. 國(guó)產(chǎn)13C-葡萄糖呼氣試驗(yàn)檢測(cè)糖尿病小鼠胰島素抵抗的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版), 2012, 32(4): 463?466 ZHANG Min, GUAN Liang, ZHU Chengmo, et al.Assessment of insulin resistance in diabetic mice by13C-glucose breath test[J]. Journal of Shanghai Jiaotong University (Medical Science), 2012, 32(4): 463?466

34 張敏, 李彪, 管樑, 等. 國(guó)產(chǎn)11C-葡萄糖呼氣試驗(yàn)檢測(cè)糖尿病小鼠胰島素抵抗的實(shí)驗(yàn)研究[C]. 中華醫(yī)學(xué)會(huì)第九次全國(guó)核醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編, 2011-8-24 ZHANG Min, LI Biao, GUAN Liang, et al. Assessment of insulin resistance in diabetic mice by11C-glucose breath test[C]. Chinese Medical Association Ninth National Nuclear Medicine Conference Abstracts of Research Papers, 2011-8-24

35 張昊文, 劉建軍, 馮爽, 等. 腫瘤細(xì)胞3H-葡萄糖代謝測(cè)量方法的建立[J]. 蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版), 2011,31(1): 48?50,54 ZHANG Haowen, LIU Jianjun, FENG Shuang, et al.Development of the method of determining the3H-glucose metabolism by tumor cells[J]. Journal of Soochow University Medical Science Edition, 2011, 31(1):48?50,54

36 Lefebvre P, Luyckx A, Mosora F, et al. Effect of butylbiguanide therapy in obese mildly diabetic subjects[J]. Diabetologia, 1978, (1): 39?45

37 Vonk R J, Stellard F, Priebe M G, et al. The13C/2H-glucose test for determination of small intestinal lactase activity[J]. European Journal of Clinical Investigation, 2001, 1(3): 226?233

38 王建, 王澤建, 黃明志, 等.13CMFA過程中GC-MS分析菌體蛋白氨基酸的13C標(biāo)記豐度[J]. 中國(guó)生物工程雜志, 2009, 29(7): 87?93 WANG Jian, WANG Zejian, HUANG Mingzhi, et al.Analysis of Mass isotopomer distributions of proteingenic amino acids used GC-MS during13CMFA[J]. China Biotechnology, 2009, 29(7): 87?93

39 何紅波, 張威, 丁雪麗, 等. 利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)機(jī)測(cè)定土壤氨基酸手性異構(gòu)體13C富集比例[J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào), 2008, 19(6): 1309?1316 HE Hongbo, ZHANG Wei, DING Xueli, et al.Determination of13C enrichment in soil amino acid enantiomers by gas chromatogram /mass spectrometry[J].Chinese Journal of Applied Ecol, 2008, 19(6): 1309?1316

40 鐘燕, 黃承鈺, 陰文婭. 用雙標(biāo)穩(wěn)定同位素技術(shù)分析乳糖酶缺乏者小腸粘膜乳糖酶活性[J]. 衛(wèi)生研究, 2005,34(3): 312?316 ZHONG Yan, HUANG Chengyu, YIN Wenya. Analysis of lactase activities of small intestine mucous membrane by double labeled stable isotope technique in subjects with lactase deficiency[J]. Journal of Hygiene Research,2005, 34(3): 312?316

41 Tissot S, Normand S, Guilluy R, et al. Use of a new gas chromatograph isotope ratio mass spectrometer to trace exogenous13C labelled glucose at a very low level of enrichment in man[J]. Diabetologia, 1990, (8): 449?456

42 張亮, 杜曉寧, 李良君. L-亮氨酸-U-13C6的研制[J]. 同位素, 2011, 24(增刊): 106?111 ZHANG Liang, DU Xiaoning, LI Liangjun. Preparation of L-leucine-U-13C6[J]. Journal of Isotopes, 2011,24(Suppl): 106?111

43 祁超, 劉立巖. 酶法合成13C標(biāo)記尿苷二磷酸葡萄糖[J].中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)學(xué)報(bào), 2004, 34(5): 624?629 QI Chao, LIU Liyan. Enzymatic synthesis of large amounts of13C-labeled uridine diphosphoglucose[J].Journal of University of Science and Technology of China,2004, 34(5): 624?629

44 Brand B B, Boos W W. Convenient preparative synthesis of [14C]trehalose from [14C]glucose by intact Escherichia coli cells[J]. Applied and environmental microbiology,1989, 55(9): 2414?2415

45 徐仲杰, 盧偉京, 盧浩.13C6-1,2,5,6-O-雙異丙叉-α-D-呋喃葡萄糖的合成[J]. 同位素, 2011, 24(4): 229?233 XU Zhongjie, LU Weijing, LU Hao. Synthesis of13C6-1,2,5,6-Di-O-isopropylidene-α-D-glucofuranose[J].Journal of Isotopes, 2011, 24(4): 229?233