姜麗萍　朱曉磊

[摘要] 目的 探討分析手足口病病原學(xué)特點以及臨床特征，為診斷和預(yù)防提供有力的實驗室及臨床依據(jù)。方法 采用熒光定量PCR核酸檢測試劑盒對該院2011年2月—2012年3月收治的186例手足口病患者的糞便、咽拭子標(biāo)本進(jìn)行總腸道病毒、EV71、CoxA16檢測，并對其所引起的臨床癥狀和體征特點進(jìn)行分析。結(jié)果 186份標(biāo)本檢測，146例腸道病毒通用核酸陽性（78.49%），78例腸道EV71病毒核酸陽性（41.94%），42例 CoxA16核酸陽性（22.58%），26例其他腸道病毒核酸陽性（13.98%）118份咽拭子標(biāo)本中104份為陽性，檢出率為88.14%，68份糞便標(biāo)本陽性42份，檢出率為61.76%，咽拭子標(biāo)本陽性檢出率明顯比糞便標(biāo)本檢出率高差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；患兒的主要臨床癥狀及體征只要變?yōu)榭凇⑹?、足、臀、膝等部位皮疹和發(fā)熱，不同病原體導(dǎo)致的臨床癥狀和體征的發(fā)生情況差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 臨床上采用熒光定量PCR核酸檢測法有助于對手足口病進(jìn)行早期病原學(xué)診斷，對相關(guān)流行病學(xué)調(diào)研具有極大的臨床意義，有助于早期發(fā)現(xiàn)、治療、預(yù)防手足口病，降低其病死率。

[關(guān)鍵詞] 手足口??；病原學(xué)檢查；臨床分析

[中圖分類號] R51；R37 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-0742（2013）01（a）-0028-02

手足口病是近幾年很常見的一種主要是由于腸道病毒EV71和A組柯薩奇病毒（CoxA16）感染所導(dǎo)致的傳染性疾病，好發(fā)人群主要為幼兒以及學(xué)齡前兒童，某些免疫力極低的成年人也會感染該病，潛伏期較短，一般為3～7 d，感染者沒有十分明顯的前驅(qū)臨床表現(xiàn)和體征，一般表現(xiàn)為驟然起病，主要侵犯部位為口、手、足、臀[1]。感染者最先出現(xiàn)口腔粘膜疹，起初表現(xiàn)為周圍有紅暈的水皰或粟米樣斑丘疹，主要位于兩頰側(cè)和舌以及唇齒側(cè)。手足等遠(yuǎn)端的部位會出現(xiàn)或凹或平的皰疹或者斑丘疹，皮疹不發(fā)癢，5 d左右斑丘疹就會由紅變暗，逐漸消退；皰疹內(nèi)含混濁液體，呈圓形或者橢圓形且扁平凸起，皮紋和長徑的走向相同，大小如黃豆一般，一般不會出現(xiàn)癢和痛感，愈合之后不會有瘢痕[2]，為了探討分析手足口病病原學(xué)特點以及臨床特征，為診斷和預(yù)防提供有力的實驗室及臨床依據(jù)，現(xiàn)對該院2011年2月—2012年3月收治的186例手足口病患者進(jìn)行回顧性分析，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 研究對象 該院收治的186例手足口病患者為研究對象，其中78例并發(fā)腦炎為重癥病例，其余108例為普通病例。發(fā)病年齡為2個月～12歲，其中2個月～2歲27例，2～5歲142例，5～12歲17例。

1.1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 參照《手足口病預(yù)防控制指南》（2008版）中關(guān)于臨床診斷手足口病的標(biāo)準(zhǔn)、輕癥以及重癥的判定標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 檢查方法

1.2.1 輔助檢查 患兒在入院之后均進(jìn)行常規(guī)體溫測量以及體格檢查，胸片、血常規(guī)、血糖、心肌酶譜以及肝腎功能檢查。

1.2.2 病原學(xué)檢查

1.2.2.1 標(biāo)本處理 取大約2 g糞便標(biāo)本標(biāo)記之后加入離心管內(nèi)，再加入PBS10 mL、氯仿1 mL；使用冷凍離心機(jī)離心20 min（15 000 g條件下），上清液保存于另一管（4～8℃）備用；充分?jǐn)噭友适米訕?biāo)本，4 ℃下離心20 min（10 000 r/min），取上清液備用。

1.2.2.2 提取病毒RNA 取上述標(biāo)本100 uL于1.5 mL已經(jīng)滅菌處理的離心管中，根據(jù)TRIzoLReagentRNA提取試劑的說明書要求進(jìn)行RNA提取。

1.2.2.3 RT-PCR檢測 根據(jù)中國疾控預(yù)防中心提供的特征引物使用RT-PCR試劑盒進(jìn)行反應(yīng)，在50 ℃條件下，逆轉(zhuǎn)錄30 min。

1.2.2.4 瓊脂糖電泳 取上述PCR產(chǎn)物5 uL，使用2%瓊脂糖凝膠電泳，采用凝膠成像分析系統(tǒng)對產(chǎn)物的條帶進(jìn)行分析，在紫外線下對特異性的核酸條帶進(jìn)行觀察。

1.3 統(tǒng)計方法

采用SPSS13.0軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)整理和分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗，計量資料采用t檢驗。

2 結(jié)果

2.1 PT-PCR檢測結(jié)果

186份標(biāo)本檢測，146例腸道病毒通用核酸陽性（78.49%），78例腸道EV71病毒核酸陽性（41.94%），42例 CoxA16核酸陽性（22.58%），26例其他腸道病毒核酸陽性（13.98%）118份咽拭子標(biāo)本中104份為陽性，檢出率為88.14%，68份糞便標(biāo)本陽性42份，檢出率為61.76%，咽拭子標(biāo)本陽性檢出率明顯比糞便標(biāo)本檢出率高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），結(jié)果見表1。

2.2 臨床癥狀和體征

186例患者均表現(xiàn)為口腔出現(xiàn)皰疹或者潰瘍，手、足皮膚出現(xiàn)皰疹、斑丘疹，少數(shù)患者臀部出現(xiàn)皰疹、斑丘疹。其中59例患兒出現(xiàn)發(fā)熱，占31.7%，37例患兒出現(xiàn)呼吸道癥狀，占19.9%，5例患兒表現(xiàn)為頭痛，占2.7%?；純壕憩F(xiàn)為乏力、食欲不振、主訴口腔痛，不同病原體導(dǎo)致的臨床癥狀和體征的發(fā)生情況差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

3 討論

近年來通過對手足口病患者進(jìn)行病原學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)引起危重病例主要病原為EV71，其可引起腦膜炎、循環(huán)障礙、肺水腫等?；颊摺o癥狀帶毒者以及隱性感染者是該病主要的傳播源?；颊咴诩毙云?，通過糞便排毒需要3～5周的時間，咽部排毒需要1～2周。主要是通過人群口-糞接觸傳播以及呼吸道傳播等多途徑傳播。病毒不會發(fā)生交叉免疫。由于成年人以及青少年已經(jīng)通過隱性感染獲得了免疫能力，故該病的發(fā)病人群主要為10歲以下的兒童，尤其是<5歲的兒童居多[3]。

熒光定量PCR是一種具有普通PCR高敏性的心得核酸定量技術(shù)，應(yīng)用熒光探針，對PCR擴(kuò)增過程利用光電傳到系統(tǒng)進(jìn)行直接探查熒光信號的變化情況獲取定量的結(jié)果，因此還具備DNA雜交的特異性以及光譜技術(shù)的高精度，克服了常規(guī)PCR的很多缺點。

手足口病是一種全球性的傳染病，無明顯的區(qū)域性，分布廣泛，發(fā)病時間不定，四季都可發(fā)生，尤其是夏季。本病常在暴發(fā)流行后呈現(xiàn)散在發(fā)生，在流行期間，具有聚集發(fā)病現(xiàn)象。該病傳染性非常強(qiáng)，傳播途徑十分復(fù)雜，臨床上尚無特效的藥物和疫苗進(jìn)行特異性防控[4]。早診斷、盡早隔離和治療，及時控制其大范圍的流行。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 趙冬，李洪璐，刁振瀛，等.2411例手足口病的臨床分析[J].中華實驗和臨床感染病雜志（電子版），2012，6（4）：323-326.

[2] 付榮泉，丁繼光，李強(qiáng)，等.熒光定量RT-PCR檢測手足口病病原及其臨床分析[J].醫(yī)學(xué)臨床研究，2010，27（4）：598-599.

[3] 顧月琴，滕燕，鄒榮云，等.手足口病969例臨床分析[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2010，19（26）：3320-3321.

[4] 王賽賽.小兒手足口病219例臨床分析[J].中國社區(qū)醫(yī)師（醫(yī)學(xué)專業(yè)），2012，14（6）：182-183.

[5] 黃小霏，檀衛(wèi)平，梁煥喜，等.兒童手足口病咽拭子39例病毒檢測及臨床分析[J].嶺南急診醫(yī)學(xué)雜志，2011，16（6）：456-459.

（收稿日期：2012-08-05）