陳亞強張樂宜彭津津

（1重慶市黔江區(qū)畜牧獸醫(yī)局，重慶 409000；2廣東省農業(yè)科學院獸醫(yī)研究所，廣東廣州 510000；3重慶三峽職業(yè)學院，重慶 404100）

仔豬滲出性皮炎的實驗室診斷和綜合防治

陳亞強1張樂宜2彭津津3

（1重慶市黔江區(qū)畜牧獸醫(yī)局，重慶 409000；2廣東省農業(yè)科學院獸醫(yī)研究所，廣東廣州 510000；3重慶三峽職業(yè)學院，重慶 404100）

豬滲出性皮炎是由葡萄球菌屬細菌引起的一種急性、超急性的高度接觸性傳染病，該病的主要特征是全身油脂樣滲出性皮炎、破潰、結痂，可導致腹水和死亡。本文針對一例豬滲出性皮炎的病例，對其實驗室診斷方法、防治措施進行了探討。關鍵詞：豬滲出性皮炎；葡萄球菌；診斷；防治

豬滲出性皮炎 （Exudative epidermit，EE）又稱豬油皮病或煤煙病，是一種急性、超急性的高度接觸性傳染病，主要特征為全身油脂樣滲出、惡臭、破潰，最后形成痂皮，可導致腹水和急性死亡。該病的主要病原是豬葡萄球菌（ ），但其他葡萄球菌如產色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、松鼠源葡萄球菌也可引起該病的發(fā)生[1]。5～6日齡的哺乳仔豬和剛斷奶的仔豬最易感染該病，偶見母豬感染[2]。普遍認為脫落毒素的產生是該病的主要致病因子[3]，脫落毒素目前有6種類型，分別是EXHA、EXHB、EXHC、EXHD、SHETA和SHETB，這些毒素可以選擇性地消化真皮表面的Desmogen-1，導致細胞與細胞間的斷裂分離，特別是棘細胞層的細胞分離[4]。引起該病的細菌主要通過破損的皮膚侵入機體，此外機體免疫力低下也會導致該機會性病菌侵入。豬滲出性皮炎無季節(jié)特異性，目前該病的預防和治療尚無有效的疫苗和抗生素[5]。

1 發(fā)病情況及臨床癥狀

2011年4月，廣東省增城市某豬場6～10日齡的2頭哺乳仔豬首先開始發(fā)病，病初眼眶周圍出現(xiàn)紅斑，豬場工作人員以為是打架咬傷，2天后背部也出現(xiàn)紅斑，并發(fā)現(xiàn)有水泡，病豬食欲下降，被毛雜亂，臥地不起，顫抖，并出現(xiàn)呼吸急促現(xiàn)象，體溫高達40.5℃。發(fā)病第3天，全窩開始發(fā)病，癥狀嚴重程度不一。發(fā)病第5天，皮膚表面滲出物和地面污物混合，形成一層棕黃色油脂樣痂皮。整窩豬只注射青霉素和鏈霉素，治療后無效，豬只開始死亡，窩死亡率達40%。之后送病豬的病料進行實驗室診斷，經治療后剩余豬只痊愈。

2 病理變化

病豬消瘦，頜下淋巴結腫大，呈大理石樣外觀，心包積液；肺臟表面散在有大小不等的出血點，邊緣有淤血；肝臟發(fā)黃；腎臟腫大，形態(tài)不規(guī)則。

3 實驗室診斷

3.1 細菌分離與培養(yǎng)

用棉簽刮取沒有污物的皮膚處，同時無菌采病豬心臟、肺臟和淋巴結，分別在普通瓊脂培養(yǎng)基和血平板培養(yǎng)基上劃線進行細菌培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)過夜。皮膚組的平板中菌落較多，病豬心臟、肺臟和淋巴結組的普通瓊脂培養(yǎng)基和血平板培養(yǎng)基上均可觀察到乳白色、表面光滑隆起的單一圓形菌落。

3.2 鏡檢

運用革蘭氏染色法對待檢菌落染色，顯微鏡下可觀察到藍紫色的球菌（圖1），呈葡萄串狀排列，初步確定為葡萄球菌。

圖1 葡萄球菌鏡檢結果

3.3 生化試驗

將純培養(yǎng)的細菌接種于葡萄球菌屬細菌生化編碼鑒定管（項目：尿素、蔗糖、精氨酸水解、木糖、乳糖、甘露

糖、麥芽糖、木醇、甘露醇、蕈糖、乙酰葡糖胺、硝酸鹽還原、蜜二糖、果糖、V-P、山梨醇）進行生化鑒定，對照TH-16S細菌生化編碼鑒定書，分析確定所分離到的菌株編碼及鑒定率，結果表明此菌編碼為331320（鑒定率94.3%，T值為0.89），初步確定為豬葡萄球菌。

3.4 PCR鑒定

將純培養(yǎng)后的葡萄球菌按照AXYGEN細菌基因組DNA提取試劑盒步驟提取細菌基因組DNA，然后運用已建立的多重PCR檢測方法進行PCR鑒定，循環(huán)條件為：94℃預變性5分鐘；94℃變性 50秒、54℃退火 50秒、72℃延伸1分鐘，循環(huán)33次；最后72℃延伸10分鐘，瓊脂糖凝膠電泳觀察結果，回收明亮條帶并測序。電泳結果表明（圖2），在GAP（826 bp）和EXHA基因引物擴增處出現(xiàn)了明顯的條帶，表明其屬于葡萄球菌屬，并含有EXHA毒素基因；測序結果表明該菌和豬葡萄球菌（GenBank:DQ321689.1）的匹配率為99%，確定為豬葡萄球菌。

圖2 PCR鑒定結果M:DL2000 marker；Y:陰性對照；1～4:樣品；K:空白對照

4 討論與防治

4.1 藥敏試驗

用接種棒挑取單個菌落，在普通營養(yǎng)瓊脂平板上重復劃線。然后將商品藥敏試紙片貼在表面，37℃培養(yǎng)18小時，觀察抑菌圈大小。結果顯示：頭孢噻呋抑菌圈為23 mm、頭孢拉定21 mm，高度敏感；新生霉素18 mm，恩諾沙星16 mm，中度敏感；米諾環(huán)素5mm，四環(huán)素6mm，低敏感；青霉素、鏈霉素、氯霉素、慶大霉素耐藥。

4.2 綜合防治

因葡萄球菌很容易產生耐藥性，因此豬場若發(fā)生該病，最好進行實驗室診斷，然后經藥敏試驗確定用何種抗生素，以免導致葡萄球菌帶毒菌株的變異而造成耐藥。此外，還有研究表明EE的發(fā)生與免疫力有很大關系，可能是由于免疫失敗而造成免疫力低下，進而引發(fā)該病。因此，合理的免疫程序、良好的飼養(yǎng)管理和使用敏感的藥物進行預防性投藥有助于預防該病的發(fā)生。

4.2.1 加強飼養(yǎng)管理

為給仔豬提供充足的奶水和母源抗體，應保障母豬有足夠和清潔的飲水，可在水中添加300g/噸的食鹽、200g/噸的檸檬酸以及電解多維；提高母豬營養(yǎng)水平，日糧中蛋白質水平提高2%～3%，礦物質水平提高3%～6%；保持良好的產房環(huán)境衛(wèi)生，通風、溫濕度適當，做好定期消毒工作。減少仔豬的皮膚劃傷，將產床上尖銳的地方磨平，在剪牙、斷尾等易造成感染的環(huán)節(jié)嚴格消毒、規(guī)范操作，避免仔豬互相打架。

4.2.2 制定合理的免疫程序

豬場要做好母豬豬瘟和口蹄疫的免疫。若免疫失敗，母豬抵抗力下降，母源抗體也會隨之減少，將會導致仔豬極易感染葡萄球菌，引起EE。所以各場應根據(jù)各自情況，制定合理的免疫程序，購買正規(guī)疫苗，保存得當，在免疫過程中遵循操作規(guī)范，避免免疫失敗。

4.2.3 定期驅蟲

對不同階段的豬群進行定期驅蟲，并做好詳細記錄。

4.2.4 藥物預防與治療

有條件的豬場可以定期分離鑒定產房細菌，通過藥敏試驗進行預防性投藥，堅持預防為主、早發(fā)現(xiàn)早治療的原則。治療該病前最好先經藥敏試驗確定抗生素種類，本病例最后使用頭孢噻呋鈉2 mg/kg，地塞米松2 mL，10%恩諾沙星2.5 mg/kg，每日2次，連用3～5天，同時在豬體表涂魚石脂軟膏，最終在治療后5～8天時剩余豬只痊愈。如果有脫水嚴重的豬則及時補液，氯化鈉3.5g、碳酸氫鈉2.5g、氯化鉀1.5g、葡萄糖20 g和適量維生素C、維生素B6溶于1 L水中進行口服補液。

[1]Chen S,Wang Y,Chen F,et al.A Highly Pathogenic Strain of Staphylococcus sciuri Caused Fatal Exudative Epidermitis in Piglets[J].PLoS One,2(1):e147. doi:10.1371.

[2]楊鼎，郝永清，宋長緒.豬葡萄球菌脫落毒素研究進展[J].動物醫(yī)學進展，2009，30 (4):60-64.

[3]WegenerHC,Andresen LO, Bille-Hansen.Staphylococcus hyicus viru-Lence in relation to exudative epidermitis in the piglet[J].Can J Vet Res,1993,57: 119-125.

[4]Fudaba Y,Koji N,Lars OA,et al. Staphylococcus hyicus exfoliative toxins selectively digest porcine desmoglein 1[J]. Microb Pathog,2005,39(5-6):171-176.

[5]孫娟.仔豬葡萄球菌性皮炎的診治[J].畜牧獸醫(yī)科技信息，2007(2):60.

S858.28

B

1673-4645(2013)11-0057-02

2013-08-03