許澤龍，楊豐慶，夏之寧

重慶大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院，重慶 400030

絞股藍(lán)(Gynostemma pentaphyllum(Thunb)Makino.)，又名七葉膽、七葉參，為葫蘆科絞股藍(lán)屬多年生攀援草本植物，全草入藥，具有抗腫瘤、降低血脂、止咳袪痰、清熱解毒［1］等作用。文獻(xiàn)報(bào)道絞股藍(lán)主要含有皂苷類、黃酮類、糖類、萜類、有機(jī)酸、生物堿、氨基酸、蛋白質(zhì)、脂肪等化學(xué)成分，其中，皂苷類、黃酮類和糖類為絞股藍(lán)的主要活性成分［2］。我國對絞股藍(lán)的研究始于上世紀(jì)80年代末，20多年來國家對絞股藍(lán)的研究投入了大量的人力和物力，讓絞股藍(lán)的研究得以深入化，尤其對絞股藍(lán)皂苷的研究形成了一套系統(tǒng)的研究理論。為尋找絞股藍(lán)中抗糖尿病的活性成分，本文選取四川產(chǎn)絞股藍(lán)地上部位進(jìn)行了化學(xué)成分的研究，從絞股藍(lán)地上部分分離得到8 個(gè)化合物，分別鑒定為 24-乙基-△7，22-膽甾二烯-3-酮(1)、24-乙基-△7，22-膽甾二烯-3β-醇(2)、商陸素(3)、異鼠李素(4)、槲皮素(5)、葉黃素(6)、吐葉醇(7)和棕櫚酸(8)，其中1、2、6、7和8為首次從絞股藍(lán)中分離得到，7為首次從葫蘆科植物中分離得到。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器和材料

核磁共振(1H NMR和13C NMR)譜儀:Bruker Avance 500型，TMS為內(nèi)標(biāo);川儀LC-900B型高效液相色譜儀;X-4型顯微熔點(diǎn)儀(上海精密科學(xué)儀器有限公司);Sephadex LH-20凝膠(德國merk);薄層硅膠(GF254，青島海洋化工有限公司);各種柱色譜用硅膠均為青島裕民源硅膠試劑廠;所有試劑均為分析純。

絞股藍(lán)藥材于2011年6月購于重慶桐君閣藥材市場，經(jīng)重慶市中藥研究院副研究員秦松云鑒定為絞股藍(lán)Gynostemma pentaphyllum(Thunb)Makino.全草，標(biāo)本保存于重慶大學(xué)藥學(xué)系天然藥物研究室。

1.2 提取與分離

絞股藍(lán)全草5.0 kg寸斷，70%乙醇水溶液冷浸提取3次(每次10 d)。合并提取液，減壓濃縮得浸膏110 g，浸膏依次用石油醚，醋酸乙酯萃取(各三次)。各部分經(jīng)減壓濃縮，得石油醚部分5.0 g，醋酸乙酯部分65.0 g。取醋酸乙酯部分浸膏63.0 g，經(jīng)硅膠柱色譜分離，以石油醚-醋酸乙酯(100∶0→0∶100)和醋酸乙酯-甲醇系統(tǒng)依次進(jìn)行梯度洗脫(100∶0→1∶1)，共得10 個(gè)餾分(F1-F10)。F2 靜置后析出無色針狀結(jié)晶，反復(fù)結(jié)晶得化合物1(25 mg)和2(20 mg);F8經(jīng)硅膠柱層析，以石油醚-醋酸乙酯洗脫(4∶1)，得7個(gè)餾分(F8A-F8G)，F(xiàn)8B 重結(jié)晶得化合物3(200 mg)，F(xiàn)8E經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜分離，以二氯甲烷-甲醇(1∶1)洗脫得化合物6(100 mg)和8(55 mg);F9采用硅膠柱分離，以二氯甲烷-甲醇(10∶1→5∶1)梯度洗脫，得四個(gè)餾分(F9A-F9D)，F(xiàn)9D經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜分離，以二氯甲烷-甲醇(1∶1)洗脫得化合物4(100 mg);F10經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜分離，以甲醇為洗脫劑，得化合物5(500 mg)和7(20 mg)。

2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 白色菱形結(jié)晶(氯仿)，mp.176～178 ℃。1H NMR(500 Hz，CDCl3)δ:(3H，s，H-18)，0.79(3H，d，J=7.0 Hz，H-27)，0.82(3H，t，J=8.0 Hz，H-29)，0.85(3H，d，J=6.0 Hz，H-21)，1.02(3H，s，H-19)，1.04(3H，d，J=6.5 Hz，H-26)，5.04(1H，dd，J=8.5，15 Hz，H-22)，5.17(1H，dd，J=8.5，15 Hz，H-23)，5.18(1H，m，H-7);13C NMR(125 Hz，CDCl3)δ:39.0(C-1)，44.4(C-2)，212.1(C-3)，38.3(C-4)，43.1(C-5)，30.2(C-6)，117.2(C-7)，139.7(C-8)，49.0(C-9)，34.6(C-10)，21.9(C-11)，39.5(C-12)，43.4(C-13)，55.2(C-14)，23.2(C-15)，28.6(C-16)，56.0(C-17)，12.3(C-18)，12.6(C-19)，40.9(C-20)，21.1(C-21)，138.2(C-22)，129.8(C-23)，51.4(C-24)，32.0(C-25)，21.5(C-26)，19.1(C-27)，25.6(C-28)，12.3(C-29)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［3］報(bào)道基本一致，故鑒定化合物1為24-乙基-△7，22-膽甾二烯-3-酮。

化合物2 無色針晶，mp.160～161℃。1H NMR(500 Hz，CDCl3)δ:0.55(3H，s，H-18)，0.80(3H，s，H-19)，0.79(3H，d，J=6.5 Hz，H-27)，0.81(3H，t，J=7.5 Hz，H-29)，0.84(3H，d，J=6.0 Hz，H-21)，1.03(3H，d，J=6.5 Hz，H-26)，3.60(1H，m，H-3)，5.03(1H，dd，J=8.5，15.0 Hz，H-22)，5.16(1H，dd，J=8.5，15.5 Hz，H-23)，5.16(1H，m，H-7);13C NMR(125 Hz，CDCl3)δ:37.1(C-1)，31.4(C-2)，71.0(C-3)，38.0(C-4)，40.2(C-5)，29.6(C-6)，117.5(C-7)，139.5(C-8)，49.4(C-9)，34.2(C-10)，21.5(C-11)，39.4(C-12)，43.3(C-13)，55.1(C-14)，23.0(C-15)，28.5(C-16)，55.9(C-17)，12.0(C-18)，13.0(C-19)，40.8(C-20)，21.0(C-21)，138.1(C-22)，129.4(C-23)，51.2(C-24)，31.8(C-25)，21.3(C-26)，19.0(C-27)，25.4(C-28)，12.2(C-29)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［3］報(bào)道基本一致，故鑒定化合物2為24-乙基-△7，22-膽甾二烯-3β-醇。

化合物3 黃色粉末，mp.230～231℃。1H NMR(500 Hz，DMSO-d6)δ:6.35(1H，d，J=1.5 Hz，H-6)，6.71(1H，d，J=1.5 Hz，H-8)，7.09(1H，d，J=8.5 Hz，H-5')，7.68(1H，dd，J=1.5，9.0 Hz，H-6')，7.72(1H，d，J=1.5 Hz，H-2')，3.86(3H，s，7-OCH3)，3.85(3H，s，7-OCH3，4'-OCH3)，9.33(3-OH)，9.59(3'-OH)，12.45(5-OH);13C NMR(125 Hz，DMSO-d6)δ:165.0(C-2)，136.4(C-3)，176.1(C-4)，160.4(C-5)，97.5(C-6)，165.0(C-7)，91.9(C-8)，156.1(C-9)，104.0(C-10)，123.3(C-1')，114.7(C-2')，146.2(C-3')，149.4(C-4')，111.7(C-5')，119.8(C-6')，55.6(4'-OCH3)，56.0(7-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［4］報(bào)道的基本一致，故確定化合物3為商陸素。

化合物4 黃色針晶(甲醇)，mp.269℃。1H NMR(500 Hz，DMSO-d6)δ:12.47，10.75，9.73，9.52(each 1H，br s，4 × -OH)，7.75(1H，d，J=1.5 Hz，H-2')，7.69(1H，d，J=8.5 Hz，H-6')，6.94(1H，d，J=8.5 Hz，H-5')，6.48(1H，s，H-8)，6.19(1H，d，J=1.5 Hz，H-6)，3.85(3H，s，-OCH3);13C NMR(125 Hz，DMSO-d6)δ:147.3(C-2)，135.8(C-3)，175.9(C-4)，156.1(C-5)，98.2(C-6)，164.0(C-7)，93.6(C-8)，160.7(C-9)，103.0(C-10)，121.7(C-1')，115.4(C-2')，146.6(C-3')，148.8(C-4')，111.7(C-5')，122.0(C-6')，55.7(-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［5］報(bào)道的基本一致，故確定化合物4為異鼠李素。

化合物5 黃色粉末(甲醇)，mp.312～313℃。1H NMR(500 Hz，DMSO-d6)δ:12.50，10.79，9.60，9.38，9.32(each 1H，br s，5 × -OH)，7.68(1H，d，J=2.0 Hz，H-2')，7.54(1H，dd，J=2.0，8.5 Hz，H-6')，6.88(1H，d，J=8.0 Hz，H-5')，6.40(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.18(1H，d，J=1.5 Hz，H-6);13C NMR(125 Hz，DMSO-d6)δ:146.8(C-2)，135.7(C-3)，175.8(C-4)，160.7(C-5)，98.2(C-6)，163.9(C-7)，93.3(C-8)，156.1(C-9)，103.0(C-10)，121.9(C-1')，115.6(C-2')，145.0(C-3')，147.7(C-4')，115.0(C-5')，120.0(C-6')。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［6］報(bào)道的基本一致，故確定化合物5為槲皮素。

化合物6 橙黃色粉末，mp.183～184℃。1H NMR(500 Hz，DMSO-d6)δ:0.78，0.91(6H，s，1'-gem-Me)，1.01，1.04(6H，s，1-gem-Me)，1.17(1H，dd，J=13，7.5 Hz，2'-ax-H)，1.31(1H，t，J=12 Hz，2-ax-H)，1.54(3H，s，5'-Me)，1.67(3H，s，5-Me)，1.88(3H，s，9'-Me)，1.93(9H，s，9-，13-，13'-Me)，2.21-2.38(2H，m，6'-，4eq-H)，3.75(1H，m，3-H)，4.03(1H，m，3'-H)，4.50(1H，d，J=5Hz，7-H)，4.57(1H，d，J=4.5 Hz，4'-H)，5.45(2H，s，7-，8-H)，6.13(3H，m，8'-，10-，10'-H)，6.18(2H，m，14-，14'-H)，6.39(2H，d，J=14.5 Hz，12-，12'-H)，6.61-6.72(4H，m，11-，11'-，15-，15'-H);13C NMR(125 Hz，DMSO-d6)δ:36.5(C-1)，48.5(C-2)，62.6(C-3)，42.6(C-4)，162.5(C-5)，137.4(C-6)，125.6(C-7)，137.6(C-8)，135.4(C-9)，131.3(C-10)，125.1(C-11)，137.1(C-12)，136.2(C-13)，132.6(C-14)，130.3(C-15)，28.5(C-16)，30.3(C-17)，21.5(C-18)，12.5(C-19 and C-20)，33.7(C-1')，44.7(C-2')，63.5(C-3')，125.1(C-4')，137.3(C-5')，54.9(C-6')，129.2(C-7')，130.6(C-8')，134.8(C-9')，137.1(C-10')，125.1(C-11')，137.3(C-12')，136.2(C-13')，132.6(C-14')，130.3(C-15')，23.8(C-16')，29.5(C-17')，22.5(C-18')，12.9(C-19')，12.6(C-20')。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［7，8］報(bào)道的基本一致，故確定化合物6為葉黃素。

化合物7 無色針晶(甲醇)，mp.312～313℃。1H NMR(500 Hz，Cd3OD)δ:5.87(1H，s，H-4)，5.79(1H，m，H-7)，5.78(1H，m，H-8)，4.32(1H，m，H-9)，2.48(1H，d，J=16.5 Hz，H-2a)，2.16(1H，d，J=17.0 Hz，H-2b)，1.91(3H，s，H-11)，1.24(3H，d，J=6.0 Hz，H-10)，1.04(3H，s，H-12)，1.02(3H，s，H-13);13C NMR(125 Hz，Cd3OD)δ:42.4(C-1)，50.7(C-2)，201.2(C-3)，127.1(C-4)，167.4(C-5)，79.9(C-6)，130.0(C-7)，137.0(C-8)，68.6(C-9)，23.8(C-10)，19.5(C-11)，23.4(C-12)，24.5(C-13)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9］報(bào)道的基本一致，故確定化合物7為吐葉醇。

化合物8 白色粉末(氯仿)，mp.60～61℃。1H NMR(500 Hz，CDCl3)δ:2.35(2H，t，J=7.5 Hz，H-2)，1.63(2H，m，H-3)，1.26 ～1.35(24H，m，H-4～ 15)，0.88(3H，t，J=7.0 Hz，-CH3);13C NMR(125 Hz，CDCl3)δ:180.0(C-1)，34.1(C-2)，31.9(C-3)，9.1-29.7(C-4 ～13)，24.7(C-14)，22.7(C-15)，14.1(C-16)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［10］報(bào)道的基本一致，故確定化合物8為棕櫚酸。

1 ‘National Chinese Herbal Medicine’Writing Group(《全國中草藥匯編》編寫組)，National Chinese Herbal Medicine(next)(全國中草藥匯編(下))，Beijing，People's Chinese Medical Publishing House，978.467.

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