胡麗娟 劉華山 陳淑娟

216例金黃色葡萄球菌中紅霉素對(duì)克林霉素誘導(dǎo)耐藥檢測(cè)

胡麗娟 劉華山 陳淑娟

目的 了解金黃色葡萄球菌(SA)對(duì)紅霉素和克林霉素的耐藥性, 檢測(cè)紅霉素對(duì)克林霉素誘導(dǎo)耐藥的發(fā)生率。 方法 采用美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)推薦的紙片擴(kuò)散法, 用紅霉素和克林霉素雙紙片法(D-試驗(yàn))和VITEK 2 Compact AES分析紅霉素對(duì)克林霉素誘導(dǎo)耐藥表型。 結(jié)果 216株SA中有76株(MSSA22株, MRSA54株)呈紅霉素耐藥、克林霉素敏感, 其中29株D-試驗(yàn)陽性(MSSA 8株, MRSA 21株),檢出率分別為36.4%、38.9%。結(jié)論 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)加強(qiáng)對(duì)SA中克林霉素誘導(dǎo)耐藥的檢測(cè), 以指導(dǎo)臨床醫(yī)生合理選用大環(huán)內(nèi)酯類、林可酰胺類抗菌藥物。

金黃色葡萄球菌；紅霉素；克林霉素；誘導(dǎo)耐藥； D-試驗(yàn)

金黃色葡萄球菌(SA)是引起醫(yī)院感染和社區(qū)感染的常見致病菌之一, 自1961年英國醫(yī)師Jerons首次臨床報(bào)告第一例耐甲氧西林SA(MRSA)感染患者以來, 其耐藥性逐年增加, 已經(jīng)成為醫(yī)院感染的主要致病菌。MRSA往往又同時(shí)對(duì)B-內(nèi)酰胺酶類抑制劑復(fù)合抗生素及碳青酶烯類耐藥。因此,臨床常使用大環(huán)內(nèi)酯類(紅霉素)、林可酰胺類(克林霉素)、B類鏈陽霉素抗生素治療MRSA引起的感染?？肆置顾赜捎谄浣M織滲透性強(qiáng)等特點(diǎn)常用于皮膚和軟組織感染的治療, 也是青霉素和頭孢菌素過敏的常規(guī)替代藥品, 隨著這些藥物使用增多, 其耐藥性也增加。且紅霉素具有誘導(dǎo)克林霉素耐藥的作用, 使得克林霉素治療無效。通過VITEK 2 Compact高級(jí)專家系統(tǒng)(AES)進(jìn)行檢測(cè), 了解福建省莆田學(xué)院附屬醫(yī)院可誘導(dǎo)克林霉素耐藥的發(fā)生率。

1 資料與方法

1.1 菌株來源 2013年3月～2013年3月從本院臨床科室送檢的標(biāo)本中分離SA共216株, 其中痰液142株、分泌物和膿液61株、尿液6株、血液3株, 其他4株。

1.2 鑒定及藥敏試驗(yàn) 細(xì)菌鑒定采用法國生物梅里埃公司VITEK-2 Compact全自動(dòng)分析系統(tǒng)進(jìn)行鑒定到種, 藥敏卡選用AST-GP67測(cè)定, 該卡采用2個(gè)孔位檢測(cè)紅霉素誘導(dǎo)克林霉素耐藥；1個(gè)孔位是0.5 μg/ml克林霉素, 另一個(gè)孔位是(0.25 μg/ml克林霉素+0.5 μg/ml紅霉素)。D-試驗(yàn)檢測(cè)采用美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)2009年版標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作與判斷結(jié)果。

1.3 培養(yǎng)基及藥敏紙片 Mueller-Hinton瓊脂平板、哥倫比亞血瓊脂平板和巧克力色血瓊脂平板均購自鄭州安圖綠科生物工程有限公司, 藥物紙片紅霉素(15 μg/片)和克林霉素(2 μg/片)均購自英國Oxoid公司。

1.4 質(zhì)控菌株 金黃色葡萄球菌ATCC25923購自福建省臨床檢驗(yàn)中心。

2 結(jié)果

2.1 MRSA檢出率 216株SA中MSSA 62株(28.7%), MRSA 154株(71.3%)。

2.2 SA對(duì)紅霉素和克林霉素藥敏結(jié)果 216株SA中, 紅霉素耐藥而克林霉素敏感76株(35.2%), 紅霉素敏感而克林霉素耐藥2株(0.9%), 兩者同時(shí)耐藥114株(52.8%), 兩者同時(shí)敏感24株(11.1%)。

2.3 D-試驗(yàn)結(jié)果 對(duì)76株紅霉素耐藥而克林霉素敏感的SA進(jìn)行D-試驗(yàn), 其中22株MSSA, D-試驗(yàn)陽性8株, 發(fā)生率為36.4%, 54株MRSA, D-試驗(yàn)陽性21株, 發(fā)生率為38.9%。將以上D-試驗(yàn)陽性的SA經(jīng)VITEK-2 Compact AES檢測(cè)顯示耐藥表型均為MLSB INDUCIBLE, 誘導(dǎo)克林霉素耐藥陽性, 與CLSI紙片確證D-試驗(yàn)法比較, 靈敏度為100%。

3 討論

在SA中, 獲得性對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類和林可霉素耐藥很普遍。對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類耐藥機(jī)制有能量依賴的主動(dòng)外排和核糖體靶位改變2種［1］, 前者由msrA基因編碼外排蛋白導(dǎo)致對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類和B型鏈陽霉素耐藥, 對(duì)克林霉素敏感。后者由msr基因編碼, 引起對(duì)具有相同靶位的大環(huán)內(nèi)酯類、林可霉素類和B型鏈陽霉素同時(shí)耐藥(MLSB耐藥)。耐藥可分為結(jié)構(gòu)型(cMLS)和誘導(dǎo)型(iMLS)。cMLS型耐藥的表型為對(duì)紅霉素和克林霉素均耐藥, 常規(guī)的體外藥敏試驗(yàn)均能測(cè)出。iMLS型耐藥的表型為對(duì)紅霉素耐藥而克林霉素敏感, 用常規(guī)藥敏試驗(yàn)不能測(cè)出, 為此, CLIS/NCCLS于2004年推薦用D-試驗(yàn)作為紅霉素誘導(dǎo)克林霉素耐藥的檢測(cè)。以免造成臨床治療失敗。

以上D-試驗(yàn)結(jié)果顯示, MSSA 和MRSA的誘導(dǎo)型克林霉素耐藥的發(fā)生率差異不大, 分別為36.4%和38.9%, 表明本院SA誘導(dǎo)耐藥率較低, 與楊燕［2］報(bào)道相近, 但比黎文成［3］報(bào)道的低, 這可能與不同地區(qū)SA的紅霉素耐藥基因構(gòu)成的差異及大環(huán)內(nèi)酯類藥物使用多少有關(guān)。對(duì)于紅霉素耐藥克林霉素敏感的SA, 本院微生物室多采用VITEK-2 Compact 通過AES中的藥敏綜合分析程序直接篩選紅霉素誘導(dǎo)克林霉素耐藥表型。儀器綜合分析檢測(cè)結(jié)果及AES后報(bào)告最終結(jié)果。與CLSI紙片確證D-試驗(yàn)法比較, 靈敏度為100%。為此可為臨床及時(shí)提供準(zhǔn)確可靠的結(jié)果, 指導(dǎo)醫(yī)生更合理地使用抗生素。

［1］ Leclercq R.Mechanisms of resistance to macrolides and lincosamides: nature of the resistance elements and their clinical implications.Clin Infect Dis, 2002,34(4):482-492.

［2］ 楊燕,孫長貴,曾賢銘,等.耐紅霉素葡萄球菌對(duì)克林霉素誘導(dǎo)型耐藥的檢測(cè).國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2007,17(2):121-124.

［3］ 黎文成,李勰璘,付玉梅,等.D-試驗(yàn)在葡萄球菌對(duì)克林霉素誘導(dǎo)型耐藥的檢測(cè).廣州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2008,36(1):41-42.

Detection of erythromycin-induced resistance to clindamycin among 216 strains of staphylococcus aureus

HU Li-Juan, LIU Hua-Shan, CHEN Shu-Juan.Department of Laboratory, Affiliated Hospital of Putian University, Putian 351100, China

Objective To investigate the resistance of staphylococcus aureus (SA) to erythromycin and clindamycin, and detect the incidence of erythromycin-induced resistance to clindamycin.Methods Disk diffusion susceptibility method was performed for erythrom ycin and clindamycin according to the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI).The inducible resistance phenotype was analyzed by clindamycin and erythyomycin double-disk diffusion method (D test) and VITEK 2 Compact AES.Results Analyzing the susceptibility of 216 SA strains, 76 strains (22 strains of MSSA, 54 strains of MRSA) were resistant to erythromycin but sensitive to clindamycin.29 of the 76 strains were positive in D- test (8 strains of MSSA, 21 strains of MRSA); the positive rates were 36.4% and 38.9% respectively.Conclusion The occurrence of induced resistance to clindamycin is considerably high.It suggested that D-test should be routinely performed in erythromycin-resistant but clindamycin-sensitive staphylococcus in microbiological laboratories.The report of inducible clindam ycin resistance is significant evidence to guide clinical physicians to use antibiotic correctly.

Staphylococcus aureus；Erythromycin；Clindamycin； Inducible resistance； D- test

351100 福建省莆田學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科(胡麗娟陳淑娟)；福建省莆田市城廂區(qū)醫(yī)院(劉華山)