劉曉燕 鄒青峰 陳文晟 馬 磊 李志彪

廣州醫(yī)學(xué)院附屬腫瘤醫(yī)院內(nèi)三科，廣東廣州 510095

ERCC1基因表達(dá)與晚期非小細(xì)胞肺癌鉑類化療方案療效的前瞻性研究

劉曉燕 鄒青峰 陳文晟 馬 磊 李志彪

廣州醫(yī)學(xué)院附屬腫瘤醫(yī)院內(nèi)三科，廣東廣州 510095

目的 探討核苷酸切除修復(fù)交叉互補(bǔ)組基因1（ERCC1）基因表達(dá)與晚期非小細(xì)胞肺癌鉑類化療方案的療效。 方法 入組40例晚期非小細(xì)胞肺癌患者，實驗組選取化療前采用分支DNA-液相芯片技術(shù)檢測確定為ERCC1 mRNA低表達(dá)的患者，對照組為同期住院的非ERCC1 mRNA低表達(dá)患者，每組各20例。每組患者行至少4個周期的含鉑的化療方案治療，評價兩組的化療反應(yīng)率、疾病進(jìn)展時間。 結(jié)果 實驗組患者的化療有效率、疾病進(jìn)展時間分別為85.0%、11.6個月；對照組的化療有效率、疾病進(jìn)展時間分別為30.0%、7.9個月，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論ERCC1基因表達(dá)可作為預(yù)測晚期非小細(xì)胞肺癌對含鉑化療方案的敏感性的指標(biāo)。

非小細(xì)胞肺癌；分支DNA-液相芯片技術(shù)；核苷酸切除修復(fù)交叉互補(bǔ)組基因1；前瞻性研究

肺癌是常見的惡性腫瘤之一，病死率高，其中非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）在肺癌的發(fā)病中占80%～85%，其中有60%～70%的患者在就診時已為晚期，無法行根治性手術(shù)。目前含鉑類的聯(lián)合化療方案是治療晚期NSCLC的標(biāo)準(zhǔn)治療方法，但其治療的有效率仍然不高[1]，其原因可能與患者對鉑類藥物耐藥有關(guān)，其耐藥原因復(fù)雜。有研究提示，核苷酸切除修補(bǔ) （nucleotide excisionrepair，NER）途徑在鉑類耐藥機(jī)制中起重要作用[2]，核苷酸切除修復(fù)交叉互補(bǔ)組基因1（ERCC1）作為NER的重要組成成分，參與DNA鏈的切割和DNA損傷識別，其表達(dá)的高低與鉑類藥物敏感性有密切關(guān)系。本研究通過對比經(jīng)分支DNA-液相芯片技術(shù)檢測證實ERCC1 mRNA的低表達(dá)患者與同期住院患者對鉑類藥物的反應(yīng)率，初步研究其與鉑類藥物化療效果，以期為尋找NSCLC鉑類藥物化療的有效率及生存期的預(yù)測指標(biāo)提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇40例于2010年1月～2011年1月在本院住院的經(jīng)病理學(xué)及影像學(xué)確診為ⅢB～Ⅳ期的非小細(xì)胞肺癌患者。其中，ⅢB期16例，Ⅳ期24例；年齡45～71歲，平均56歲；女性16例，男性24例；鱗癌18例，腺癌22例；所有患者體力狀況評分（KPS）均＞70分，都具有可測量的病灶。治療前檢查血常規(guī)、肝功能、腎功能及心臟功能均在正常范圍內(nèi)。實驗組和對照組各20例患者，實驗組選取經(jīng)分支DNA-液相芯片法檢測為ERCC1 mRNA低表達(dá)患者，對照組為同期的住院的非ERCC1 mRNA低表達(dá)患者，兩組患者在年齡、性別、病種上經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

1.2 實驗方法

1.2.1 化療方案 所有的患者接受至少4個周期的含鉑類藥物的化療，化療方案以 GP（吉西他濱 1000 mg/m2，d1、8；順鉑 30 mg/m2，d1～3）、NP（長春瑞濱 25 mg/m2，d1、8；順鉑30 mg/m2，d1～3）和 TP（多西他賽 75 mg/m2，d1 或紫杉醇135～175 mg/m2，d1；順鉑 30 mg/m2，d1～3）為主，21 d 為 1 個周期，治療2個周期后按照實體腫瘤的療效評價標(biāo)準(zhǔn)（response evaluation criteria in solid tumor，RECIST）進(jìn)行療效評價。無效者改用未用過的其他方案，有效者則繼續(xù)使用原方案化療，如KPS評分經(jīng)治療后下降，＜60分者則停止化療，并改為給予最佳支持治療。

1.2.2 標(biāo)本采集和檢測方法 實驗組在化療前取得腫瘤組織標(biāo)本，用Sur Plex TM基因mRNA表達(dá)檢測液相芯片，采用分支DNA-液相芯片法檢測ERCC1基因的mRNA表達(dá)水平。1.2.3療效評估和隨訪 按照RESIST標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行療效評價：完全緩解（complete remission，CR）、部分緩解（partial remission，PR）、疾病穩(wěn)定（stable disease，SD）和疾病進(jìn)展（progressive disease，PD），治療的總有效率為完全緩解、部分緩解、疾病穩(wěn)定之和。結(jié)束2個周期化療后給予影像學(xué)檢查以評估治療效果，無效者改用未用過的其他方案。定期進(jìn)行隨訪，每月1次，直至患者死亡或者失訪。隨訪的時間為4.5～15.5個月，中位隨訪時間為9.8個月。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 12.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，生存分析采用Kaplan-Meier方法，采用χ2檢驗進(jìn)行率的比較，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ERCC1 mRNA低表達(dá)與患者的臨床特征

20例入組的晚期NSCLC患者中，男性12例，女性8例，其中，鱗癌9例，腺癌11例。

2.2 實驗組與對照組之間的療效、生存期比較

實驗組患者化療后3例完全緩解、14例部分緩解，對照組患者化療后2例完全緩解、4例部分緩解，兩組的化療有效率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；實驗組患者的疾病進(jìn)展時間為11.6個月，對照組患者疾病進(jìn)展時間為7.9個月，兩組患者在疾病進(jìn)展時間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表1）。

表1 實驗組與對照組療效、生存期的比較

3 討論

肺癌是種嚴(yán)重危害人類生命健康的疾病，近十年來其發(fā)病率和死亡率一直居高不下，且發(fā)病率呈上升趨勢，其中80%～85%為非小細(xì)胞肺癌患者。隨著科技的進(jìn)步及化療藥物的發(fā)展，肺癌的治療手段逐漸增多，但其5年生存率仍在8%～15%，這就是所謂的“肺癌的治療性瓶頸”。在肺癌臨床治療的諸多方案中，全身性化療仍是目前晚期肺癌最主要的治療手段之一。臨床資料顯示，含鉑類藥物的化療方案可以使晚期NSCLC患者的1年生存率提高5%，故聯(lián)合鉑類的兩藥化療是目前晚期NSCLC患者的標(biāo)準(zhǔn)治療方案[3]。但目前肺癌患者的化療有效率和化療后中位生存期仍然很低，有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，部分不含鉑類的化療方案與含鉑類的化療方案相比，治療效果差異無統(tǒng)計學(xué)意義[4-5]。隨著人類基因組學(xué)及功能基因組學(xué)研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)患者某些基因表達(dá)水平的差異導(dǎo)致了這種療效的差異。

ERCC1是NER的重要組成成分，參與DNA鏈的切割和DNA損傷識別。NER途徑在鉑類的耐藥機(jī)制中起到了關(guān)鍵作用，其表達(dá)程度與鉑類藥物敏感與否密切相關(guān)[6-8]。ERCC1 mRNA表達(dá)水平與不同組織的DRC有關(guān)，ERCC1 mRNA過度表達(dá)的患者在使用Gem/DDP方案時療效不佳、預(yù)后差[9]。Ryu JS等[10]分析了109例以鉑類為基礎(chǔ)進(jìn)行化療的NSCLC患者的ERCC1第118位密碼子的多態(tài)性時發(fā)現(xiàn)，具有C/C基因型患者的中位生存期長（486 d），而變異型C/T或者T/T的患者的中位生存期短（281 d），兩者差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.0058）。這項研究提示了ERCC1第118位密碼子具有C/C基因型的患者對鉑類藥物敏感[10-13]。在對非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者的臨床研究中發(fā)現(xiàn)，ERCC1的mRNA表達(dá)水平與順鉑/吉西他濱的療效密切相關(guān)，即在同樣接受順鉑/吉西他濱治療的患者中，ERCC1 mRNA表達(dá)水平低的患者累計生存率明顯高于表達(dá)水平高的患者，兩者差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.0001）。研究表明，ERCC1 mRNA低表達(dá)患者對多西紫杉醇+順鉑的治療敏感，而高表達(dá)者對多西紫杉醇+健擇的治療敏感。眾多的研究表明，ERCC1 mRNA用于預(yù)測NSCLC鉑類方案療效已漸趨成熟[14-15]。

本研究的結(jié)果提示，對于ERCC1 mRNA低表達(dá)水平的患者化療有效率較經(jīng)驗性用藥者高，且兩組患者疾病進(jìn)展時間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義。因本研究入組病例數(shù)偏少。隨著基因組學(xué)及腫瘤耐藥機(jī)制研究的不斷深入，研究樣本量的不斷擴(kuò)大，相信將來能篩選出對具體某種化療藥物敏感的個體，制訂“個體化”化療方案，優(yōu)化篩選化療的獲益人群，最大限度地提高治療獲益人群的無疾病進(jìn)展生存期（PFS）和總生存期（OS）。

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The prospective study of relationship between expression of ERCC1 and effect of platinum-based chemotherapy in patients with advanced NSCLC

LIU Xiaoyan ZOU Qingfeng CHEN Wensheng MA LeiLI Zhibiao
Third Department of Medicine,Tumor Hospital Affiliated to Guangzhou Medical College,Guangdong Province,Guangzhou 510095,China

ObjectiveTo investigate the effect between genetic polymorphisms of ERCC1 and survival of patients with advanced non-small cell lung cancer(NSCLC)treated with platinum based chemotherapy.MethodsA total of 40 patients with advanced NSCLC were routinely treated by cisplatin or carboplatin-based chemotherapy,the experimental group selection of chemotherapy before the branch DNA-liquid chip technology testing identified as ERCC1 low mRNA expression of patients,the control group for the same period of hospitalization of ERCC1 mRNA expression in patients with low,each group in 20 cases.Each group patients

four cycles of platinum-based chemotherapy.The response rate(RR)and the time to progression(TTP)were evaluated of the two groups.ResultsThe RR and TTP were 85.0%and 11.6 months in the experimental group,those were 30.0%and 7.9 months in the control group,respectively.The difference between the two groups was significant.ConclusionPolymorphisms of ERCC1 might be associated with overall survival period in patients with advanced NSCLC after treatment with platin-based chemotherapy,which might be the predictive markers for overall survival．

Non-small cell lung cancer;Branch of the DNA-liquid chip technology;ERCC1;Prospective study

R734.2

A

1674-4721（2013）06（a）-0003-03

廣東省廣州市衛(wèi)生局資助項目（編號：201102A213009）。

2012-12-28 本文編輯：林利利）