侯 艷，王李鳴，李慧玲，孫玉鴻，斗 章，王 芳，王俊發(fā)，黃金俠

（黑龍江省佳木斯大學(xué)，a.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院；b.附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科；c.機(jī)械工程學(xué)院；d.信息電子技術(shù)學(xué)院，黑龍江佳木斯154007）

PCR是一種DNA片段擴(kuò)增技術(shù)，運(yùn)用PCR技術(shù)將DNA片段數(shù)目增大后，以便更好的檢測(cè)某種DNA片段是否存在。實(shí)際上，PCR檢測(cè)系統(tǒng)就是一個(gè)溫控設(shè)備，能在95°、65°及35°之間進(jìn)行很好的控制，以便使DNA在95°時(shí)解旋、在35°時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合，在65°時(shí)沿磷酸到五碳糖的方向合成互補(bǔ)鏈。經(jīng)過(guò)數(shù)十年的發(fā)展，PCR檢測(cè)系統(tǒng)得到了極大的完善，被廣泛應(yīng)用于動(dòng)物疾病檢測(cè)、食品安全檢測(cè)、科學(xué)定量研究、應(yīng)用實(shí)踐行業(yè)等，在我國(guó)經(jīng)濟(jì)建設(shè)和人民生活中起著極為重要的作用。本文就PCR檢測(cè)系統(tǒng)常見(jiàn)故障進(jìn)行了分析，并提出一些有效的日常維護(hù)策略。

1 PCR檢測(cè)系統(tǒng)常見(jiàn)故障

1.1 開(kāi)機(jī)顯示器黑屏

PCR檢測(cè)系統(tǒng)開(kāi)機(jī)后顯示器黑屏是比較常見(jiàn)的故障之一，顯示器黑屏一般表現(xiàn)為兩種情況，一種情況是開(kāi)機(jī)后風(fēng)扇正常運(yùn)轉(zhuǎn)顯示器黑屏，另一種是開(kāi)機(jī)后風(fēng)扇不轉(zhuǎn)動(dòng)顯示器黑屏，兩種情況的故障原因并不相同，解決的辦法也不一樣。

在開(kāi)機(jī)后顯示器黑屏，如果風(fēng)扇轉(zhuǎn)動(dòng)正常，說(shuō)明電源并沒(méi)有問(wèn)題，可能是顯示器穩(wěn)壓管損壞、R35斷路、顯示器損壞或控制電路板未正常供電等原因。在排除故障時(shí)，優(yōu)先檢測(cè)控制電路板的輸入電壓，如果沒(méi)有24V輸入電壓，則說(shuō)明控制電路板輸入電路存在故障，著重檢測(cè)輸入電路各元器件是否正常；如果24V輸入電壓正常，則檢查R35、穩(wěn)壓管、顯示器等，在確定故障點(diǎn)后更換相應(yīng)元器件以排除故障。

如果開(kāi)機(jī)后顯示器黑屏無(wú)顯示，風(fēng)扇不轉(zhuǎn)動(dòng)，則說(shuō)明很可能是PCR檢測(cè)系統(tǒng)變壓器損壞、保險(xiǎn)管損壞或控制電路板燒壞。在檢測(cè)故障時(shí)，先拔掉電源，檢測(cè)保險(xiǎn)管是不否正常，如果保險(xiǎn)管損壞則更換保險(xiǎn)管。再檢測(cè)變壓器是否正常，包括如短路、斷路等，最終檢測(cè)控制電路板上各元器件是否正常，根據(jù)檢測(cè)所發(fā)現(xiàn)的故障點(diǎn)更換相應(yīng)元器件后通點(diǎn)試機(jī)，確定系統(tǒng)正常后再投入使用。

1.2 檢測(cè)結(jié)束后PCR管底液體明顯減少或沒(méi)有液體

在運(yùn)用PCR檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，在檢測(cè)結(jié)束后，PCR管蓋上不能附有水珠，PCR管內(nèi)液體不應(yīng)當(dāng)有明顯減少現(xiàn)象，更不能沒(méi)有液體，當(dāng)出現(xiàn)這種故障現(xiàn)象時(shí)，應(yīng)當(dāng)是PCR熱蓋沒(méi)有正常工作，造成這種故障的原因可能是熱蓋損壞，也可能是熱蓋驅(qū)動(dòng)電路存在故障，還可能是熱蓋電壓不足。檢測(cè)故障原因時(shí)，先在不同溫度情況下檢測(cè)溫度傳感器電阻是否正常，如果不正常則更換溫度傳感器電阻；再檢測(cè)熱蓋加熱器電阻是否正常，如果熱蓋加熱器電阻不正常則需更換熱蓋加熱器電阻；如果溫度傳感器電阻和熱蓋加熱器電阻均正常，則故障部位應(yīng)當(dāng)發(fā)生在主板驅(qū)動(dòng)電路上，檢測(cè)主板驅(qū)動(dòng)電路各元器件是否存在故障，更換相應(yīng)故障元器件后試機(jī)排除故障。

1.3 PCR能升溫但不能正常降溫

PCR檢測(cè)系統(tǒng)如果能升溫不能正常降溫，故障原因很可能能是BLOCK模塊損壞或者主主板損壞，這兩種原因都可能造成檢測(cè)系統(tǒng)不能正常升降溫故障。在檢測(cè)故障原因時(shí)，首先檢測(cè)BLOCK模塊是否正常，主要檢測(cè)加熱線電阻和引腳電阻，如果不正常，則說(shuō)明BLOCK模塊損壞，應(yīng)更換相應(yīng)元器件；如果加熱線和各引腳電阻正常，則檢測(cè)控制電路板各元器件，主要為BLOCK驅(qū)動(dòng)電路，如場(chǎng)效應(yīng)管、肖特基二極管等，找到故障元器件后，更換相應(yīng)元器件，試機(jī)確保系統(tǒng)正常后排除故障。

2 PCR檢測(cè)系統(tǒng)日常維護(hù)策略

2.1 檢測(cè)系統(tǒng)電腦與軟件的維護(hù)

PCR檢測(cè)系統(tǒng)的電腦與普通計(jì)算機(jī)一樣會(huì)感染計(jì)算機(jī)病毒，在日常維護(hù)中，必須注意病毒預(yù)防工作，除了安裝相應(yīng)的查毒殺毒軟件和防火墻外，還應(yīng)當(dāng)注意日常使用中的病毒防護(hù)工作，如注意保障移動(dòng)存儲(chǔ)器的安全，在使用U盤(pán)轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)時(shí)先將U盤(pán)格式化以確保U盤(pán)無(wú)毒，盡量不將PCR檢測(cè)系統(tǒng)電腦接入網(wǎng)絡(luò)，在日常應(yīng)用中定期備份重要文件；由于在PCR檢測(cè)系統(tǒng)應(yīng)用過(guò)程中，電腦會(huì)大量存取各類(lèi)數(shù)據(jù)，極容易造成磁盤(pán)碎片，因此還要注意定期進(jìn)行磁盤(pán)碎片整理工作，以確保主機(jī)的工作效率。此外，PCR檢測(cè)系統(tǒng)的計(jì)算機(jī)不能隨意更換，應(yīng)當(dāng)確保專(zhuān)機(jī)專(zhuān)用，并且不能隨意安裝第三方軟件，尤其是不能私自升級(jí)操作系統(tǒng)，以確保主機(jī)電腦系統(tǒng)的正常。

2.2 主機(jī)日常清潔與維護(hù)

PCR檢測(cè)系統(tǒng)應(yīng)當(dāng)配置UPS電源，以保證系統(tǒng)在穩(wěn)定、正常的供電情況下工作，實(shí)驗(yàn)室溫度應(yīng)當(dāng)控制在20~25℃，相對(duì)濕度在20~80%之間，必須保證系統(tǒng)的通風(fēng)；在對(duì)儀器進(jìn)行日常清潔時(shí)，要用不脫屑的軟布擦拭儀器表面，絕不能用有機(jī)溶劑來(lái)清潔PCR檢測(cè)儀；部分實(shí)驗(yàn)室PCR檢測(cè)儀器工作強(qiáng)度大，在連續(xù)使用的情況下，PCR檢測(cè)儀每周應(yīng)當(dāng)重新開(kāi)啟一次；在關(guān)閉系統(tǒng)時(shí)要先關(guān)SDS軟件，再關(guān)PCR電源，最后關(guān)計(jì)算機(jī)電源。在開(kāi)機(jī)時(shí)，要先開(kāi)計(jì)算機(jī)電源，再開(kāi)PCR電源，最后打開(kāi)SDS軟件。

2.3 PCR系統(tǒng)主機(jī)校正

為了確保檢測(cè)的精度和可靠性，應(yīng)當(dāng)定期校正PCR系統(tǒng)主機(jī)，包括ROI校正、背景校正、熒光光譜校正、性能驗(yàn)證等。背景校正先需運(yùn)行背景校正程序，以測(cè)量PCR儀環(huán)境熒光強(qiáng)度，先運(yùn)行校正程序在60℃下，連續(xù)十分鐘讀取背景校正反應(yīng)板的熒光強(qiáng)度，再用SDS軟件計(jì)算所收集到的熒光強(qiáng)度的平均值，保存在校正文件中作為實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的背景信號(hào)；純熒光校正應(yīng)當(dāng)根據(jù)熒光標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)收集熒光數(shù)據(jù)，并將不同熒光標(biāo)準(zhǔn)品的熒光信息分析后存儲(chǔ)在程序之中，以便檢測(cè)時(shí)SDS軟件將接收到的原始光譜信號(hào)同純熒光文件中的標(biāo)準(zhǔn)信號(hào)進(jìn)行比較，確定樣本的光譜表現(xiàn)。ROI校正主要是為了生成目標(biāo)區(qū)ROI數(shù)據(jù)，其間保存的數(shù)據(jù)將作為映射樣本塊來(lái)確定反應(yīng)孔位置，為每個(gè)濾光片生成校正圖像，用以修正光學(xué)系統(tǒng)的微小差異。

3 結(jié)束語(yǔ)

PCR檢測(cè)系統(tǒng)作為高精密度檢測(cè)儀器設(shè)備，被廣泛應(yīng)用于醫(yī)療醫(yī)學(xué)、動(dòng)物檢測(cè)、生物研究等多個(gè)領(lǐng)域，其檢測(cè)精度與可靠性將直接影響著最終檢測(cè)結(jié)果的可靠性，關(guān)系極為重大。因此，在日常應(yīng)用中必須注意常見(jiàn)故障的排除和維護(hù)，從實(shí)驗(yàn)室環(huán)境、軟件系統(tǒng)維護(hù)、病毒防護(hù)、儀器校正等多個(gè)方面來(lái)確保系統(tǒng)的正常，以免因儀器故障和系統(tǒng)問(wèn)題造成檢測(cè)數(shù)據(jù)失真現(xiàn)象，造成不良影響。

[1]曲怡春，徐志峰.MX-PCR熒光分析儀常見(jiàn)故障的維修[J].臨床醫(yī)學(xué)工程，2009（02）：88-89.

[2]宋華芝.3730DNA測(cè)序儀的使用和維護(hù)[J].企業(yè)導(dǎo)報(bào)，2011（13）：36-37.