張亞男

血紅蛋白是由珠蛋白和亞鐵血紅素組成的結合蛋白質。血紅蛋白主要存在于紅細胞中，在正常生理狀態(tài)下，人血漿中僅有微量的血紅蛋白(20～40 mg/L)，與觸珠蛋白形成Hb-Hp復合物，在單核巨噬細胞系統(tǒng)代謝，不能從尿中排出［1］。氰化高鐵血紅蛋白(HiCN)法為國際血液標準化委員會(ICSH)推薦，其最大吸收峰在540nm?，F(xiàn)就氰化高鐵血紅蛋白(HiCN)法及臨床意義分析如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 住院患者60份標本。其中男30例，女30例，年齡19～65歲，平均41歲。

1.2 方法 氰化高鐵血紅蛋白(HiCN)法。

2 操作及注意事項

2.1 操作 血紅蛋白轉化液WHO和我國衛(wèi)生部臨床檢驗中心推薦。分類光度計移液管(5 ml)、微量吸管(20 ml)、試管等。HiCN轉化液：氰化鉀(KCN)0.05 g；高鐵氰化鉀［K3Fe3，(CN)6］0.2 g；無水磷酸二氫鉀(KH2PO4)0.14 g；TritoX-100或其他非離子表面活性劑1.0 ml蒸餾水加至1000 ml。取靜脈或手指血20μl加入5 ml Hb轉化液中，混勻，常溫下放置5 min后，以轉化液調零點，與人540nm(光徑1 cm)測量吸光度A。如果所用的分光光度計是經(jīng)過校準的，則可利用HiCN的毫摩爾吸光系數(shù)和側得的A值計算Hb濃度。

2.2 注意事項 血紅蛋白測定方法很多，但氰化高鐵血紅蛋白測定法是國際血液學標準化委員會推薦的參考方法，其他方法都應以氰化高鐵血紅蛋白法為基準繪制標準曲線。氰化高鐵血紅蛋白試劑不宜儲存在塑料瓶或廣口瓶中，且應在4℃冰箱保存，否則CN-會丟失而使結果偏低［2］。氰化高鐵血紅蛋白試劑在遇到高白細胞或高球蛋白標本時，會出現(xiàn)混濁現(xiàn)象，應進行離心后再比色，以免濁度干擾。氰化鉀是劇毒品，試劑配制時要嚴格按照劇毒品管理程序操作。比色測定后的廢液集中后按每升加次氯酸鈉溶液40 ml，充分振搖混勻后敞開容器置室溫3 h的方法可除去毒性。

3 臨床意義

HICN法是目前國際同一的標準方法，它操作簡便，結果穩(wěn)定可靠。血紅蛋白被高鐵氰化鉀氧化成高鐵血紅蛋白，再跟氰離子結合形成穩(wěn)定的氰化高鐵血紅蛋白(HiCN)。后者在540 nm波長處有吸收峰，可用校準的分光光度計直接測定或用HiCN參考液比色測定。血紅蛋白增減的臨床意義基本上與紅細胞增減意義相同，但血紅蛋白能更好地反映貧血程度。而某些貧血，由于單個紅細胞血紅蛋白的含量不同，血紅蛋白減少與紅細胞減少程度不成平行關系［3］。如缺鐵性貧血時，血紅蛋白量減少程度較紅細胞數(shù)減少明顯，巨幼細胞性貧血時，則紅細胞數(shù)減少程度較血紅蛋白量減少明顯。對于圍手術期患者，當血紅蛋白＜100 g/L時就輸注紅細胞，目前認為這是缺乏科學依據(jù)的。研究發(fā)現(xiàn)，對急、慢性貧血患者，將血紅蛋白濃度作為指導輸血的惟一參數(shù)是無充分依據(jù)的。當血紅蛋白濃度下降時，為保證組織供氧，機體會啟動代償機制，如心輸出量增加、外周血管舒張等；臨床醫(yī)生可能會低估這種代償機制的作用，導致紅細胞的過多使用。與急性貧血相比，慢性貧血患者對貧血的耐受能力更強，因為組織缺氧會導致2，3-DPG升高，促進氧解離曲線右移以利于氧向組織的釋放。血紅蛋白濃度在70～100 g/L的許多患者常常不需要輸血，但是對于大多數(shù)血紅蛋白濃度＜70 g/L的患者則需要通過輸注紅細胞以改善癥狀。因此，血紅蛋白濃度在決定是否需要輸血中有重要的參考價值，但不是決定性指標。血紅蛋白量減少是診斷貧血的最重要指標，但尚不能確定貧血類型，需結合其他檢測指標綜合分析。如MCV、MCH、MCHC測定呈小細胞低色素性；成熟紅細胞偏小而著色淺、中心蒼白區(qū)擴大；細胞化學染色顯示骨髓中細胞內、外鐵降低，則以缺鐵性貧血可能居大。若Hb量降低、網(wǎng)織紅細胞明顯增多、血清膽紅素增加等，則以溶血性貧血可能居大。而如果除Hb量減少外，WBC、BPC同時減少，呈全血細胞減少時，則以再生障礙性貧血的可能性居大。

總之，氰化高鐵血紅蛋白(HiCN)測定法具有操作簡便，試劑容易保存，和除硫化血紅蛋白外，能將碳氧血紅蛋白、高鐵血紅蛋白等多種變性血紅蛋白轉變?yōu)镠iCN等優(yōu)點。

［1］ 張秀明，李健齋，魏明竟，等．現(xiàn)代臨床生化檢驗學．第1版．北京：人民軍醫(yī)出版社，2003：111.

［2］ 趙緒英，劉慧芳．尿微量白蛋白糖化血蛋白與糖尿病早期腎損傷的關系．實用醫(yī)技雜志，2007，37(5)：204-206.

［3］ 王飛，封敏，黃艷春．甲狀腺激素、白蛋白和血紅蛋白聯(lián)合檢測在消化系統(tǒng)惡性腫瘤中的應用．新疆醫(yī)科大學學報，2009，32(5)：619-621．