孫慶國(guó)，王日中，彭慧頡，陳 鋒

（吉林省肝膽病醫(yī)院 檢驗(yàn)科，吉林 長(zhǎng)春130062）

2005年1月至2010年12月7年間從我院門診和住院病人腹腔感染患者中分離到的1200株病原菌，因我院為肝病的?？漆t(yī)院，所以肝腹水合并感染的患者很多，而且多為混合感染。在所有分離的病原菌中，大腸埃希菌占有比例最高，可達(dá)907株（75.6%），390株（32.5%）為革蘭陽(yáng)性球菌（包括單獨(dú)感染及合并革蘭陰性桿菌感染）。用法國(guó)梅里埃分司的ATB半自動(dòng)微生物鑒定儀鑒定到種，并用紙片法對(duì)常用抗生素進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)，了解革蘭陽(yáng)性球菌的耐藥情況，為臨床提供參考。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來(lái)源 實(shí)驗(yàn)用菌株來(lái)自2005年1月至2010年12月7年間從門診和住院病人腹腔感染患者中分離到的390株革蘭陽(yáng)性病原菌，用法國(guó)生物梅里埃公司的ATB半自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)，rapid ID 32STREP（鏈球菌）卡及ID 32STAPH（葡萄球菌）卡進(jìn)行細(xì)菌鑒定。

1.1.2 抗菌藥物及培養(yǎng)基 抗菌藥物紙片、頭孢硝噻吩紙片、哥倫比亞血平板、中國(guó)蘭平板、MH培養(yǎng)基均購(gòu)自廣洲迪景公司（OXOID公司）。

1.2 方法

1.2.1 腹水標(biāo)本接種哥倫比亞血平板＋中國(guó)蘭平板后，放入36℃孵箱孵育18－24h。挑取單個(gè)革蘭陽(yáng)性菌做純培養(yǎng)。

1.2.2 菌種鑒定 用法國(guó)生物梅里埃公司的ATB半自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)，rapid ID32STREP（鏈球菌）卡及ID 32STAPH（葡萄球菌）卡將細(xì)菌鑒定到種。

1.2.3 抗生素敏感試驗(yàn) 采用K－B法。操作方法按美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（CLSI）標(biāo)準(zhǔn)操作和結(jié)果判讀。質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌ATCC25923及糞腸球菌ATCC29212。

1.2.4 β－內(nèi)酰胺酶的檢測(cè) 用Nitrocefin紙片法檢測(cè)β－內(nèi)酰胺酶。

1.2.5 數(shù)據(jù)分析 用 WHONET5.4分析結(jié)果

2 結(jié)果

2.1 其中凝固酶陰性葡萄球菌92株（溶血葡萄球菌47株，表皮葡萄球菌31株，腐生葡萄球菌10株，其他葡萄球菌4株），屎腸球菌87株（22.3%），金黃色葡萄球菌70株（17.9%），糞腸球菌58株（14.9%），星座鏈球菌43株（11%），其他革蘭陽(yáng)性球菌40株（11.3%）。

2.2 β－內(nèi)酰胺酶的檢測(cè) 所有葡萄球菌均為陽(yáng)性，腸球菌及鏈球菌均為陰性。

2.3 糞腸球菌和屎腸球菌對(duì)萬(wàn)古霉素和替考啦寧的敏感性幾乎為100%，屎腸球菌對(duì)青霉素類、氨基糖苷類、喹諾酮類、大環(huán)內(nèi)酯類的敏感性都小于10%，對(duì)四環(huán)素類的敏感性要高于糞腸球菌（見(jiàn)表1）。鏈球菌除對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類和四環(huán)素類的耐藥率較高外，對(duì)其它抗菌素均較敏感（見(jiàn)表1）。葡萄球菌對(duì)萬(wàn)古霉素、替考拉寧及利萘唑胺的敏感率均為100%，對(duì)喹諾酮類的敏感率為40%左右，而對(duì)四環(huán)素類及大環(huán)內(nèi)酯類的敏感率均不到20%，金黃色葡萄球菌對(duì)復(fù)方新諾明的敏感率為92%，而凝固酶陰性葡萄球菌對(duì)復(fù)方新諾明的敏感率僅為15%（見(jiàn)表2）。

表1 腸球菌及鏈球菌對(duì)常用抗生素的耐藥率（%）

3 討論

革蘭陽(yáng)性球菌是皮膚及腸道的正常菌群，為條件致病菌，當(dāng)機(jī)體免疫力低下時(shí)可致嚴(yán)重感染，如尿路感染、心內(nèi)膜炎、血流感染，腹腔感染等。近年來(lái)，由于氟喹諾酮類和頭孢菌素類抗生素的過(guò)度使用，革蘭陽(yáng)性球菌引起的感染性疾病呈上升趨勢(shì)［1］，在美國(guó)腸球菌占到醫(yī)院感染病原菌的第2位［2］。從表1可看出，腸球菌對(duì)青霉素敏感性較差，對(duì)喹諾酮類和大環(huán)內(nèi)脂類抗生素耐藥嚴(yán)重，對(duì)四環(huán)素類糞腸球菌的耐藥率要高于屎腸球菌，腸球菌對(duì)萬(wàn)古霉素、替考拉寧最敏感。由于腸球菌屬中各種細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性差異很大，因此臨床細(xì)菌分離的腸球菌屬應(yīng)鑒定到種［3］。從表2可以看出，雖然在甲氧西林敏感的葡萄球菌中，青霉素和氨芐西林有10%左右的敏感率，但因所有的葡萄球菌β－內(nèi)酰胺酶實(shí)驗(yàn)均為陽(yáng)性，所以臨床也不能報(bào)告敏感，葡萄球菌對(duì)萬(wàn)古霉素、替考拉寧及利萘唑胺的敏感率均為100%，對(duì)喹諾酮類的敏感率為40%左右，而對(duì)四環(huán)素類及大環(huán)內(nèi)酯類的敏感率均不到20%，金黃色葡萄球菌對(duì)復(fù)方新諾明的敏感率為92%，而凝固酶陰性葡萄球菌對(duì)復(fù)方新諾明的敏感率僅為15%。

表2 葡萄球菌對(duì)常見(jiàn)抗菌藥物的耐藥率（%）

而隨著廣譜抗菌素的大量應(yīng)用，一些革蘭陽(yáng)性球菌的耐藥率也在大幅度的提高?，F(xiàn)在MRSA的發(fā)生率在某些醫(yī)院已經(jīng)達(dá)到了70%以上［4］，還出現(xiàn)了萬(wàn)古霉素耐藥的腸球菌（VRE）。而我院MRSA的發(fā)生率僅為34.3%，且沒(méi)有出現(xiàn)VRE。因腹腔感染的病原菌大多是由腸桿菌（主要是大腸埃希菌）引起的［5－7］，臨床醫(yī)生往往只注意應(yīng)用抗革蘭陰性桿菌的藥物而忽略了革蘭陽(yáng)性菌的問(wèn)題，從而使用抗菌素應(yīng)用不到位，導(dǎo)致抗菌治療效果不理想。所以要注意向醫(yī)生傳達(dá)革蘭陽(yáng)性菌引起感染狀況，從而有效地預(yù)防和控制革蘭陽(yáng)性菌所致醫(yī)院感染，減少耐藥菌株的產(chǎn)生和耐藥基因的傳播。

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