張 揚(yáng)，李燕芳，肖漢祥，張振飛，廖永林，孫士鋒，蔣耀智，龐 義

(1.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，廣東省植物保護(hù)新技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州510640;2．中山大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，廣州510275;3．廣東海納農(nóng)業(yè)有限公司，廣東惠州516005)

隨著社會(huì)對(duì)農(nóng)產(chǎn)品安全的關(guān)注，高毒性、高殘留殺蟲(chóng)劑在農(nóng)作物害蟲(chóng)防治中的應(yīng)用受到了限制。而低毒性、安全的生物農(nóng)藥在生產(chǎn)上應(yīng)用是無(wú)公害和綠色農(nóng)產(chǎn)品應(yīng)用的方向。蘇云金芽孢桿菌 (Bacillus thuringiensis，Bt)作為生物農(nóng)藥中的一種，以其安全、殺蟲(chóng)譜廣、制劑生產(chǎn)工藝成熟及比其它生物制劑的的貨架期長(zhǎng)等獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)而成為目前產(chǎn)量最大、應(yīng)用范圍最廣的一類微生物殺蟲(chóng)劑，占到生物農(nóng)藥生產(chǎn)量和使用量的97%左右 (Cannon，1993;Huang et al.，2007)，Bt制劑在無(wú)公害和綠色農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)中有廣闊的市場(chǎng)前景。然而，Bt目前仍然不能完全替代化學(xué)農(nóng)藥，主要是產(chǎn)品的穩(wěn)定性較差、殘效期短、殺蟲(chóng)速度慢等。同時(shí)，值得關(guān)注的是，在蘇云金桿菌中可能會(huì)含有如臘狀芽胞桿菌 (Bacillus cereus，Bc)所含有的腸毒素，食入腸毒素可引起人類嘔吐和腹瀉，是農(nóng)產(chǎn)品的安全隱患 (Green et al.，1990);此外，在蠶區(qū)使用可導(dǎo)致家蠶產(chǎn)生傳染性細(xì)菌病 (王海燕等，2003;Kunimi，2007;黃紅星等，2009)。針對(duì)蘇云金桿菌使用后農(nóng)產(chǎn)品的安全性和對(duì)家蠶毒性大并可能引發(fā)“二次傳染”的問(wèn)題，日本和我國(guó)曾有過(guò)研究“Bt死菌劑”的報(bào)道，通過(guò)化學(xué)及放射性元素輻射殺活的方法殺除制劑中的活菌，減少“二次傳染”問(wèn)題 (Becker，2002;王海燕，2003)。最近，中山大學(xué)成功應(yīng)用鈷輻射滅活法研究制出無(wú)活菌蘇云金桿菌制劑 (龐義等，2011)。為了科學(xué)評(píng)價(jià)經(jīng)處理后的無(wú)活菌蘇云金桿菌對(duì)害蟲(chóng)的田間防治效果，為生產(chǎn)上應(yīng)用提供參考，2010年我們進(jìn)行了無(wú)活菌蘇云金桿菌制劑對(duì)水稻稻縱卷葉螟和和十字花科蔬菜害蟲(chóng)小菜蛾的田間藥效試驗(yàn)?，F(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果報(bào)道如下:

1 材料與方法

1.1 供試材料

1.1.1 試驗(yàn)對(duì)象:稻縱卷葉螟Cnaphalocrocis medinalis Guenee;小菜蛾P(guān)lutella xylostella(L.)。

1.1.2 試驗(yàn)作物:水稻Oryza sativa，品種:番桂絲苗;十字花科花椰菜 Brassica oleracea L．var．botrytis，品種:衛(wèi)鋒。

1.1.3 試驗(yàn)地點(diǎn)和時(shí)間:防治稻縱卷葉螟試驗(yàn)，地點(diǎn)設(shè)在廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院白云試驗(yàn)基地 (廣州市白云區(qū)鐘落潭鎮(zhèn))，早造5月水稻分蘗未期，試驗(yàn)地各小區(qū)肥水管理、長(zhǎng)勢(shì)等條件基本一致，供試水稻生長(zhǎng)較好。施藥時(shí)水稻生長(zhǎng)期為破口期，每穴有卷葉7～8苞，感蟲(chóng)率80%。防治小菜蛾試驗(yàn)，地點(diǎn)設(shè)在廣州市白云區(qū)石井，試驗(yàn)施藥時(shí)間10月23日。試驗(yàn)區(qū)常年種植蔬菜，前作種植菜心品種，小菜蛾常年發(fā)生較重。供試花椰菜長(zhǎng)勢(shì)較好，試驗(yàn)施藥時(shí)處于8～12葉期，小菜蛾發(fā)生較重，以幼蟲(chóng)初發(fā)盛期為主。試驗(yàn)各小區(qū)肥水管理、作物長(zhǎng)勢(shì)等條件一致。

1.1.4 試驗(yàn)藥劑:32000 IU/mg無(wú)活菌的蘇云金桿菌可濕性粉劑 (以下簡(jiǎn)稱無(wú)活菌Bt)(中山大學(xué)提供)，蘇云金桿菌32000 IU/mg可濕性粉劑 (以下簡(jiǎn)稱Bt)(千勝，武漢科諾生物農(nóng)藥有限公司)，0.5%甲基阿維菌素苯甲酸鹽乳油 (廣東省植保蔬菜專用藥劑中試廠)。

1.2 試驗(yàn)方法

防治水稻稻縱卷葉螟試驗(yàn)，無(wú)活菌Bt和市售Bt制劑，每667 m2用量分別同為200、300、400克;甲基阿維菌素苯甲酸鹽乳油，每667 m2用量為40 mL;另設(shè)空白對(duì)照，每處理4個(gè)重復(fù)，隨機(jī)區(qū)組排列。在稻縱卷葉螟1～2齡期，用利農(nóng)牌HD－400手搖式壓縮噴霧器，按上述各處理藥劑劑量，每667 m2用水60 kg，均勻噴霧施藥。空白對(duì)照噴等量的清水。

防治小菜蛾試驗(yàn)，無(wú)活菌Bt和市售Bt制劑，每667m2用量分別同為150、300、600克 (按順序編號(hào)分別為1－6);另設(shè)空白對(duì)照 (編號(hào)7)，每處理4個(gè)重復(fù)，隨機(jī)區(qū)組排列。在小菜蛾幼蟲(chóng)盛孵期，用利農(nóng)牌HD－400手搖式壓縮噴霧器，按上述各處理藥劑劑量，每667 m2用水60 kg，均勻噴霧施藥。空白對(duì)照噴等量的清水。

1.3 調(diào)查方法

1.3.1 稻縱卷葉螟調(diào)查方法

在當(dāng)代稻縱卷葉螟為害基本定型后調(diào)查，在施藥后14 d，每小區(qū)5點(diǎn)取樣，每點(diǎn)調(diào)查5叢水稻，共查25叢。查健葉數(shù)和卷葉數(shù)。按如下公式計(jì)算防治效果:

1.3.2 小菜蛾調(diào)查方法

于施藥前和施藥后1 d、施藥后3 d、施藥后7 d和10 d各調(diào)查一次，全期共調(diào)查5次，每小區(qū)對(duì)角線五點(diǎn)取樣，每點(diǎn)固定調(diào)查4棵菜，共調(diào)查20棵菜上的活蟲(chóng)數(shù)量，按如下公式計(jì)算蟲(chóng)口減退率和防治效果:

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

根據(jù)上述計(jì)算公式，應(yīng)用《實(shí)用統(tǒng)計(jì)分析及?其計(jì)算機(jī)處理平臺(tái) (DPS)》軟件，用鄧肯氏新復(fù)極差 (DMRT)法對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 無(wú)活菌Bt防治稻縱卷葉螟田間藥效試驗(yàn)結(jié)果

從試驗(yàn)結(jié)果 (表1)可知，無(wú)活菌 Bt制劑(32000 IU/mg)對(duì)稻縱卷葉螟施藥后14 d，用量200 g/667 m2、300 g/667 m2和400 g/667 m2的防治效果分別為72.6%、76.06%和82.32%，在同等劑量下，與市售的生物農(nóng)藥32000 IU/mg可濕性粉劑的防治效果相當(dāng);略低于化學(xué)藥劑0.5%甲基阿維菌素苯甲酸鹽乳油每667 m2用藥量40 g的防治效果，但差異不顯著，具有較好的防治效果。

表1 無(wú)活菌Bt制劑防治稻縱卷葉螟田間藥效試驗(yàn)結(jié)果Table 1 Result of field efficacy trials of Bt without viable bacteria against Cnaphalocrocis medinalis

2.2 無(wú)活菌Bt制劑防治花椰菜小菜蛾田間藥效試驗(yàn)結(jié)果

無(wú)活菌Bt對(duì)小菜蛾藥后第1 d的防治效果見(jiàn)表2。試驗(yàn)結(jié)果表明，無(wú)活 Bt制劑150 g/667、300 g/667 m2、600g/667 m2防治效果分別為20.94%、25.72%和40.49%，較同等劑量的Bt可濕性粉劑防治效果低;藥后第3 d的防治效果，無(wú)活菌 Bt制 劑 150 g/667 m2、300 g/667 m2、600 g/667 m2防治效果分別為67.30%、77.53%和83.33，也比同等劑量的Bt可濕性粉劑防治效果低;藥后第7 d的防治效果，除低劑量150 g/667 m2的防治效果，無(wú)活菌Bt低于同等劑量的Bt可濕性粉劑外，其它兩個(gè)劑量的防治效果分別為88.94%和93.50%，與市售的32000 IU/mg Bt可濕性粉劑的防治效果相當(dāng)，具有較為理想的防治效果;藥后第10 d，無(wú)活菌Bt制劑的防治效果略有下降，但仍然有一定的防治效果，具有一定的持效性，三個(gè)劑量對(duì)小菜蛾的防治效果分別為75.66%、83.06%和84.95%，除低劑量的效果略低于Bt可濕性粉劑外，其它兩個(gè)劑量均與后者相當(dāng)。

表2 無(wú)活菌蘇云金桿菌制劑防治花椰菜小菜蛾田間藥效試驗(yàn)結(jié)果Table 2 Result of field efficacy trials of Bt without viable bacteria against Plutella xyllostella

3 結(jié)論與討論

從無(wú)活菌Bt制劑對(duì)水稻稻縱卷葉螟的田間防治藥效試驗(yàn)和對(duì)小菜蛾田間防治藥效試驗(yàn)的結(jié)果來(lái)看，與市售Bt制劑比較，無(wú)活菌Bt制劑具有同等的防治效果和同等的持效期。初步試驗(yàn)確認(rèn)，經(jīng)適當(dāng)劑量的鈷－60輻射處理后，雖然Bt制劑中不再含有活孢子，但對(duì)Bt的殺蟲(chóng)活性沒(méi)有明顯影響。當(dāng)前，綠色植保技術(shù)正在世界范圍內(nèi)推廣;在我國(guó)，有機(jī)蔬菜和有機(jī)稻米越來(lái)越受到消費(fèi)者青睞，并在生態(tài)環(huán)境較好的山區(qū)大力推廣種植，同時(shí)，由于產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)的調(diào)整，傳統(tǒng)的蠶桑種植和養(yǎng)蠶業(yè)也從原來(lái)經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)地區(qū)向山區(qū)轉(zhuǎn)移，開(kāi)發(fā)新型安全的微生物殺蟲(chóng)劑是綠色植保、食品安全和生態(tài)安全的需要，無(wú)活菌Bt制劑將有廣闊的應(yīng)用前景 (龐義等，2011)。無(wú)活菌Bt制劑的保存期與藥效的關(guān)系則需要作進(jìn)一步測(cè)定。

References)

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