郝 果,田呈瑞,高春燕,周 瑞,高亞妮,康宇新
(陜西師范大學食品工程與營養(yǎng)科學學院,陜西西安710062)
不同采收期黃參功效成分及甲醇提取物抗氧化性研究
郝 果,田呈瑞*,高春燕,周 瑞,高亞妮,康宇新
(陜西師范大學食品工程與營養(yǎng)科學學院,陜西西安710062)
對不同采收期黃參的功效成分進行了分析,并對甲醇提取物進行抗氧化研究。結(jié)果表明,與頭年10月份采收的黃參相比,次年4月份采收的黃參淀粉含量顯著降低,還原糖、蛋白質(zhì)、脂肪、黃酮、多酚含量增加,礦物質(zhì)含量基本不變;甲醇提取物抗氧化性增強。
不同采收期,黃參,營養(yǎng)成分,甲醇提取物,抗氧化性
黃參是迷果芹屬的迷果芹(Sphallerocarpusracills),主要分布在中國、蒙古、俄羅斯、西伯利亞東部,還有一些遠東地區(qū)[1-2]。在中國,黃參是一種研究比較少的藥食兩用的植物,主要分布在內(nèi)蒙古、黑龍江、青海、甘肅和西藏等高寒地區(qū)。據(jù)歷史記載,黃參主要用于治療風濕、破傷風、潰瘍病等,被稱為“小人參”[2-3]。根作為黃參的可食用部分,富含蛋白質(zhì)、碳水化合物、維生素和微量元素等各種營養(yǎng)成分[4-5]。眾所周知,功能性化學成分的含量受諸多因素的影響,如采收期、基因型、栽培方式、采收前后氣候環(huán)境的變化、儲藏環(huán)境、加工處理方式等。由于黃參特殊的自然生長環(huán)境,有兩個采收期,一個是10月份(T1),一個是次年的4月份(T2),4月份采收的黃參根在土壤中經(jīng)過了一整個冬天,這種特殊的環(huán)境有可能導致黃參營養(yǎng)成分的巨大變化。酚類和黃酮類是植物的次生代謝產(chǎn)物,具有許多生物活性功能,如抗衰老、抗氧化、抑菌等。因此,本實驗主要分析了不同采收期黃參根的功效成分及甲醇提取物的抗氧化性。
黃參根 于2009年10月15日和2010年4月18日采自甘肅山丹軍馬場,經(jīng)清洗后真空冷凍干燥粉碎備用;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)、蘆丁 Sigma公司,色譜純;福林-酚試劑 上海喜瑞化學生物有限公司;鹽酸、3,5-二硝基水楊酸、乙醚、氫氧化鈉、乙醇、石油醚、丙三醇、醋酸鉀、硝酸鋁、五水硫酸銅、硫酸鉀、過硫酸鉀、硫酸亞鐵、濃硫酸 均為分析純;沒食子酸、葡萄糖 均為色譜純。
恒溫水浴鍋 金壇市正基儀器有限公司;Spectrum722型紫外可見分光光度計 上海市精密科技儀器有限公司;KQ-200KDE型超聲波清洗器 昆山市超聲儀器有限公司;RE-52旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)器 上海安亭實驗儀器有限公司;Kjeltec 2300全自動凱氏定氮儀 瑞典福斯公司;全自動氨基酸分析儀 L-8900,日本HITACHI公司;PW2403X-Ray熒光光譜儀 荷蘭帕納科。
1.2.1 測定方法 淀粉含量:GB/T 5514-2008,酸水解法;還原糖含量:5009.7-2008 GB/T,3,5-二硝基水楊酸法;蛋白質(zhì)含量:凱氏定氮法,稱取1g黃參粉,加五水硫酸銅0.7179g,硫酸鉀6.2821g,濃硫酸12mL,420℃硝化1h,同時做空白對照,自然冷卻,在全自動凱氏定氮儀上測定氮含量。
表1 不同采收期黃參營養(yǎng)成分含量Table 1 The nutrients of Sphallerocarpus racills collected at different harvest time
表2 不同采收期黃參礦物質(zhì)含量的測定Table 2 The mineral contents of Sphallerocarpus racills collected at different harvest time
蛋白質(zhì)含量(%)=氮含量×6.25×100%
氨基酸組成分析[6-7]:稱取10g黃參粉,加150mL水,調(diào)pH至9.0~9.5,50℃下30r/min攪拌,沉淀,離心取上清液,提取液加鹽酸調(diào)pH至4.0~4.5,沉淀,離心分離,沉淀即為粗蛋白,稱取100mg粗蛋白,用10mL 6mol/L的鹽酸在110℃氮氣環(huán)境下水解22h,60℃真空蒸干,溶于5mL pH2.2檸檬酸鈉緩沖液中,過濾后用全自動氨基酸分析儀分析;灰分的測定:GB5009.4-2010;酚類含量的測定:GB8313-2008,以沒食子酸做標準曲線,采用福林酚比色法;微量元素含量的測定[8-9]:x光熒光光譜儀法,黃參粉壓片后用x光熒光光譜儀測定;油脂含量的測定[10]:索氏提取法,提取溶劑為石油醚(60~90℃);黃酮含量的測定:GB/T 20574-2006,以蘆丁做標準曲線。
1.2.2 甲醇提取物抗氧化性含量的測定
1.2.2.1 甲醇提取物的制備 稱取10g黃參粉,100mL甲醇分別提取三次(30℃,超聲波功率100%,時間30min),45℃減壓濃縮,定容到50mL,用于測定多酚和黃酮含量及其抗氧化性。
1.2.2.2 對ABTS+自由基的清除實驗[11]將濃度為5mmol/L的ABTS溶液與2.0mmol/L過硫酸鉀溶液混合,25℃避光條件下貯存過夜,制得ABTS+自由基溶液,用水稀釋至734nm處吸光度為0.596±0.02的應用液。將甲醇提取物稀釋100倍,移取3mL該溶液,加入3mL的ABTS+應用液,混合,室溫下避光反應40min,測定其在734nm處的吸光度,計算黃參甲醇提取物對ABTS+清除率。
式中:A樣品—樣品管的吸光值;A對照—對照管的吸光值。
1.2.2.3 對DPPH自由基清除實驗[11-12]準確取1mL黃參提取液置于15mL試管中,加入濃度為0.025mg/mL的DPPH甲醇溶液5mL,搖勻,室溫下避光靜置1h后在515nm下測定溶液的吸光度,然后計算黃參甲醇提取物對DPPH·的清除率。
式中:A樣品—樣品管的吸光度;A對照—對照管的吸光度。
1.2.2.4 對Fe2+絡合能力的測定[13]根據(jù)Singh等的方法,準確量取5mL甲醇提取液和2mmol/L的硫酸亞鐵溶液0.5mL于試管中,混合,再加入5mmol/L的鐵試劑1mL,搖勻,室溫下反應15min,于562nm下測定吸光度,然后計算黃參甲醇提取物對Fe2+絡合能力。
式中:A樣品—樣品管的吸光度;A對照—對照管的吸光度。
不同采收期功效營養(yǎng)成分含量見表1。
由表1可知,在次年4月份采收的黃參比起頭年10月份采收的黃參含有較多的還原糖、蛋白質(zhì)、脂肪、多酚和黃酮,但其淀粉含量顯著降低,灰分基本不變。這表明黃參根在低溫環(huán)境下化學成分發(fā)生了一系列變化,淀粉含量顯著降低,還原糖含量顯著增加,說明淀粉轉(zhuǎn)化成了還原糖。淀粉和還原糖的性質(zhì)不同,這些成分的變化對其營養(yǎng)價值和加工有重要影響。
不同采收期黃參礦物質(zhì)含量見表2。
從表2中可以看出,不同采收期的黃參礦物質(zhì)含量基本不變,鉀含量最豐富,其次為磷、鎂、鈣,再次為鐵,這些都是人體所必需的,最后是其他微量元素,重金屬鉛和汞都未檢出,說明山丹黃參未受重金屬污染,表明黃參是無重金屬污染的綠色食品原料。
不同采收期黃參粗蛋白氨基酸組成分析結(jié)果見表3。
從表3中可以看出,4月份采收的黃參蛋白質(zhì)中氨基酸含量較高,含量最高的是谷氨酸,其次為天冬氨酸,再次是賴氨酸和亮氨酸,兩者中苯丙氨酸含量差別最大。
不同采收期黃參甲醇提取物的抗氧化性見表4。
從表4中可以看出,4月份采收的黃參甲醇提取物的DPPH·清除率、ABTS+·清除率、對Fe2+絡合能力均比10月份的高。
采收期不同,黃參的功效成分不同,甲醇提取物的抗氧化性也顯著不同。實驗數(shù)據(jù)表明,在次年4月份采收的黃參比起頭年10月份采收的黃參還原糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、黃酮、酚類、油脂的含量均有所增加,礦物質(zhì)含量基本不變,但淀粉含量顯著降低,并且甲醇提取物的抗氧化性以及對Fe2+絡合能力也增強。這有助于指導黃參的開發(fā)利用,可以根據(jù)不同加工目的確定黃參的采收期,也可以對不同采收期采收的黃參進行合理的開發(fā)利用。但是,甲醇提取物中起到抗氧化作用的成分,以及不同采收期甲醇提取物中的各種成分的種類和含量差異,還有待進一步研究。
表3 不同采收期黃參粗蛋白氨基酸組成分析Table 3 The amino acid composition of crude protein of Sphallerocarpus racills collected at different harvest time
表4 不同采收期黃參甲醇提取物的抗氧化性Table 4 The methanol extracts oxidation resistance of Sphallerocarpus racills collected at different harvest time
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Nutrient analysis and methanol extracts oxidation resistance of Sphallerocarpus racills collected at different harvest time
HAO Guo,TIAN Cheng-rui*,GAO Chun-yan,ZHOU Rui,GAO Ya-ni,KANG Yu-xin
(College of Food Engineering and Nutritional Science,Shaanxi Normal University,Xi'an 710062,China)
The nutrition and antioxidant of methanol extracts of Sphallerocarpus racills collected at different harvest time were analyzed.The results indicated that,compared the Sphallerocarpus racills collected in October,the starch content of Sphallerocarpus racills harvested in April the next year reduced significantly,sugar,protein,fat,flavonoids,polyphenol content increased to a certain extent,minerals unchanged in basic and methanol extracts oxidation resistance reinforced.
different harvest time;Sphallerocarpus racills;nutrients;methanol extracts;oxidation resistance
TS201.2
A
1002-0306(2012)05-0131-03
2011-05-23 *通訊聯(lián)系人
郝果(1985-),女,在讀碩士,研究方向:食品新資源開發(fā)利用。