張家明，黃 勝，盧 粵，陳意穩(wěn)，楊 蕾

(廣東醫(yī)學(xué)院附屬湛江中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 湛江 524037)

急性細(xì)菌感染是引起白細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞增高的最常見(jiàn)病因，但如感染程度很局限且輕微，WBC總數(shù)仍可正常，只見(jiàn)中性粒細(xì)胞百分率增高，隨著感染逐漸加重，WBC總數(shù)不斷增高，嚴(yán)重時(shí)可高達(dá)20×109/L以上，中性粒細(xì)胞百分率也明顯增高，并伴有明顯的核象左移，出現(xiàn)中毒顆粒、空泡、大小不均等病理性改變[1]。Beckman Coulter LH 750全自動(dòng)血液分析儀采用VCS技術(shù)，可分析NE體積大小、細(xì)胞漿和細(xì)胞核的比例、細(xì)胞漿內(nèi)顆粒的大小及密度。我們檢測(cè)了細(xì)菌感染性疾病患者體積(V)、電導(dǎo)率(C)及激光散射值(S)等參數(shù)及中性粒細(xì)胞百分率和WBC總數(shù)的變化規(guī)律，旨為臨床診斷及有效治療細(xì)菌感染提實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 急性細(xì)菌性感染組：2010年10月至2011年9月在本院收治的根據(jù)臨床表現(xiàn)、血常規(guī)檢查、細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果及其他輔助檢查確診為細(xì)菌性感染患者108例，其中男67例，女41例，年齡16～85歲。96例健康對(duì)照組為本院臨床體檢正常的健康人員，男59例，女37例，年齡18～76歲。兩組人員在年齡、性別等比較，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 使用美國(guó) Beckman Coulter公司生產(chǎn)的LH 750型全自動(dòng)血液分析儀及配套試劑。操作方法：在空腹條件下，取健康組與感染組受試者靜脈血，共2ml，于乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝真空采血管內(nèi)搖勻，在采集后2h內(nèi)完成測(cè)定。對(duì)照組患者治療前空腹抽血1次，開(kāi)始治療后，每隔1d空腹抽血1次進(jìn)行連續(xù)觀察，直至WBC恢復(fù)正常后停止觀察。每個(gè)樣本檢測(cè)后均收集WBC總數(shù)、NE絕對(duì)值及NE的V、C、S值。每d測(cè)試前均做本底及質(zhì)控，檢測(cè)指標(biāo)在控后再進(jìn)行標(biāo)本測(cè)試。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行分析，先對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性分析，如數(shù)據(jù)符合正態(tài)性分布，數(shù)據(jù)以±s表示，兩組間均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌感染組與健康對(duì)照組NE的VCS結(jié)果比較

與健康對(duì)照組比較，細(xì)菌感染患者的WBC總數(shù)、NEV、NDW 顯著增高 (P＜0.01)；NES 顯著降低(P＜0.01)；NEC有所下降，但差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 詳見(jiàn)表1。

表1 感染組與對(duì)照組NE的VCS參數(shù)比較(±s)

表1 感染組與對(duì)照組NE的VCS參數(shù)比較(±s)

與對(duì)照組比較，*P＜0.01。

組別 n WBC NEV NEC NES NDW對(duì)照組感染組96 108 6.0±1.8 11.8±5.6*140.2±5.0 149.9±13.6*148.8±1.4 147.6±1.2 146.6±3.8 141.4±3.5*19.5±1.7 24.6±4.3*

2.2 WBC總數(shù)與NE的VCS參數(shù)結(jié)果關(guān)系分析

將108例細(xì)菌感染患者根據(jù)白細(xì)胞總數(shù)分為3 組，A 組：WBC(4～9.9)×109/L，B 組：WBC(10～15)×109/L，C 組：WBC>15×109/L； 在 A、B、C 3 組中，NEV、NDW值均明顯高于健康對(duì)照組 (P＜0.05，P＜0.01)，且NEV、NDW值隨著WBC總數(shù)的升高而上升；NES 值則比對(duì)照組明顯下降 (P＜0.05，P＜0.01)，并隨著WBC總數(shù)的升高而下降.詳見(jiàn)表2。

表2 三組細(xì)菌性感染患者WBC、NE的VCS與對(duì)照組的比較(±s)

表2 三組細(xì)菌性感染患者WBC、NE的VCS與對(duì)照組的比較(±s)

與對(duì)照組比較，#P＜0.05，##P＜0.01。

組別 n WBC NEV NEC NES NDW對(duì)照組A組B組C組96 33 52 23 6.0±1.8 6.9±2.4 12.5±2.1##21.4±5.8##140.2±5.0 142.9±5.5#150.7±5.9##160.2±6.1##148.8±1.4 147.2±3.0 148.0±2.6 147.7±2.3 146.6±3.8 144.7±3.5#138.9±3.4##132.4±3.9##19.5±1.7 22.6±3.3##24.4±4.4##27.5±3.6##

2.3 中性粒細(xì)胞的百分比與VCS參數(shù)結(jié)果關(guān)系分析。

以中性粒細(xì)胞百分率80%為臨界值將108例細(xì)菌感染患者分為NE≤80%組和NE＞80%組。NE≤80%組的NEV、NDW結(jié)果明顯高于對(duì)照組(P＜0.01)， 但明顯低于 NE＞80%組；NE≤80%組的NES則明顯低于對(duì)照組(P＜0.01)，但明顯高于NE＞80%組。詳見(jiàn)表3。

2.4 細(xì)菌感染組患者治療前、后NE的VCS參數(shù)變化

75例細(xì)菌感染患者經(jīng)抗感染治療后，WBC總數(shù)及NEV、NDW明顯下降，NES明顯上升，與治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見(jiàn)表4。

表3 兩組細(xì)菌感染組患者WBC、NE的VCS與對(duì)照組的比較(±s)

表3 兩組細(xì)菌感染組患者WBC、NE的VCS與對(duì)照組的比較(±s)

與對(duì)照組比較，▲P＜0.01。

組別 n WBC NEV NEC NES NDW對(duì)照組NE≤80%組NE＞80%組96 57 51 6.0±1.8 9.2±5.3▲15.8±4.5▲140.2±5.0 145.6±10.9▲155.0±13.6▲148.8±1.4 148.2±1.3 148.0±1.4 146.6±3.8 139.4±6.6▲133.1±6.2▲19.5±1.7 21.7±2.6▲25.9±5.5▲

表4 細(xì)菌感染組患者治療前、后NE的VCS參數(shù)比較(±s)

表4 細(xì)菌感染組患者治療前、后NE的VCS參數(shù)比較(±s)

*與治療前比較P<0.01，與對(duì)照組比較>0.05；**與對(duì)照組及治療前分別比較均P>0.05

組別 n WBC NEV NEC NES NDW對(duì)照組治療前治療后96 69 69 6.0±1.8 17.8±7.4 7.3±2.2*140.2±5.0 157.6±6.1 141.1±6.3*148.8±1.4 147.9±2.5**148.6±2.0**146.6±3.8 132.5±5.8 146.1±4.3*19.5±1.7 27.1±5.4 19.7±2.0*

3 討論

機(jī)體在細(xì)菌感染后,常引起反應(yīng)性的WBC總數(shù)和NE增多,同時(shí)伴隨的NE核左移和中毒性改變也與疾病的療效和預(yù)后有關(guān)[1]。長(zhǎng)期以來(lái)，血常規(guī)中的WBC和NE作為臨床判斷血液細(xì)菌感染的主要指標(biāo)，但有些細(xì)菌感染患者WBC和NE并不高，以此為依據(jù)診斷可能會(huì)貽誤治療時(shí)機(jī)。目前診斷血液細(xì)菌感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”是細(xì)菌培養(yǎng)，但存在耗時(shí)長(zhǎng)、容易污染、敏感性低等缺點(diǎn)[2]?？梢?jiàn)，為臨床提供客觀、快速、準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)指標(biāo)對(duì)細(xì)菌感染性疾病患者的診斷和對(duì)癥治療尤其重要。

Backman Coulter LH 750型全自動(dòng)血液分析儀采用VCS技術(shù)對(duì)WBC進(jìn)行五項(xiàng)分類，其通過(guò)低頻電流準(zhǔn)確分析白細(xì)胞大小(V)，高頻電流傳導(dǎo)分析細(xì)胞核及核質(zhì)比的特性(C)，激光散射分析細(xì)胞漿內(nèi)顆粒的大小和密度(S)，提供關(guān)于細(xì)胞顆粒性的信息,能很好地區(qū)分顆粒特性不同的白細(xì)胞[2-4]。急性細(xì)菌感染時(shí)，骨髓在炎癥因子刺激下不成熟粒細(xì)胞釋放增加,同時(shí)外周血邊緣池中NE在炎癥介質(zhì)作用下活化，外周血中出現(xiàn)體積及形態(tài)不同的不成熟粒細(xì)胞、活化粒細(xì)胞和成熟粒細(xì)胞，導(dǎo)致細(xì)胞異質(zhì)性增大、NE的體積明顯增大,細(xì)胞的漿核比和光射量明顯減小，細(xì)胞漿內(nèi)復(fù)雜性增強(qiáng),NE的體積、漿核比的分布寬度明顯增大。本資料觀察了108例血液細(xì)菌感染患者的VCS參數(shù)，結(jié)果顯示NEV和NDW明顯增高，NES明顯下降，與對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，與國(guó)內(nèi)相關(guān)報(bào)道結(jié)果基本一致[5，6]，提示NE的VCS參數(shù)能預(yù)示感染。為了區(qū)分不同感染程度患者的VCS參數(shù)變化，本文對(duì)細(xì)菌感染患者WBC總數(shù)及NE的VCS相關(guān)參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)，感染較輕的WBC＜10×109/L組和NE＜80%組患者的NEV及NDW比對(duì)照組明顯增高(P＜0.05，P＜0.01)，且隨著感染程度的加重增高更加顯著。表明NEV、NDW在指示細(xì)菌感染方面比WBC和NE百分率更為敏感，這一點(diǎn)對(duì)早期診斷細(xì)菌感染有重要臨床價(jià)值。NES主要反映NE漿內(nèi)顆粒的大小與密度，雖然NES在感染組和對(duì)照組有差異，但NES并不是一個(gè)靈敏的指標(biāo)。我們觀察到NES在NE出現(xiàn)中毒性顆粒時(shí)可增高，但核左移明顯時(shí)又可降低，由于有個(gè)體差異，機(jī)體對(duì)細(xì)菌感染的反應(yīng)及表現(xiàn)往往不同，只有在骨髓被刺激釋放大量幼稚粒細(xì)胞、外周血出現(xiàn)嚴(yán)重左移時(shí)NES才明顯降低。NEC在各組中變化不明顯，可能與NEC隨細(xì)胞形態(tài)變化改變不明顯有關(guān)。

中性粒細(xì)胞在血液的免疫系統(tǒng)中起著十分重要的作用。目前，中性粒細(xì)胞及其VCS參數(shù)已經(jīng)在正常人群中的調(diào)查與分析[7，8]、細(xì)菌感染診斷[9]及白血病診斷等領(lǐng)域進(jìn)行了研究及應(yīng)用，但在臨床療效中的應(yīng)用報(bào)道相對(duì)較少，為了進(jìn)一步了解感染患者的VCS參數(shù)變化，我們監(jiān)測(cè)了69例各類細(xì)菌感染患者治療前后的WBC總數(shù)和NE的VCS參數(shù)結(jié)果變化，經(jīng)比較分析發(fā)現(xiàn)，治療后隨著感染的好轉(zhuǎn)，NEV、NDW明顯下降，NES明顯上升，與治療前比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，與對(duì)照組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?？梢?jiàn)NE的VCS參數(shù)在細(xì)菌性感染患者的療效觀察中也有一定參考價(jià)值。

綜上所述，中性粒細(xì)胞的VCS定量數(shù)據(jù)來(lái)源于血常規(guī)分析，具有客觀、精確、廉價(jià)、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，具有良好的臨床應(yīng)用前景。細(xì)菌感染可使外周血WBC(包括未升高時(shí))的中性粒細(xì)胞VCS參數(shù)發(fā)生明顯改變，且VCS參數(shù)又能及時(shí)敏感地反映細(xì)菌感染及治療前后血液中白細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變。由此可見(jiàn)，監(jiān)測(cè)中性粒細(xì)胞VCS參數(shù)變化在細(xì)菌感染性疾病的早期診斷及療效觀察中有重要臨床價(jià)值。

[1]熊立凡.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2003:36-49.

[2]李復(fù)銀.Coulter血液分析儀的測(cè)試原理及分類的實(shí)現(xiàn)[J].醫(yī)療設(shè)備信息,2007,22(7):52.

[3]Chaves F,Tierno B,Xu DS,et al.Neutrophil volume distribution width:a new automated hematologic parameter for acute infection[J].Arch Pathol Lab Med,2006,130(3):378-380.

[4]許東升.血細(xì)胞分析儀臨床應(yīng)用進(jìn)展 [J].中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,2008,31(7):747-750.

[5]王 佳,符布清,汪小蓉,等.中性粒細(xì)胞體積分布寬度——一種新的急性細(xì)菌感染實(shí)用臨床指標(biāo)[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2009,24(3):208-210.

[6]郭希超,楊大千,俞研迎,等.白細(xì)胞VCS參數(shù)在血液細(xì)菌感染中的應(yīng)用研究[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2008,31(12):1330-1334.

[7]黃 勝,黃小顏,岑凱怡,等.湛江市區(qū)健康人外周血白細(xì)胞VCS參數(shù)調(diào)查[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2011,29(2):109-112.

[8]周騰堅(jiān).373名教師白細(xì)胞分類特征分析 [J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2009,27(2):167-168.

[9]劉 紅,賈紅英.中性粒細(xì)胞VCS參數(shù)在診斷血液細(xì)菌感染中的應(yīng)用[J].醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)與臨床,2010,21(5):55-57.