李偉冬 賈林 馬軍 方建志 邱嘉華 黃耀星 潘錦瑤

清胰活血湯對急性壞死性胰腺炎并多器官功能不全大鼠腹腔內(nèi)壓的影響

李偉冬 賈林 馬軍 方建志 邱嘉華 黃耀星 潘錦瑤

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為重癥急性胰腺炎(SAP)為腑氣不通、熱毒內(nèi)蘊、血流淤阻所致。治法以理氣通腑和通里攻下、清熱解毒為主。大黃單劑及復(fù)方制劑清胰湯、大承氣湯等對SAP療效已獲公認(rèn)[1-2]。本研究應(yīng)用自擬的清胰活血湯治療急性壞死性胰腺炎(ANP)并多器官功能不全(MODS)大鼠，觀察其對腹腔內(nèi)壓增高的療效，為臨床治療奠定實驗基礎(chǔ)。

一、材料與方法

1．實驗動物分組及中藥組方：健康SD大鼠30只，體重180～200 g，SPF級，購自廣州中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心[許可證：SCXK(粵)2008-0020]。按數(shù)字表法隨機分為ANP組、大承氣湯組和清胰活血湯組，每組10只。采用胰管內(nèi)逆行注射4.5%?；悄懰徕c(Sigma公司)1 ml/kg體重的方法誘導(dǎo)大鼠ANP并MODS模型[3]。大承氣湯組和清胰活血湯組分別在建模前4 h，建模后3、9 h給予大承氣湯、清胰活血湯20 ml/kg體重灌胃；ANP組給予等量生理鹽水灌胃。清胰活血湯由生大黃(后下)、黃連、黃岑、丹參、厚樸、柴胡各15 g熬制而成。大承氣湯由生大黃(12 g后下)、厚樸(15 g)、枳實(12 g)、芒硝(9 g后下)熬制而成。

2．腹腔內(nèi)壓：測壓設(shè)備為BL-420E+生物機能實驗系統(tǒng)(廣州醫(yī)學(xué)院機能實驗室提供)。制模后24 h，大鼠麻醉后采用平臥位，左下腹穿刺，冠脈擴張球囊導(dǎo)管內(nèi)充注生理鹽水，將連接球囊導(dǎo)管的硬膜外導(dǎo)管接頭的另一端連接壓力換能器，利用壓力換能器與生物機能實驗儀，以腋中線為“0”點，大鼠呼氣末時換能器所感受的壓力就是球囊內(nèi)壓和腹內(nèi)壓[4]。

3．腹水量：測壓后處死大鼠，觀察腹水的顏色，用干棉球吸盡腹水，并稱重。腹水量=濕棉球的重量-干棉球的重量。

4．血清淀粉酶、TNF-α檢測：血清淀粉酶采用酶聯(lián)耦合法測定。TNF-α采用ELISA法，試劑盒購自廣州幫能公司。

5．胰腺組織學(xué)檢查：取胰腺組織，行病理學(xué)檢查，由專一病理醫(yī)師閱片，并按照Schmidt等[5]標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評分。

二、結(jié)果

1．大鼠腹水量及腹內(nèi)壓的變化：ANP組大鼠腹水量為(10.10±2.14)g,呈血紅色或暗紅色；大承氣湯組腹水量為(6.75±1.10)g，呈淡黃偏紅色；清胰活血湯組腹水量為(4.73±0.80)g，呈淡黃偏紅色。各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P值均<0.05)。ANP組、大承氣湯組、清胰活血湯組大鼠的腹內(nèi)壓分別為(11.8±1.5)、(6.2±0.9)、(4.11±0.8)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)，各組間差異也有統(tǒng)計學(xué)意義(P值均<0.05)。

2．大鼠血清TNF-α、淀粉酶水平的變化：ANP組、大承氣湯組、清胰活血湯組大鼠血清TNF-α水平分別為(116.19±15.03)、(102.70±6.32)、(84.90±4.81)μg/L；血清淀粉酶水平為(4483±906)、(2491±904)、(1402±325)U/L，各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P值均<0.05)。

3．大鼠胰腺的病理改變：ANP組胰腺病理間質(zhì)廣泛水腫，胰腺腺泡壞死，大量出血及血管周圍大量炎癥細(xì)胞浸潤；大承氣湯組、清胰活血湯組大鼠胰腺的病變均有不同程度的減輕，尤以清胰活血湯組明顯(圖1)。ANP組、大承氣湯組、清胰活血湯組的胰腺病理評分分別為(13.8±0.78)、(8.8±0.6)、(6.1±0.4)分，各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P值均<0.05)。

圖1ANP組(a)、大承氣湯組(b)、清胰活血湯組(c)胰腺病理改變(×200)

討論SAP可出現(xiàn)腹內(nèi)壓增高，且隨著SAP病情的發(fā)展而加重，是SAP嚴(yán)重程度的重要指標(biāo)之一[6]。我們前期研究顯示，ANP大鼠的腹水量于制模后1 h開始增加，并出現(xiàn)明顯胃腸脹氣；3 h后腹內(nèi)壓進(jìn)行性升高，24 h時達(dá)到峰值。因6 h時點為炎癥介質(zhì)反應(yīng)高峰，表明ANP大鼠進(jìn)行性腹內(nèi)高壓是炎癥反應(yīng)的后續(xù)效應(yīng)[6]。因此，及時有效干預(yù)炎癥反應(yīng)可抑制腹內(nèi)壓進(jìn)行性增高。TNF-α在所有炎癥介質(zhì)中處于始動地位，成為抗炎癥介質(zhì)的重要靶點。

中西醫(yī)結(jié)合治療在SAP的抗炎、胃腸功能調(diào)理和改善微循環(huán)等領(lǐng)域取得重大進(jìn)展，大黃單劑及清胰湯、大承氣湯等復(fù)方制劑亦在臨床較廣泛。本研究配置的清胰活血湯，除生大黃外，保留了清胰湯的柴胡(具有降低炎癥因子釋放、減少白細(xì)胞游走和改善微血管通透性的作用)、黃岑(雙重調(diào)節(jié)平滑肌)、黃連(抗菌抗炎)以及大承氣湯的厚樸等有效成分，還添加了丹參(擴張外周血管，改善胰腺微循環(huán)，并能抗凝血和抑制血小板凝聚，防治缺血后的再灌注損傷和強力消除自由基，對腸黏膜屏障功能也具有較好的保護(hù)作用[7])，旨在從抑制胰酶和炎癥因子釋放、改善胃腸功能和胰腺微循環(huán)等多靶點全方位治療SAP。本結(jié)果顯示，清胰活血湯確在降低炎癥介質(zhì)TNF-α和血清淀粉酶水平、減少腹腔滲出和降低腹腔內(nèi)壓、顯著改善胰腺病理損害等方面均明顯優(yōu)于大承氣湯。究其效果一方面與柴胡、黃岑和黃連具有廣譜抗菌消炎，鎮(zhèn)痛退熱，抑制TNF-α釋放和減輕炎癥有關(guān)；另一方面與丹參和生大黃配伍促進(jìn)排出腸內(nèi)毒素和積氣積液，減輕胰腺及其他臟器水腫，緩解IAP增高以及改善胰腺微循環(huán)，減輕再灌注造成的“二次損傷”等機制密切相關(guān)。

[1] Zhang MJ, Zhang GL, Yuan WB, et al. Treatment of abdominal compartment syndrome in severe acute pancreatitis patients with traditional Chinese medicine. World J Gastroenterol, 2008,14:3574-3578.

[2] Deng LH, Xiang DK, Xue P, et al. Effects of Chai-Qin-Cheng-Qi Decoction on cefotaxime in rats with acute necrotizing pancreatitis. World J Gastroenterol, 2009,15:4439-4443.

[3] 邱嘉華,陳奕金,賈林,等. ?；悄懰徕c誘導(dǎo)急性壞死性胰腺炎大鼠模型的理想濃度. 中華胰腺病雜志, 2010,10:120-122.

[4] 賈林,陳奕金,黃耀星,等. 重癥急性胰腺炎大鼠模型腹腔內(nèi)壓和血TNF-α的時相改變及規(guī)律. 中華胰腺病雜志，2010,10:106-108.

[5] Schmidt J,Rattner DW,Lewandrowski K,et al.A better model of acute pancreatitis for evaluating therapy.Ann Surg,1992,215:44-56．

[6] Rosas JM,Soto SN,Aracil JS,et al.Intra-abdominal pressure as a marker of severity in acute pancreatitis.Surgery,2007,141:173-178.

[7] Xiping Z, Yan P, Xinmei H, et al. Effects of dexamethasone and Salvia miltiorrhizae on the small intestine and immune organs of rats with severe acute pancreatitis. Inflammation, 2010,33:259-266.

10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2012.02.019

廣東省中醫(yī)藥局科研課題(008006)、廣州市中西醫(yī)結(jié)合科研課題(2008A02)

510180 廣州，廣州醫(yī)學(xué)院附屬廣州市第一人民醫(yī)院消化內(nèi)科(李偉冬、賈林、邱嘉華、黃耀星)，中醫(yī)科(馬軍、方建志、潘錦瑤)

賈林，Email:jialin@medmail.com.cn

2011-02-23)

(本文編輯：屠振興)