盤國雄 謝中興 李淑英

MB病毒滅活新鮮冰凍血漿中部分有效成分的探討

盤國雄 謝中興 李淑英

目的探討經(jīng)過病毒滅活的新鮮冰凍血漿中部分有效成分的質(zhì)量變化。方法采集50袋新鮮血漿，分成A、B兩組，分別對其進(jìn)行檢測，內(nèi)容包括PT，TT，APTT，F(xiàn)g，TP、ALB及凝血因子FⅧ、FⅤ。結(jié)果病毒滅活冰凍血漿中的TP、凝血因子FⅧ、FⅤ和Fg等的含量均有不同程度的降低。但大都在30%以內(nèi)，在可接受的范圍內(nèi)。結(jié)論采用MB光化學(xué)法病毒滅活血漿不影響臨床應(yīng)用，其利大于弊。

病毒滅活冰凍血漿;凝血因子;因子活性;血漿蛋白

新鮮冰凍血漿內(nèi)含有各種凝血因子及各種血漿蛋白，由于血漿及其制品的病毒檢測方法有一定的局限性及病毒“窗口期”的存在，新鮮冰凍血漿和全血一樣，具有傳播艾滋病、乙型肝炎等輸血傳播疾病的危險(xiǎn)［1］，因此輸血的危險(xiǎn)性依然存在。為使廣大患者能更安全有效地使用血漿，我?guī)堁緦ρ獫{開展了亞甲藍(lán)(MB)光化學(xué)法病毒滅活項(xiàng)目。MB光化學(xué)法病毒滅活技術(shù)應(yīng)用于血漿病毒的滅活，其有效性和安全性已被證實(shí)，但MB光化學(xué)法病毒滅活的過程對新鮮血漿中的凝血因子及血漿蛋白等有效成分的質(zhì)量會產(chǎn)生怎樣的變化，仍有待確認(rèn)。為此我們通過實(shí)驗(yàn)檢測血漿中的部分有效成份的變化并作一分析探討。

1 材料與方法

1.1 樣本來源隨機(jī)抽取50份常規(guī)血液，按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程制備新鮮血漿。每人份一分為二，分兩組，A組為不滅活病毒新鮮血漿，立即進(jìn)行檢測。另一組為B組，進(jìn)行MB光化學(xué)法病毒滅活后的新鮮冰凍血漿從采集到制備完畢6 h內(nèi)進(jìn)行檢測。

1.2 材料一次性無菌試管，德國BE-1500自動血凝分析儀，CL-800生化分析儀。嚴(yán)格按照儀器與試劑操作說明的要求進(jìn)行檢測。

1.3 資料①PT(凝血酶原時(shí)間)用于外源性凝血因子(Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ、Ⅰ)凝血功能的篩查。②APTT(活性部分凝血酶原時(shí)間)用于檢測內(nèi)源性凝血因子(Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ)凝血功能。③TT(凝血酶時(shí)間)，快速評定止血和血栓形成的有效方法。④Fg(纖維蛋白原)。檢測PT，TT，APTT，F(xiàn)g能間接反映血漿中的因子活性水平。

血漿蛋白的測定;①TP(總蛋白)。②ALB(白蛋白)

1.4 方法A組為新鮮冰凍血漿，不滅活直接進(jìn)行測定，B組為滅活冰凍血漿，先對其進(jìn)行MB(亞甲藍(lán))光化學(xué)病毒滅活后再測定。在血漿進(jìn)行病毒滅活后進(jìn)行熱封口時(shí)留樣檢驗(yàn)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 16.0作t檢驗(yàn)分析。

2 結(jié)果

2.1 兩種血漿實(shí)驗(yàn)測定結(jié)果(見表1)。

表1 兩種血漿各指標(biāo)均值的實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果

2.2 各項(xiàng)指標(biāo)的統(tǒng)計(jì)結(jié)果比較(見表2，3)。

表2 MB滅活血漿各項(xiàng)指標(biāo)與正常范圍比較的可信區(qū)間

表3 新鮮冰凍血漿與MB滅活新鮮冰凍血漿各項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果的比較()

表3 新鮮冰凍血漿與MB滅活新鮮冰凍血漿各項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果的比較()

比較指標(biāo)PTTTAPTTFgTPALBFⅤFⅧ對照組13.20±2.7913.40±2.6938.81±2.912.60±0.4070.02±5.9344.22±3.6298.40±10.30 108.20±7.05 MB組15.20±2.2416.60±1.9152.12±3.641.51±0.2363.60±5.8040.11±2.3968.90±4.3577.80±4.95 t值－12.76－10.60－22.1915.9428.8112.3319.0924.35 P值＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05

2.3 表1 結(jié)果顯示，經(jīng)MB病毒滅活處理后的血漿其Fg含量及PT、TT、APTT的活性均有不同程度下降，尤其是凝血因子FⅧ和FⅤ，其活性成份分別降低了28.1%和29.9%，導(dǎo)致APTT和PT的凝血時(shí)間延長。TP和ALB的含量也有所減少，但仍在國家標(biāo)準(zhǔn)允許的范圍內(nèi)。

2.3.1 經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，可認(rèn)為MB病毒滅活血漿中TP、ALB、FV、FⅧ的均值仍落在國家標(biāo)準(zhǔn)允許的范圍內(nèi)(均差的95%可信區(qū)間范圍內(nèi)包含0)，說明經(jīng)MB病毒滅活后這些活性成分雖然有損失但仍可接受。而PT、TT、APTT、Fg已經(jīng)偏離正常范圍內(nèi)(均差的95%可信區(qū)間范圍內(nèi)不包含0)，表示這些指標(biāo)經(jīng)MB病毒滅活后受影響較大(見表2)。

2.3.2 新鮮冰凍血漿與MB病毒滅活血漿比較(見表3)，各指標(biāo)均存在差異(P均＜0.05)，兩種處理方法得出的各指標(biāo)的水平不同。

3 討論

MB光化學(xué)法病毒滅活血漿中的PT、TT、APTT凝血時(shí)間延長，凝血因子及血漿蛋白含量偏低的原因是血漿在進(jìn)行MB光化學(xué)法病毒滅活技術(shù)處理的過程中吸附、過濾導(dǎo)致了部分凝血因子和血漿蛋白的損失，同時(shí)也會對凝血因子的活性成分造成損傷，導(dǎo)致凝血時(shí)間的延長，從而影響血漿的應(yīng)用效果。尤其是因子FⅧ和FⅤ，雖然其檢測結(jié)果仍然符合國家標(biāo)準(zhǔn)，但對比新鮮冰凍血漿而言其活性降低較顯著，這說明凝血因子FⅤ和FⅧ不穩(wěn)定，在離體后進(jìn)行的病毒滅活技術(shù)處理過程中容易受時(shí)間、溫度等諸多因素的影響。相關(guān)專家［2］亦證實(shí)血漿經(jīng)MB法滅活后因子FⅤ和FⅧ的活性顯著降低。而血漿中的TP、ALB、Fg等含量也有不同程度的下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與肖澤斌［3］的研究結(jié)果大體一致。雖然血漿在進(jìn)行MB病毒滅活處理的過程中被吸附或?yàn)V掉部分血漿蛋白，但其含量受損較少，仍然符合國家標(biāo)準(zhǔn)，大都在30%以內(nèi)，對臨床療效影響不大，在可接受的范圍之內(nèi)［4］。

由此可見，MB光化學(xué)法病毒滅活技術(shù)會對新鮮血漿(FFP)中的APTT、PT、TT、及Fg產(chǎn)生一定程度的影響，對凝血因子FⅤ和FⅧ的影響也較大，而對TP和ALB成分的削減不大。相對于輸注新鮮血漿而引起的各種輸血風(fēng)險(xiǎn)而言使用MB病毒滅活血漿利大于弊值得臨床推廣應(yīng)用。

［1］Abdel-wahaboI，Healy B，Dzik WH.Effect of fresh-frozen plasma transfusion on prothrombin time and bleeding in patients with mild coagulation abnormalities．Tr-ansfusion，2006，46(8):1279-1285．

［2］于建華，孫庶麗，王明靜，等.病毒滅活血漿中有效成分及亞甲藍(lán)殘留量的研究.中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2010，20(6):1541．

［3］肖澤斌.亞甲藍(lán)光化學(xué)病毒滅活法對血漿質(zhì)量指標(biāo)的影響.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，31(4):390-391．

［4］魏延民，王憬惺.新鮮冰凍血漿的臨床應(yīng)用及其安全性研究進(jìn)展．中國輸血雜志，2007，20(5):432-434．

The discussion of virus inactivated frozen plasma and fresh frozen plasma part of effective ingredients of quality changes

PAN Guo-xiong，XIE Zhong-xing，LI Shu-ying．Clinical Laboratory，Guangdong Zhaoqing second Poeple’s Hospital，Zhaoqing 526060，China

ObjectiveTo explore virus inactivated frozen plasma and fresh frozen plasma part of effective ingredients of quality changes.MethodsTo gather 50 bags fresh plasma，A and B is divided into two groups，detected PT，TT，APTT，F(xiàn)g，TP，ALB，F(xiàn)Ⅷ，F(xiàn)Ⅴrespectively.ResultsThe content of TP，F(xiàn)Ⅷ，F(xiàn)Ⅴand Fg in virus inactivated frozen plasma with a certain degree of reduced，but mostly within 30%，in the acceptable range.ConclusionThe MB virus inactivated plasma did not influence the clinical application，it did More good than harm．

Virus inactivated frozen plasma;Clotting factor;Factor activity;Plasma protein

526060廣東省肇慶市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科