肖春妹，王榮福

（1.泉州師范學(xué)院，福建 泉州 362011；2.中國(guó)石油四川石化有限責(zé)任公司，四川 成都 611930）

熒光光度法測(cè)定啤酒中的甲醛

肖春妹1，王榮福2

（1.泉州師范學(xué)院，福建 泉州 362011；2.中國(guó)石油四川石化有限責(zé)任公司，四川 成都 611930）

考察了乙酸銨、乙酰丙酮的濃度、pH值等因素對(duì)甲醛與乙酰丙酮及乙酸銨特性反應(yīng)的影響，得到最佳反應(yīng)條件.在此基礎(chǔ)上建立了熒光光度法測(cè)定啤酒中的甲醛含量新方法，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：該方法具分析時(shí)間短、精密度和回收率高，可用于啤酒中痕量甲醛的分析.

甲醛；熒光光度法；啤酒

在傳統(tǒng)的啤酒生產(chǎn)過程中，糖化時(shí)加入適量甲醛可有效地減少麥汁中多酚和花色苷含量，使啤酒非生物穩(wěn)定性大為改善，并增加了啤酒的透明度和穩(wěn)定性，而且也使麥汁及啤酒的還原性下降,提高啤酒的保質(zhì)期[1]，故成品啤酒中存在著少量甲醛.由于啤酒行業(yè)的競(jìng)爭(zhēng)過于激烈，某些廠家為了增加啤酒的感觀等，在制作過程中也加入少量甲醛，可能導(dǎo)致甲醛殘留超出國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)限制.因此，檢測(cè)啤酒中甲醛的含量一直是啤酒行業(yè)乃至社會(huì)都非常關(guān)注的問題.本文根據(jù)甲醛與乙酰丙酮反應(yīng)產(chǎn)生的黃色物質(zhì)在激發(fā)下可發(fā)射熒光的性質(zhì)來測(cè)定啤酒中甲醛的含量[2].

1 實(shí)驗(yàn)方法

1.1 主要儀器

熒光光度計(jì)，Cary/Eclipse，東南化學(xué)儀器有限公司；數(shù)字酸度計(jì)，pHS-3C，杭州東星儀器設(shè)備廠.

1.2 主要實(shí)驗(yàn)藥品

甲醛，上海聯(lián)試化工試劑有限公司；乙酰丙酮，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；檸檬酸銨，天津基準(zhǔn)化學(xué)試劑有限公司；乙酸銨，上海試劑四廠；鉬酸銨，上海試劑四廠；冰乙酸，上海聯(lián)試化工試劑有限公司；乙醛，上海試劑一廠，等試劑.

1.3 溶液的配置

1.3.1 碘量法標(biāo)定HCHO所需的溶液的配置，參考文獻(xiàn)[3].

1.3.2 熒光光度法測(cè)定HCHO的濃度所需的溶液的配置

銨鹽的配置 [NH4+]=0.5mol/L鉬酸銨溶液50mL;[NH4+]=6mol/L檸檬酸銨溶液 50mL；[NH4+]=6mol/L乙酸銨溶液250mL，按常規(guī)方法以相應(yīng)的鹽和二次蒸餾水溶解配制.

2.0 ug/mLHCHO標(biāo)準(zhǔn)溶液250mL:取已經(jīng)標(biāo)定的HCHO標(biāo)準(zhǔn)溶液（1.706g/L）0.29mL準(zhǔn)確釋成250mL.

0.05 mol/L的乙酰丙酮(現(xiàn)配現(xiàn)用)100mL:移取密度為0.972-0.974g/mL的乙酰丙酮0.52mL，用100mL容量瓶定容.

1：4乙酸水溶液（體積比）：移取10mL乙酸稀釋成50mL.

濃度是HCHO的10倍的乙醛溶液：取0.1mL乙醛（40.0%）準(zhǔn)確稀釋成25mL；再取其中的2.9mL稀釋成250mL溶液.

1.4 啤酒樣品的提取

取瓶裝啤酒一瓶，放置冰箱中，冰至10-15℃，取出，開蓋后快速過濾到燒杯中，除去啤酒中的CO2.準(zhǔn)確移取過濾后的啤酒試樣100mL于250mL圓底燒瓶中，加25mL蒸餾水，幾粒沸石.用普通蒸餾裝置緩緩蒸餾，用100mL容量瓶接收（外加冰水?。┘s95mL，取下容量瓶，放置至室溫，用蒸餾水定容至刻度.則該樣品中的HCHO含量就是啤酒中的HCHO含量.

2 結(jié)果與討論

2.1 熒光最佳激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)的確定

乙酰丙酮和甲醛在乙酸銨—乙酸體系中與NH4+反應(yīng)生成的黃色產(chǎn)物具有熒光性質(zhì)，其激發(fā)光譜和發(fā)射光譜見圖1，由圖可以看出最佳激發(fā)波長(zhǎng)為424nm，最佳發(fā)射波長(zhǎng)為515nm.因此，本實(shí)驗(yàn)采用激發(fā)光譜波長(zhǎng)為424nm，發(fā)射光譜波長(zhǎng)為515nm.

2.2 銨鹽的確定

鉬酸銨、檸檬酸銨和乙酸銨這三種銨鹽都能跟乙酰丙酮、甲醛反應(yīng)，都能較快生成黃色物質(zhì).實(shí)驗(yàn)表明，鉬酸銨溶解度很小，且隨pH值降低,反應(yīng)體系中就會(huì)有鉬藍(lán)生成,干擾產(chǎn)物的顏色，因此不宜選擇鉬酸銨；檸檬酸銨在濃度較高時(shí)也有干擾峰出現(xiàn),因此不宜選擇檸檬酸銨.乙酸銨的溶解度大，[NH4+]可達(dá)6mol/L，且乙酸與乙酸銨能形成緩沖體系,保證了pH值穩(wěn)定，從而使體系穩(wěn)定.從圖2可以看出，隨乙酸銨加入的量的增加，產(chǎn)物的熒光強(qiáng)度也隨著增大，在5.0mL以上的乙酸銨時(shí)，熒光強(qiáng)度維持恒定，因此實(shí)驗(yàn)中乙酸銨的最佳加入量是5.0mL.

2.3 乙酰丙酮濃度對(duì)If值的影響

在424nm激發(fā)波長(zhǎng)下，固定HCHO、乙酸銨，改變乙酰丙酮的加入量，測(cè)定其熒光強(qiáng)度，從圖3可以看出，隨著乙酰丙酮的加入量的增加，熒光強(qiáng)度最終趨于穩(wěn)定.

2.4 體系pH值對(duì)熒光強(qiáng)度的影響

在424nm激發(fā)波長(zhǎng)下，固定HCHO、乙酸銨、乙酰丙酮，改變乙酸加入量.測(cè)定體系的不同pH值和熒光強(qiáng)度值，從圖4可看出，隨著pH值的增加，熒光強(qiáng)度先增加，然后降低，在pH=6.0時(shí), 熒光強(qiáng)度值最大.

2.5 啤酒樣品的測(cè)定

2.5.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系

在以上最佳的實(shí)驗(yàn)條件下，測(cè)定一系列不同HCHO濃度(Y)的體系的熒光強(qiáng)度值(X)，得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線Y=0.11503X-0.31715，r=0.999，表明有良好的線性關(guān)系.

2.5.2 精密度得測(cè)定

對(duì)5個(gè)不同品牌的啤酒樣品分別重復(fù)測(cè)定5次，測(cè)得RSD為0.23～3.20%，表明有良好得精密度.

2.5.3 回收率的測(cè)定

往已測(cè)定的啤酒中加入已知濃度的HCHO，測(cè)定其回收率，結(jié)果如表1所示，其平均回收率為99.0%.

表1 回收率的測(cè)定

3 結(jié)論

考察了乙酸銨的濃度、乙酰丙酮的濃度和體系的溫度、pH值等因素對(duì)甲醛測(cè)定的影響，確定了體系反應(yīng)的最佳條件.在該條件下，建立了啤酒中甲醛得測(cè)定方法，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該方法具有分析時(shí)間短，精密度和收回率高，可用于啤酒中痕量甲醛的分析.

〔1〕管敦儀.啤酒工業(yè)手冊(cè)[M].北京：輕工業(yè)出版社,1985.7，10-11.

〔2〕羅斌.啤酒中甲醛殘留測(cè)定方法之探討[J].江西化工,2002（4）.

〔3〕華中師范大學(xué),東北師范大學(xué)，等.分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)[M].北京：高等教育出版社,2001.96-100.

TS262.5

A

1673-260X（2012）06-0108-02