胡有東，李 俠，徐培敬，陳 穎

（徐州醫(yī)學(xué)院附屬淮安醫(yī)院老年病科，江蘇淮安223002）

血清NF－κB和p53在急性冠脈綜合征中表達的研究

胡有東，李 俠，徐培敬，陳 穎

（徐州醫(yī)學(xué)院附屬淮安醫(yī)院老年病科，江蘇淮安223002）

目的探討核因子κB（NF－κB）和抑癌基因p53在急性冠脈綜合征（ACS）發(fā)生、發(fā)展中的意義。方法采用酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測ACS患者72例和健康對照組65例血清中NF－κB和p53的表達水平。結(jié)果與對照組比較，實驗組NF－κB和p53均升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論NF－κB和p53可能參與ACS的發(fā)生、發(fā)展。

NF－κB；抑癌基因p53；冠狀動脈疾病

急性冠脈綜合征（ACS）是心臟性猝死的最主要病因，由于ACS基本病理為動脈粥樣硬化，近期研究表明mimecan基因在動脈粥樣硬化病變中發(fā)揮著重要作用［1］，而在mimecan基因的第1個內(nèi)含子上有NF－κB和p53的結(jié)合位點，因此研究NF－κB和p53在動脈粥樣硬化病變中的作用有著重要的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2010年7月至2011年11月，淮安市第二人民醫(yī)院老年科ACS患者共72例，其中男37例，女35例；年齡60～75歲，平均（66.31±6.58）歲。同期健康體檢者65例作為對照組，其中男33例，女32例；年齡60～73歲，平均（65.14±7.01）歲。兩組間在年齡、性別方面比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

所有ACS患者均符合的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］，將ACS患者再分成不穩(wěn)定心絞痛（UA）組，26例，其中男14例，女12例；年齡65～73歲，平均（64.23±6.20）歲。ST段抬高性心肌梗死（STEMI）組，24例，其中男12例；女12例，年齡60～75歲，平均（64.47±5.21）歲。非ST段抬高性心肌梗死（NSTEMI）組，22例，其中男11，女11例；年齡63～75歲，平均（65.24±5.82）歲。各組間年齡、性別差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 方法 NF－κB和p53的測定采用酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測（美國BIO－RAD伯樂酶標(biāo)儀），試劑盒購自Diagnostic Systems Laboratories INC公司，操作嚴格按照說明書進行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行分析，計量資料以±s表示，兩組之間的定量資料采用t檢驗，多組之間比較采用單因素方差分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 NF－κB和p53在ACS組和對照組中的表達 ACS組NF－κB和p53明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 NF－κB和p53在ACS和對照組中的表達（±s，ng／mL）

表1 NF－κB和p53在ACS和對照組中的表達（±s，ng／mL）

＊:P＜0.05，與對照組比較。

組別 n NF－κB p53對照組65 17.53±3.81 1.73±1.01 ACS組 72 24.81±4.38＊ 2.57±1.72＊

2.2 NF－κB和p53在 ACS不同亞組的表達 NF－κB和 p53在ACS各亞組中的表達無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表2。

2.3 NF－κB和p53在ACS中的相關(guān)性 在ACS中NF－κB和p53呈正相關(guān)（r＝0.76，P＜0.05），提示兩者在 ACS中可能通過共同作用于mimecan基因的第1個內(nèi)含子而起到相互促進的作用。

表2 NF－κB和p53在ACS各亞組中的表達（±s，ng／mL）

表2 NF－κB和p53在ACS各亞組中的表達（±s，ng／mL）

組別 n NF－κB p53 UA組26 23.72±3.35 2.54±1.43 STEMI組 24 25.06±6.60 2.61±1.62 NSTEMI組22 25.12±5.27 2.59±1.80

3 討 論

ACS的病理生理學(xué)基礎(chǔ)為在冠狀動脈粥樣硬化的基礎(chǔ)上發(fā)生斑塊破裂或糜爛、潰瘍，并發(fā)血栓形成、血管收縮、微血管栓塞等導(dǎo)致急性或亞急性心肌供氧減少。有研究證實，NF－κB、p53在動脈粥樣硬化中起著重要作用，但是均未闡述NF－κB、p53二者在動脈粥樣硬化斑塊中的相互作用［3－4］。本研究發(fā)現(xiàn)，NF－κB、p53兩者呈正相關(guān)（r＝0.76，P＜0.05），在之前的基礎(chǔ)研究中發(fā)現(xiàn)，NF－κB、p53競爭性抑制它們下游的共同作用因子，如組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶（P300／CBP）來發(fā)揮其生理作用，因此p53的存在限制了 NF－κB 的活性［5－6］。由于 NF－κB 是動脈粥樣硬化斑塊的啟動因子［7］，但是當(dāng)有某些誘因誘發(fā)血管內(nèi)皮破潰等動脈粥樣硬化斑塊形成的因素存在時，NF－κB將被激活，主要是通過降解其抑制亞單位核因子κB抑制蛋白（IKB）來實現(xiàn)的。各種危險因子（高脂血癥、高血糖、糖尿病、感染源等）通過細胞膜激活I(lǐng)KB激酶，使IKB磷酸化，然后與多個泛素結(jié)合，進而由蛋白激酶降解NF－κB游離于細胞質(zhì)中，細胞質(zhì)中的NF－κB易位至細胞核，與DNA分子炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白minecan基因中的NF－κB結(jié)合點相結(jié)合，調(diào)控各種炎癥因子如腫瘤壞死因子（TNF）、干擾素（IFN）、白細胞介素－1（IL－1）、白細胞介素－6（IL－6）、血管細胞黏附分子－1（VCAM－1）、細胞間黏附分子（ICAM－1）、E－選擇素、趨化因子（MCP－1）等。這些細胞炎癥因子通過各種相同或不同的信號通路來促進動脈粥樣硬化斑塊的發(fā)生、發(fā)展。

p53抑癌基因是目前惟一研究較明確的、定位于細胞核內(nèi)的抑制細胞增殖的抑癌基因，在生理情況下p53通過競爭性結(jié)合與NF－κB共同作用的下游分子，發(fā)揮其抑制動脈血管平滑肌細胞、巨噬細胞等過度分裂［8－9］。在生理情況下 NF－κB、p53處在一種動態(tài)平衡，但是當(dāng)動脈內(nèi)皮損傷或其他動脈粥樣硬化斑塊形成的危險因素出現(xiàn)時，這種平衡將被打破，p53限制NF－κB的能力相對弱于NF－κB促進動脈粥樣硬化斑塊形成等能力。在動脈粥樣動脈硬化形成的開始階段，由于NF－κB為促進動脈粥樣硬化的形成而迅速增多或競爭它們共同的下游作用分子能力增強［10］，因此臨床檢測出NF－κB量較對照組明顯升高；而p53為競爭性結(jié)合它們共同的下游分子而代償性升高，與本研究相一致；且NF－κB、p53在ACS組中的表達呈正相關(guān)，這也間接表明二者之間存在動態(tài)平衡關(guān)系。但是在ACS各亞組的研究中發(fā)現(xiàn)，3組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），這從側(cè)面反映 ACS的發(fā)病機制相同，因此 NF－κB、p53可能作為治療ACS的兩個靶點，通過限制NF－κB的活性和提高p53量及活性，為ACS的治療提供新的策略。

目前，雖然對動脈粥樣硬化斑塊形成的機制研究較多，但對其形成確切機制仍不是很清楚，本研究從一個側(cè)面表明NF－κB和p53可能在動脈粥樣硬化斑塊的形成中起著重要作用，為研究動脈硬化粥樣斑塊形成機制提供一個新的思路；另外也從一個側(cè)面證實了ACS的三者之間有著共同的病理生理基礎(chǔ)。

［1］Tasheva ES，Koester A，Pau Lsen AQ，et al.Mimecan／osteoglycind ef icientmice have collagen fibril abnorm alities［J］.Mol Vis，2002，8（10）:407－415.

［2］王吉耀.內(nèi)科學(xué)［M］.2版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2010:294－315.

［3］Wang Q，Wu PC，Roberson RS.Survivin and escaping in therapy－induced cellular senescence［J］.Int J Cancer，2011，128（7）:1546－1558.

［4］Jiang DJ，Cao Y，Xin HY，et al.Asymmetric dimethylarginine induces tissue factor expression in monocytes via NF－kappaB－dependent pathway:Role in acute coronary syndromes［J］.Atherosclerosis，2009，205（2）:554－560.

［5］Lee MH，Han DW，Hyon SH，et.al.Apoptosis of human fibrosarcoma HT－1080cells by epigallocatechin－3－O－gallate via induction of p53and caspases as well as suppression of Bcl－2and phosphorylated nuclear factor－kappaB［J］.Apoptosis，2011，16（1）:75－85.

［6］Salminen A，Kaarniranta K.Control of p53and NF－kappaB signaling by WIP1and MIF:role in cellular senescence and organismal aging［J］.Cell Signal，2011，23（5）:747－752.

［7］Wilkins R，Tucci M，Benghuzzi H.Role of plant－derived antioxidants on NF－κB expression in LPS－stimulated macrophages－biomed 2011［J］.Biomed Sci Instrum，2011，47:222－227.

［8］Boesten LS，Zadelaar AS，van Nieuwkoopa A，et al.Macrophage p53controls macrophage death in atherosclerotic lesions of Apolipoprotein Edeficient mice［J］.Atherosclerosis，2009，207（2）:399－404.

［9］Zhu BS，Xing CG，Lin F.Blocking NF－kappaB nuclear translocation leads to p53－related autophagy activation and cell apoptosis［J］.World J Gastroenterol，2011，17（4）:478－487

［10］Tergaonkar V.p53and NF－κB:fresh breath in the cross talk［J］.Cell Res，2009，19（12）:1313－1315.

10.3969／j.issn.1671－8348.2012.34.029

B

1671－8348（2012）34－3643－02

2012－06－13

2012－09－12）