簡淑娟 陳霞飛 林暖丹

（惠州市食品藥品檢驗所，廣東 惠州 516001）

人工牛黃甲硝唑膠囊為復(fù)方制劑，其組份為：每粒含甲硝唑200mg，人工牛黃5mg；載于《國家藥品標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)第三冊》[1]。人工牛黃甲硝唑膠囊是臨床常用的一種抗厭氧菌藥，主要用于急性智齒冠周炎、局部牙槽膿腫、牙髓炎尖周炎等的治療[2]?，F(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中未對溶出度進行檢查，為了更好地監(jiān)控藥品質(zhì)量，本文采用紫外分光光度法對人工牛黃甲硝唑膠囊中甲硝唑的溶出度測定方法進行考察[3,4]。

1 儀器與試藥

ZRS-8G智能溶出試驗儀（天津大學(xué)精密儀器廠）；UV-2501PC分光光度計（島津公司）；XS105DU電子天平（梅特勒-托利多公司）：甲硝唑?qū)φ掌罚ㄖ袊幤飞镏破窓z定所；批號：100191-200305）；人工牛黃甲硝唑膠囊（A廠：廣東華衛(wèi)藥業(yè)有限公司，批號：20100601；B廠：秦皇島百慧制藥廠，批號：100701；C廠：吉林雙藥藥業(yè)集團有限公司，批號：20110306；D廠：陜西愛民藥業(yè)股份有限公司，批號：20100305）；鹽酸（分析純），純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶出介質(zhì)的選擇

甲硝唑在水中微溶，故本法擬采用轉(zhuǎn)速每分鐘為75轉(zhuǎn)，分別以水，0.01mol/L HCl和0.1mol/L HCl900mL為溶出介質(zhì)，于20min時取樣5mL，濾過，取續(xù)濾液3mL置50mL量瓶中，用溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，在277nm處測定其吸光度。溶出結(jié)果分別見表1。

表1 溶出介質(zhì)的選擇

上述測定數(shù)據(jù)表明在溶出介質(zhì)為水時甲硝唑的溶出量小，僅有30%多；當(dāng)介質(zhì)為0.01mol/L鹽酸溶液時其溶出量上升為80%以上；當(dāng)介質(zhì)為0.1mol/L的鹽酸溶液時甲硝唑的溶出量達到了90%以上。故選擇0.1mol/L的鹽酸溶液為溶出介質(zhì)。

2.2 轉(zhuǎn)速的選擇

采用0.1mol/L的鹽酸溶液900mL為溶出介質(zhì)，采用了50轉(zhuǎn)，75轉(zhuǎn)和100轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速，于20min時分別取樣5mL，濾過，取續(xù)濾液3mL，置50mL量瓶中，用溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，在277nm處測定其吸光度。結(jié)果見表2。

表2 轉(zhuǎn)速的選擇

由表2可知，在75r/min時甲硝唑的溶出量在20min時趨于平衡，所以選擇75r/min為其溶出轉(zhuǎn)速。

2.3 取樣時間及限度

由本品溶出曲線顯示20min時，甲硝唑的溶出量達到了95%以上，按照藥典要求，綜合考慮后確定取樣時間為20min，限度為標(biāo)示量的75%。

2.4 溶出曲線

取本品，照溶出度測定法（《中國藥典》2010年版二部附錄ⅩC第一法），以0.1mol/L的鹽酸溶液900mL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為75r/min，依法操作，經(jīng)5、10、15、20、30、45min時溶液5mL，濾過，并補充溶出介質(zhì)5mL。取續(xù)濾液3mL置50mL量瓶中，用溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，在277nm處測定其吸光度。計算各時間點的校正累積溶出量，繪制每粒的溶出曲線，結(jié)果見圖1。

圖1 溶出曲線圖

2.5 方法驗證

2.5.1 線性關(guān)系考察

精密稱取甲硝唑?qū)φ掌愤m量，加0.1mol/L的鹽酸溶液溶解并稀釋為對照品貯備溶液（100μg/mL）；精密量取該儲備液 1mL，2mL，3mL，4mL，5mL分別置于25mL 量瓶中，并用0.1mol/L的鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，在277nm處測定其吸光度。以甲硝唑濃度（C）為橫坐標(biāo)，吸光度（A）為縱坐標(biāo)進行線性回歸，其回歸方程為：c=26.33A-0.0947，相關(guān)系數(shù)r =0.9999，表明甲硝唑在4.228～21.14μg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.5.2 精密度試驗

分別精密量取上述對照品儲備液溶液3mL，置25mL 量瓶中，用0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，在277nm處測定吸光度，平行試驗6次，由測定結(jié)果計算其RSD值為0.1%，表明具有良好的精密度。

2.5.3 回收率試驗

精密稱取甲硝唑?qū)φ掌愤m量，置25mL量瓶中，用溶出介質(zhì)溶解并稀釋至刻度，作為對照品儲備液（2mg/mL）。根據(jù)處方，用空白輔料配制得到陰性空白，稱取適量的陰性空白，置25mL量瓶中，分別加入對照品貯備溶液1，2，3mL，加溶出介質(zhì)適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液3mL，置50mL容量瓶中，用溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，在277nm處分別測定其吸光度，每個濃度平行試驗三份。結(jié)果平均回收率為99.8%，RSD為0.5%（n=9），結(jié)果見表3。

表3 回收率試驗結(jié)果（n=9）

2.5.4 穩(wěn)定性試驗

取回收率試驗項下的1份供試品溶液，分別于0、2、4、6和24h，在277nm 的波長處測定其吸光度。結(jié)果相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.8%，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6.4 批次樣品的溶出度檢查

表4 4批次樣品的溶出度檢查結(jié)果

3 討 論

3.1 上述試驗表明，不同廠家生產(chǎn)的人工牛黃甲硝唑膠囊校正累積溶出率存在一定的差異，可見，不同廠間制劑工藝存在較大差異。

3.2 溶出度是評價藥物質(zhì)量的一個內(nèi)在指標(biāo)。作為制劑質(zhì)量控制的一種手段，其目的是使不同廠家生產(chǎn)的同一品種能達到一定程度上的生物等效。本文建立的溶出度測定方法，經(jīng)方法學(xué)驗證，此方法可行，回收率良好，對評價該藥物制劑的安全和有效性提供了有效的手段。

[1] 國家藥典委員會.中國藥典[S].二部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社,2010.

[2] 國家食品藥品監(jiān)督管理局國家藥品標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)(第三冊)[S].2003.

[3] 歐陽露,肖雨清,姜美蓉.紫外分光光度法測定復(fù)方甲硝唑膠囊中甲硝唑的含量[J].安徽醫(yī)藥,2005,9(5)：353-354.

[4] 焦素文.HPLC法測定人工牛黃甲硝唑膠囊中甲硝唑的含量[J].中國醫(yī)藥指南,2010,8(19)：73-74.