鄧明亮，紀素坤，張敏敏，郭愛珍

（華中農業(yè)大學農業(yè)微生物學國家重點實驗室，華中農業(yè)大學動物醫(yī)學院，湖北武漢 430070）

牛病毒性腹瀉的防控

鄧明亮，紀素坤，張敏敏，郭愛珍

（華中農業(yè)大學農業(yè)微生物學國家重點實驗室，華中農業(yè)大學動物醫(yī)學院，湖北武漢 430070）

牛病毒性腹瀉(BVD）又稱牛病毒性腹瀉-黏膜病，是由牛病毒性腹瀉病毒引起的一種病理過程復雜、臨床表現多樣的傳染病。急性病例以發(fā)熱、腹瀉、咳嗽、黏膜糜爛和潰瘍、白細胞減少為主要特征，但常表現為持續(xù)感染和免疫抑制，妊娠母?？杀憩F流產、產死胎或畸形胎等癥狀。該病呈世界性分布，我國已有20多個省份報道了該病，并且感染情況日趨嚴重。該病毒除感染黃牛、奶牛和牦牛外，還感染羊、豬、鹿等多種家養(yǎng)和野生動物，嚴重威脅著我國畜牧養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，應引起高度重視。

一、病原

牛病毒性腹瀉病毒屬于黃病毒科瘟病毒屬成員，是一種有囊膜的單股正鏈RNA病毒。病毒粒子多呈球形，直徑約為23～50 nm。在分類學上與豬瘟病毒和邊界病毒同為一屬，抗原性有交叉。BVDV基因組長約12.5kb，包括5'端非翻譯區(qū)、一個大的開放閱讀框和3'端非編碼區(qū)。開放閱讀框編碼結構蛋白（C、Erns或E0、E1和E2）和非結構蛋白。根據病毒基因組5'-UTR序列不同可將BVDV分兩種基因型BVDV-1型和BVDV-2型，每種基因型又可分為多種基因亞型，我國主要流行BVDV-1b型。但近年來，我國開始出現BVDV-2型感染，并且感染率呈上升趨勢。BVDV-2型能引起持續(xù)感染和急性出血性綜合征，對牛的致病力更強，致死率更高。另外根據病毒對細胞的病變效應，每種基因型可分為兩種生物型，即致細胞病理變化型和非致細胞病理變化型。本病毒能在胎牛腎、睪丸和肺，胎羊睪丸和豬腎細胞上增殖。急性高熱期病牛的血液和流產胎兒的脾和骨髓是常用于分離病毒的樣本。

該病毒對高溫敏感，在56℃下很快滅活，但在低溫下穩(wěn)定，真空凍干的病毒在-60℃～-70℃條件下可保存多年；對乙醚、氯仿、胰酶、pH3敏感。

二、流行病學

病毒可感染牛、羊、豬等多種家畜，以牛為主，各年齡的牛對該病均易感，以6～18月齡者居多。發(fā)病牛可表現為多種臨床癥狀如黏膜損害、腹瀉、肺炎、流產、出血性綜合征等急性感染癥狀。該病四季都有發(fā)生，冬季與早春多見，新疫區(qū)急性病例較多、發(fā)病率5%，死亡率高達90%以上，老疫區(qū)急性病例少、發(fā)病率和死亡率較低，而隱性感染率達50%以上。

隱性感染的主要形式是持續(xù)感染，其后果是損害機體的免疫機能，導致免疫抑制，增加其他病原體感染機會和疫苗的免疫失敗。持續(xù)性感染還導致感染畜天生具有免疫耐受性，體內無BVDV抗體，因此不易被檢出，但一直帶毒并通過鼻涕、唾液、尿液、眼淚和乳汁等分泌物向體外排毒，成為該病危險的傳染源。

該病傳播途徑可為直接或間接接觸傳播，主要通過攝食被病毒污染的飼料、飲水而感染，也可因吸入因病畜咳嗽、劇烈呼吸噴出的傳染性飛沫而感染。另外運輸工具、飼養(yǎng)用具或者通過胎盤垂直感染、自然交配和人工授精等途徑也可以傳播該病。

三、臨床癥狀

根據臨床癥狀與發(fā)病過程，可分為急性和慢性兩種類型。

1.急性型。青年牛易發(fā)生，黏膜損害和腹瀉是主要癥狀。病牛發(fā)病急，高熱可達40℃～42℃，持續(xù)4～7 d后下降，有的出現體溫第二次升高；隨體溫升高白細胞減少，持續(xù)1～6 d，繼而白細胞數量又會增多，有的會發(fā)生第二次減少。病畜精神萎靡，厭食，呼吸急促伴咳嗽，鼻眼有漿液性分泌物；發(fā)病2～3 d后鼻鏡、舌、齒齦、腭、口腔黏膜充血并有潰瘍，流涎增多，呼出惡臭氣體。通常在口腔損傷之后發(fā)生嚴重腹瀉，腹瀉病牛的糞便從水樣逐漸到粘稠，含有大量粘液和氣泡，甚至帶血。病牛常在癥狀出現后5～7 d因嚴重脫水而死亡。

2.慢性型。該類型較少見。體溫只發(fā)生輕微波動，主要表現消瘦，鼻鏡潰爛，甚至連成一片；眼有分泌物，通常門齒齒齦發(fā)紅，但口腔里很少發(fā)生糜爛；蹄葉炎和趾間皮膚糜爛，病牛明顯跛行；可出現持續(xù)或間歇性腹瀉。多數病例在2～6個月內死亡，也可達1年。妊娠母牛感染后可發(fā)生流產或產先天性缺陷犢牛。

四、病理變化

病理變化主要集中在消化道和淋巴組織。鼻鏡、鼻腔黏膜有小而淺的爛斑；消化道黏膜充血、出血和糜爛，尤以腸道變化最嚴重，腸道黏膜出現卡他性、出血性、壞死性、潰瘍性等不同表現的炎癥；真胃黏膜彌漫性出血和水腫，并伴有潰瘍。腸系膜淋巴結水腫，增大如棗樣，切口外翻，有混濁液體流出。運動失調的新生犢牛腦膜及腦膜下積水，心內外膜出血。

五、診斷

可根據其流行病學、臨床癥狀及病理變化作出初步診斷，但牛感染時多為隱性感染，且該病易與其他疾病如牛瘟、口蹄疫、水皰性口炎、牛傳染性鼻氣管炎等病的臨床癥狀相混淆，因此確診有賴于實驗室檢查。

1.病毒分離和鑒定。急性發(fā)熱期可采集血液、眼鼻分泌物和尿液，死亡動物可采集甲狀腺、脾、腸系膜淋巴結、骨髓等材料。將病料負染和電鏡觀察，或接種于犢牛睪丸、腎、鼻甲細胞、胎牛肺細胞等牛源細胞作分離培養(yǎng)。

2.血清學診斷。常用的血清學診斷方法有血清中和試驗、酶聯免疫吸附試驗、快速診斷試紙條等。血清中和試驗采取雙份血清（間隔3～4周），血清抗體滴度升高4倍以上者為陽性，該法可定性也可定量，但處于免疫耐受的牛不產生抗BVDV的抗體，血清學陰性，所以可能造成漏檢。酶聯免疫吸附試驗是用于檢測BVDV最廣泛的方法之一，具有特異性強、敏感性高、重復性好、可批量檢測等優(yōu)點，可用于檢測抗原或抗體。試紙條可用于快速檢測，操作簡單，不需特殊設備，也可檢測抗原或抗體。

3.分子生物學診斷。主要有反轉錄聚合酶鏈式反應（RT-PCR），該技術根據BVDV 5'端非翻譯區(qū)（5'-UTR）保守序列設計合成一對或幾對特異性引物，應用RT-PCR技術對BVDV基因某段序列進行基因擴增。由于該方法高度特異靈敏性，得到了廣泛應用。

六、防制

1.治療。本病無特效治療方法和藥物，實施對癥治療。由于本病引起的免疫抑制易導致其他病原體的繼發(fā)感染，在對發(fā)病牛進行對癥治療的同時，應使用抗菌藥物（抗生素或磺胺類等）治療以減少繼發(fā)感染。針對病牛脫水電解質平衡紊亂的情況可輸液擴充血容量并糾正酸中毒；腹瀉癥狀可投服收斂止瀉藥。用藥時需特別注意：急性感染牛禁用皮質類固醇，因這類藥可加重消化道糜爛和潰瘍。對有飲食欲的?？捎眠m當劑量的阿司匹林進行退熱治療。

2.預防。需采取綜合性措施，進行全面預防。

（1）謹慎引牛，加強檢疫。堅持自繁自養(yǎng)，不從疫區(qū)購牛；對新購牛要用血清學診斷方法進行檢測，避免引入陽性牛。定期對牛群進行血清學檢查以便及時掌握本病在牛群中的流行狀況，如發(fā)現有少數牛出現抗體陽性，應將其淘汰以防病情擴大。

（2）加強飼養(yǎng)管理，減少環(huán)境應激。保持良好的環(huán)境衛(wèi)生，及時清除牛舍內外、運動場上的糞便及其他污物，保持干燥并定期消毒。牛舍應安裝通風換氣設備，及時進行通風換氣。

（3）做好免疫接種，提高機體免疫力。目前國內有幾家單位都在研究新型疫苗，但尚無商業(yè)化國產疫苗問世。國外已經有商品化的Ⅰ型和Ⅱ型毒株的減毒活疫苗和滅活疫苗。由于弱毒疫苗可導致妊娠母牛子宮感染引起流產或新生犢牛免疫抑制，因此妊娠母牛和6月齡以下的犢牛不能使用弱毒疫苗。弱毒疫苗接種年齡應在9～12月齡。受威脅較大的牛群每隔3～5年接種1次，對育成母牛和種公牛應于配種前再接種1次，多數牛可獲得終生免疫。也可將弱毒疫苗和滅活疫苗聯合使用提高免疫效果。有研究報道豬瘟兔化弱毒疫苗接種牛群可對該病提供保護，實際工作中也存在用豬瘟兔化弱毒疫苗接種牛群預防牛病毒性腹瀉的情況，但這種應用的生物安全后果未進行過全面評估。

七、結語

牛病毒性腹瀉是呈世界性分布的重要傳染病，尤其在養(yǎng)牛業(yè)發(fā)達的國家，這種疾病的發(fā)生更為嚴重，給養(yǎng)牛業(yè)造成了巨大的經濟損失。一些歐美國家已經將此病列為重大疫病，并通過淘汰持續(xù)感染牛和疫苗預防接種等措施實施根除計劃，取得良好效果。隨著我國牛養(yǎng)殖量的增加，飼養(yǎng)方式向規(guī)?；图s化等現代養(yǎng)殖模式的轉變，我國養(yǎng)牛業(yè)受該病的威脅也越來越大。然而，我國對該病缺乏深入研究，流行病學資料不全，缺乏檢測試劑盒和疫苗等防控產品，給該病的防控帶來了很大困難。只有加強相關研究和技術推廣，并建立扎實完善的生物安全體系，通過對引牛、牛舍環(huán)境衛(wèi)生、預防接種、持續(xù)感染監(jiān)測、淘汰持續(xù)感染牛和牛群移動限制等多環(huán)節(jié)進行有效監(jiān)督和控制，最終達到凈化該病的目的。

（略）