張 旭，蔣桂韜，王向榮，李昊幫，戴求仲

（湖南省畜牧獸醫(yī)研究所，長沙 410131）

植物來源飼料中的磷多以植酸鹽的形式存在，植酸鹽是由肌醇和磷酸根組成的植酸和某些礦物元素（鈣、鎂、鋅、錳等）結(jié)合形成的難溶性鹽，由于單胃動物體內(nèi)缺乏內(nèi)源性植酸酶，因而飼料中的磷和礦物元素很難被禽類利用，大部分隨糞便排出，致使飼料中的磷大量浪費，還會造成環(huán)境污染。因而飼料中常添加無機(jī)磷來滿足動物的生長需要。鈣和磷是肉雞骨骼的主要成分，骨骼是鈣、磷的貯存場所，脛骨灰分及礦物元素濃度是衡量動物骨骼礦物元素儲備狀況的主要參數(shù)。植酸酶能夠?qū)⒅菜崃追纸鉃榧〈己土姿?，飼料中添加植酸酶可以提高動物對植酸磷及其他養(yǎng)分的利用率[1－3]。本試驗以快大型白羽肉雞為試驗動物，研究3種不同品牌植酸酶在不同磷酸氫鈣添加水平條件下對肉仔雞脛骨指標(biāo)及鈣磷消化率的影響，以期為植酸酶在肉雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

植酸酶A、B、C為3種不同品牌的微生物植酸酶制劑。

1.2 試驗動物與分組

選擇11日齡的快大型白羽肉雞（公母混養(yǎng)）560羽，隨機(jī)分為7組，每組4個重復(fù)，每個重復(fù)20羽，各處理組間肉雞初始體重差異不顯著（P＞0.05），試驗期31 d。

1.3 試驗日糧

參照NRC（1994）肉雞營養(yǎng)需要和快大型白羽肉雞營養(yǎng)需要配制，基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 日糧組成及營養(yǎng)水平 DM

試驗1組為對照組，飼喂基礎(chǔ)日糧，添加磷酸氫鈣1.10%，試驗2、3、4組添加磷酸氫鈣量為對照組的40%（即磷酸氫鈣用量為0.44%），用膨潤土取代基礎(chǔ)配方中磷酸氫鈣60%，并分別在2、3、4組中添加植酸酶A、B、C 150 g·t－1，試驗5、6、7組添加磷酸氫鈣量為對照組的70%（即磷酸氫鈣用量為0.77%），用膨潤土取代基礎(chǔ)配方中30%的磷酸氫鈣，并分別在5、6、7組中添加植酸酶A、B、C 150 g·t－1。日糧均采用制粒后噴涂工藝添加酶制劑。

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗雞采用舍內(nèi)網(wǎng)上平養(yǎng)，人工持續(xù)光照，視氣溫情況采用紅外燈保暖，自由采食和飲水，自然通風(fēng)，按常規(guī)進(jìn)行雞只免疫和欄舍消毒。

1.5 測定指標(biāo)與方法

1.5.1 脛骨指標(biāo)

于24和42日齡早上從每重復(fù)中選取接近平均體重的試雞1只，屠宰后取左腿脛骨，剝凈筋肉后用去離子水洗凈，用濾紙吸干脛骨表面水分后稱重，為鮮骨重，并用游標(biāo)卡尺測量脛骨長度，再放入盛有一定體積水的量筒中，根據(jù)排水體積測得脛骨體積。將脛骨放入70℃烘箱中干燥24 h，然后用乙醚浸泡15 d以去除脂肪，制得脫脂骨樣，取出樣品待乙醚揮發(fā)后，在105℃烘箱中烘至恒重，稱量得脫脂干骨重。將脫脂干脛骨粉碎，550℃灼燒測定脛骨灰分；脛骨中鈣含量的測定采用高錳酸鉀滴定法，磷含量測定采用鉬黃比色法。

1.5.2 鈣、磷消化率

于試驗中期和結(jié)束前將各處理組日糧均預(yù)先添加TiO20.1%作為外源指示劑，并收集糞便2 d，每天收糞若干次，每次收集后加HCL 0.1 mol·L－1攪拌均勻，并立即保存于4℃下，收集完后放入60～65℃烘箱中鼓風(fēng)干燥至恒重，置室內(nèi)回潮24 h后粉碎、過40目篩，裝瓶，待測。

飼料和糞樣中TiO2含量用比色法測定，鈣含量采用高錳酸鉀滴定法測定，磷含量采用鉬黃比色法測定。

養(yǎng)分消化率計算公式見式1。

1.6 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行方差分析，用Duncan′ s法進(jìn)行多重比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同植酸酶對24日齡肉雞脛骨指標(biāo)的影響

不同植酸酶對24日齡肉雞脛骨指標(biāo)的影響見表2。

表2 不同來源植酸酶對24日齡肉雞脛骨指標(biāo)的影響

由表2可知，添加植酸酶各組試驗雞的脛骨長度均高于對照組，試驗5組與對照組差異顯著（P＜0.05），其余均差異不顯著（P＞0.05）。磷酸氫鈣0.44%水平下，植酸酶C組的鮮骨重高于對照組（P＞0.05），植酸酶A和B組均低于對照組（P＞0.05），植酸酶C組與B組差異顯著（P＜0.05）；磷酸氫鈣0.77%水平添加植酸酶的3個試驗組的鮮骨重均高于對照組（P＞0.05）。磷酸氫鈣0.44%水平3個試驗組的脛骨體積均低于對照組，分別較對照組低11.24%（P＞0.05）、15.68%（P＜0.05）和3.85%（P＞0.05），磷酸氫鈣0.77%水平3個試驗組的脛骨體積與對照組差異不顯著（P＞0.05）。將不同磷酸氫鈣水平、相同植酸酶的兩個試驗組的鮮骨重和脛骨體積進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，添加植酸酶B的兩個組差異顯著（P＜0.05），添加植酸酶A或C的兩個組差異不顯著（P＞0.05）。添加植酸酶2～7組的脛骨重量與體積比值均高于對照組（P＞0.05），磷酸氫鈣0.44%水平3個試驗組間差異不顯著，磷酸氫鈣0.77%水平下，植酸酶A組顯著高于植酸酶B和C組，分別高7.58%（P＜0.05）和8.33%（P＜0.05）。磷酸氫鈣0.44%水平3個試驗組的脫脂干骨重均低于對照組，分別較對照組低16.97%（P＜0.05）、21.21%（P＜0.01）和2.42%（P＞0.05），且植酸酶C組顯著高于植酸酶A和 B 組，分別高 17.52%（P＜0.05）和 23.85%（P＜0.05），磷酸氫鈣0.77%水平3個試驗組的脫脂干骨重與對照組接近，且3個組間差異不顯著（P＞0.05），將不同磷酸氫鈣水平、相同植酸酶的兩個試驗組的脫脂干骨重進(jìn)行比較，磷酸氫鈣0.77%水平的植酸酶A和B組顯著高于磷酸氫鈣0.44%水平試驗組（P＜0.05），兩個植酸酶C組間差異不顯著（P＞0.05）。添加植酸酶各組的脛骨灰分含量均低于對照組，分別低5.85%（P＜0.01）、2.31%（P＞0.05）、4.49%（P＜0.05）、1.72%（P＞0.05）、2.86%（P＞0.05）和1.36%（P＞0.05），相同磷酸氫鈣添加水平的3個組間差異不顯著（P＞0.05）。對不同磷酸氫鈣水平、相同植酸酶的兩個試驗組進(jìn)行比較，植酸酶A的磷酸氫鈣0.77%水平較磷酸氫鈣0.44%水平組高4.38%（P＜0.05），而添加植酸酶B和C的兩個組間均差異不顯著（P＞0.05）。通過對脛骨中鈣和磷含量的分析發(fā)現(xiàn)，磷酸氫鈣0.44%水平的3個組脛骨鈣含量均低于對照組（P＞0.05），而磷酸氫鈣0.77%水平的3個組脛骨鈣含量均高于對照組（P＞0.05），相同植酸酶不同磷酸氫鈣水平的兩個組間差異不顯著（P＞0.05）。添加植酸酶的各試驗組的磷含量均略低于對照組，但差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 不同植酸酶對42日齡肉雞脛骨指標(biāo)的影響

不同植酸酶對42日齡肉雞脛骨指標(biāo)的影響見表3。

表3 不同來源植酸酶對42日齡肉雞脛骨指標(biāo)的影響

由表3可知，添加植酸酶的2～7組的脛骨長度、鮮骨重和脛骨體積均與對照組差異不顯著（P＞0.05），不同磷酸氫鈣水平、相同植酸酶的兩個試驗組間脛骨長度和鮮骨重差異也不顯著（P＞0.05），添加植酸酶C的磷酸氫鈣0.77%水平組的脛骨體積顯著高于磷酸氫鈣0.33%水平組（P＜0.05），而添加植酸酶A或B、不同磷酸氫鈣水平的兩個組間差異不顯著（P＞0.05）。將各組的重量與體積比進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，添加植酸酶的2～7組均高于對照組，分別高4.63%（P＞0.05）、9.26%（P＜0.05）、5.56%（P＞0.05）、4.63%（P＞0.05）、4.63%（P＞0.05）和3.70%（P＞0.05）。添加植酸酶各組的脫脂干骨重與對照組均差異不顯著，其中以試驗7組最高，較對照組高12.70%（P＞0.05），試驗3組最低，較對照組低15.76%（P＞0.05），同一磷酸氫鈣水平、不同植酸酶的3個組間差異不顯著（P＞0.05），不同磷酸氫鈣水平、相同植酸酶的兩個組間均差異不顯著（P＞0.05）。對脛骨中灰分、鈣和磷含量的分析發(fā)現(xiàn)，各試驗組相互之間灰分、鈣和磷含量均差異不顯著（P＞0.05）。

2.3 植酸酶對肉雞鈣、磷表觀消化率的影響

植酸酶對肉雞鈣、磷表觀消化率的影響見表4。

表4 植酸酶對肉雞鈣、磷表觀消化率的影響

由表4可知，對24日齡肉雞的鈣和磷的表觀消化率進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，添加植酸酶各試驗組的鈣表觀消化率均顯著高于對照組（P＜0.01），分別較對照組高18.52%、23.93%、31.30%、24.38%、24.56%和22.33%，不同磷酸氫鈣添加水平、同一植酸酶的兩個試驗組間均差異不顯著（P＞0.05），磷酸氫鈣0.44%水平下，植酸酶C組的鈣表觀消化率最高，分別較植酸酶A和B組高10.79%（P＜0.05）和5.95%（P＞0.05），磷酸氫鈣0.77%水平下，各組的鈣表觀消化率較接近，差異不顯著（P＞0.05）。添加植酸酶各試驗組的磷表觀消化率均極顯著高于對照組（P＜0.01），分別較對照組高14.61%、16.06%、13.20%、13.26%、9.07%和7.40%，對不同磷酸氫鈣添加水平、同一植酸酶的兩個試驗組進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，磷酸氫鈣0.44%水平試驗組的磷消化率均高于磷酸氫鈣0.77%水平的試驗組（P＞0.05），相同磷酸氫鈣水平下，3個植酸酶組間差異不顯著（P＞0.05）。

對42日齡肉雞的鈣、磷表觀消化率進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，添加植酸酶的6個試驗組的鈣表觀消化率均高于對照組（P＞0.05），分別較對照組高7.51%、6.49%、7.37%、1.80%、0.81%和3.53%，且低磷酸氫鈣水平的3個試驗組的鈣表觀消化率均高于較高磷酸氫鈣水平的3個試驗組（P＞0.05）；同一磷酸氫鈣水平、不同植酸酶的鈣表觀消化率很接近（P＞0.05）。添加植酸酶各組的磷表觀消化率均高于對照組，分別較對照組高16.08%（P＜0.01）、11.23%（P＜0.05）、10.59%（P＜0.05）、7.83%（P＜0.05）、4.42%（P＞0.05）和15.61%（P＜0.01），0.44%磷酸氫鈣水平的3個試驗組的磷表觀消化率較接近，以植酸酶A組最高，0.77%磷酸氫鈣水平的3個試驗組中以植酸酶C組的磷表觀消化率最高，分別較植酸酶A組和B組高7.21%（P＜0.05）和10.72%（P＜0.01）；將不同磷酸氫鈣水平、相同植酸酶的兩個組進(jìn)行比較，植酸酶A組在較低磷酸氫鈣水平時的磷表觀消化率顯著高于較高磷酸氫鈣水平組（P＜0.05），而兩個植酸酶B組或C組之間均差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

在低磷酸氫鈣日糧中添加植酸酶能夠使24和42日齡肉雞均獲得與對照組接近或好于對照組的脛骨長度和鮮骨重，提高脛骨重量和體積的比值，這與植酸酶水解植酸鹽釋放有效磷來滿足低磷日糧肉雞營養(yǎng)需求的作用密切相關(guān)，說明降低無機(jī)磷供給并添加植酸酶不會對肉雞的骨骼生長帶來不利影響，這與馮定遠(yuǎn)等的研究結(jié)果一致[4]。對于24日齡的肉仔雞來說，降低磷酸氫鈣用量并添加植酸酶能夠使脛骨磷含量與對照組差異不顯著（P＞0.05），但并不能達(dá)到和對照組相同的脛骨灰分含量，磷酸氫鈣0.44%組的脛骨灰分含量顯著低于對照組（P＜0.05），鈣含量也低于對照組（P＞0.05）；但對于42日齡肉仔雞來說降低磷酸氫鈣用量并添加植酸酶后肉雞的脛骨灰分、鈣、磷含量均與對照組接近（P＞0.05）。說明低磷日糧中添加植酸酶能夠滿足肉雞生長過程中對磷的需求，但由于在肉雞生長早期對鈣的需求較大，雖然植酸酶的加入已使肉雞對鈣的消化率顯著提高，但在磷酸氫鈣用量減少60%的情況下仍然不能夠滿足肉雞對鈣的需求，會使肉雞的腿病發(fā)生率增加（P＞0.05）[5]。植酸酶的加入使低磷試驗組具有和對照組接近的脛骨灰分、鈣磷含量，并不能增加礦物質(zhì)在肉雞脛骨中的沉積。Cowieson等試驗結(jié)果表明，添加植酸酶提高了磷、鐵、銅吸收，但鈣沉積并沒有提高[6]。

添加植酸酶對肉仔雞的鈣、磷表觀消化率有顯著改善，這在以往研究者的研究中也得到過證實，而且還有研究者發(fā)現(xiàn)植酸酶的加入能夠提高雞血清中鈣、磷、鎂、鋅的含量和鈣、磷、鋅的利用率，植酸酶對鈣磷以外的礦物元素的影響還有待進(jìn)一步研究[7－8]。趙春等在1日齡肉仔雞低磷日糧中分別添加相同劑量（100 g·t－1）不同劑型植酸酶(粉狀、液體狀、包被顆粒狀)，正常磷日糧為對照組，結(jié)果表明，低磷日糧中添加不同劑型植酸酶均可提高肉仔雞的平均日增重和飼料利用率，包被顆粒狀植酸酶添加效果最好；各組脛骨的各項指標(biāo)差異均不顯著（P＞0.05），各組血清磷、血清鈣、血清堿性磷酸酶差異不顯著（P＞0.05），與對照組比較，各試驗組的總磷表觀消化率顯著提高（P＜0.05），鈣、粗蛋白質(zhì)、干物質(zhì)表觀消化率也均有提高；與對照組比較，各試驗組肉仔雞磷排出量分別降低了28.28%、28.97%和32.41%（P＜0.05），包被顆粒狀植酸酶對肉仔雞生長性能及鈣磷利用率的作用效果最好，其次是液體狀植酸酶，粉狀植酸酶的作用效果要次于前兩者[9]。

王慶云等在1日齡肉雞不同無機(jī)磷水平（磷酸氫鈣水平分別為對照組的75%、50%、25%和0）日糧中添加植酸酶，各組鈣磷比為1.2～1.4，對照組以磷酸氫鈣為磷源，結(jié)果表明，無磷酸氫鈣組日均采食量、日增重均顯著低于對照組（P＜0.05），50%磷酸氫鈣組日增重最高，料重比最低；各處理組的凈蛋白利用率均高于對照組，但差異不顯著（P＞0.05）；礦物質(zhì)元素利用率隨無機(jī)磷含量減少呈升高趨勢；隨無機(jī)磷水平降低，各試驗組排泄物中磷含量分別比對照組依次降低了11.0%、17.9%、23.9%、28.4%，綜合生長性能及養(yǎng)分利用率以50%磷酸氫鈣添加植酸酶組（0～4周：鈣0.76%，總磷0.54%；5～7周：鈣0.70%，總磷0.53%）效果較好[10]。通過對24和42日齡肉雞鈣、磷表觀消化率的比較發(fā)現(xiàn)，植酸酶對24肉仔雞鈣利用率的改善效果好于42日齡肉雞，而磷消化率在不同日齡的提高幅度接近。說明植酸酶對肉仔雞鈣磷利用率的作用效果與肉仔雞對鈣磷的需要量有關(guān)，由于生長早期肉仔雞對鈣磷等營養(yǎng)物質(zhì)的需要量高于后期，因而在肉仔雞生長早期植酸酶的作用效果更大，可見植酸酶能夠根據(jù)動物機(jī)體的需要水解植酸鹽釋放無機(jī)磷使動物機(jī)體達(dá)到攝入和排出的平衡，來滿足動物的生長代謝需要，這與前人研究得到的日糧中有效磷水平越低，添加植酸酶效果越好的結(jié)論一致[11－12]。

3種植酸酶對肉仔雞鈣、磷消化率的影響作用效果總體接近，將相同磷酸氫鈣添加水平3個試驗組的鈣、磷表觀消化率加和后取平均值進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，磷酸氫鈣0.44%水平下24和42日齡肉雞的鈣、磷表觀消化率均高于磷酸氫鈣0.77%水平的試驗組。說明在較低鈣磷供給時，肉雞會根據(jù)自身生長需要調(diào)節(jié)機(jī)體對鈣磷的利用率，以維持自身生長需要，另外，肉雞降解植酸磷的能力受日糧鈣磷水平的影響，這也說明在較低鈣磷日糧供給時，肉雞對鈣磷的利用會增加[13－14]。Veum等試驗結(jié)果表明，銅、鐵、鋅隨植酸酶濃度提高吸收增加[15]。Driver等研究結(jié)果表明，植酸酶能釋放出與植酸結(jié)合的礦物質(zhì)，從而使礦物質(zhì)元素利用率提高，日糧中磷水平越低時，植酸酶作用越強(qiáng)，植酸酶的釋放能力也越強(qiáng)[16]。

4 結(jié) 論

日糧中降低磷酸氫鈣用量并添加植酸酶后，對肉雞脛骨長度和重量無顯著影響，能夠提高脛骨重量和體積比值；不會對肉雞的骨骼生長帶來不利影響，植酸酶的加入并不能增加礦物質(zhì)在肉雞脛骨骨骼中的沉積；植酸酶能夠水解植酸鹽釋放磷以滿足肉雞生長過程中對磷的需求，但在肉雞生長早期，過多的降低磷酸氫鈣用量會降低脛骨灰分和鈣的含量。低磷日糧中添加植酸酶能夠提高肉仔雞對鈣、磷的利用率。植酸酶對肉仔雞鈣、磷利用率的作用效果與肉仔雞對鈣、磷的需要量有關(guān)，在肉仔雞生長早期植酸酶對鈣、磷消化率的提高幅度更大，植酸酶能夠根據(jù)動物機(jī)體需要水解植酸釋放無機(jī)磷使動物機(jī)體達(dá)到攝入和排出的平衡，來滿足動物的生長代謝需要。

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