白乾云 張青蘭 宋仁德* 索南元旦

1.青海省畜牧總站，西寧 810000；2.青海省玉樹州畜牧獸醫(yī)站，青海 玉樹 815000；3.國家肉牛牦牛產業(yè)技術體系玉樹綜合試驗站，青海 玉樹 815000

硒（Se）是谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）的構成成分，這種酶能催化過氧化氫和不飽和脂肪酸的過氧化物，使谷胱甘肽氧化，從而防止細胞內的許多種重要活性物質不受強氧化劑損害，是家畜必需微量元素。硒具有多種生理機能，能影響免疫系統(tǒng)的特殊組分和防止仔畜腹瀉及白肌癥的發(fā)生等[1]。青藏高原大多數(shù)土壤中植物可利用的有效態(tài)硒（水溶態(tài)硒）含量偏低，屬缺乏和極度缺乏地區(qū)[2-3]；青海省除馬海地區(qū)以外牧草中硒含量嚴重缺乏[3]。青海省各地牦牛的血液和牧草的硒濃度之間，呈高度的正相關關系，其中包括硒含量較高的門源、湟源等地區(qū)的牧草及放牧牦牛血清中的硒含量均在缺乏值范圍內[4-5]。通過對牦牛的無機硒投藥試驗和定期對牦牛血液及各臟器中硒濃度的測定分析發(fā)現(xiàn)，終年只靠采食天然草地牧草自然放牧飼養(yǎng)的牦牛，雖因地域差而有所差異，但均處于嚴重的缺硒狀態(tài)[6-8]。為此，本研究通過給妊娠末期母牦牛補硒和VE，測定母牦牛和犢牦牛血清中硒和VE濃度變化，對硒和VE在牦牛胎盤中的通過性及母乳的傳遞性、改善犢牦牛缺硒綜合癥的有效性進行了探討。

1 材料與方法

1.1 試驗時間及供試動物

試驗于2011年6月至10月底在玉樹縣國營牧場進行。

試驗采用了母牦牛14頭及其所產犢牦牛14頭。試驗用牦牛按牧民的飼養(yǎng)習慣進行終年放牧，其采食的牧草全部為天然牧草，只進行了人工補鹽，母牦牛日擠奶2次。

1.2 供試藥劑

試驗用1mL中含有亞硒酸鈉5.48mg（其中含硒2.5mg）及醋酸 d-α-tocopherol50mg（其中含 VE 68IU）的Se-VE制劑。

1.3 試驗分區(qū)

試驗分為Se-VE制劑投藥區(qū)（以下簡稱“投藥區(qū)”）與非投藥區(qū)（以下簡稱“對照區(qū)”），2區(qū)各有母牦牛7頭及其所產犢牦牛7頭。投藥區(qū)的母牦牛，在5月上旬（分娩預產期前1個月）按8mL/頭經肌肉注射給藥。

1.4 分析項目

分析用樣本的采集：對母牦牛分娩當日、犢牦牛出生當日和生后第4周分別從頸靜脈進行采血，并立即用3000r/min離心機離心10min，分離血清供分析用。血清中硒濃度的分析采用2.3-二氨基萘熒光分光光度法[8]；VE濃度的分析采用高效液相色譜-光度法。

1.5 統(tǒng)計處理

以處理區(qū)及時間為變動因子進行了二元配置方差分析及t檢驗法進行顯著性檢驗。

2 結果與分析

2.1 血清硒濃度

投藥區(qū)和對照區(qū)犢牦牛出生當日和生后4周齡時血清中硒濃度變化，如表1所示。

由表1可以看出，投藥區(qū)犢牦牛的血清硒濃度為（27.0±1.8）ng/mL，極顯著高于對照區(qū)的（8.8±1.7）ng/mL（P＜0.01）；4周齡時雖然下降為（15.9±2.0）ng/mL，但仍極顯著高于對照區(qū)的（8.9±1.7）ng/mL（P＜0.01）。

投藥區(qū)母牦牛的血清硒濃度為（41.2±6.2）ng/mL，極顯著高于對照區(qū)的（16.4±3.5）ng/mL（P＜0.01），且出生當日犢牦牛血清硒濃度與母牦牛的血清硒濃度呈顯著的正相關關系（r=0.955，P＜0.01），見圖 1。

表1 妊娠后期母牦牛注射Se-VE制劑后犢牦牛血清中硒及VE濃度的變化

圖1 分娩當日母仔牦牛血清Se濃度的相關性

2.2 血清VE濃度

由表1還可以看出，出生當日投藥區(qū)犢牦牛血清VE濃度為（490±76）μg/mL，顯著高于對照區(qū)的（473±24）μg/mL（P＜0.05）；4周齡時2區(qū)間無顯著差異。

3 討論

Hidiroglou等[9]給羊補硒的試驗結果證明，硒比較容易通過母羊胎盤傳遞給羔羊。在妊娠末期牦牛的投硒試驗中表明，母牦牛在分娩時及產后第4周時，投藥區(qū)母牦牛血清硒濃度均顯著高于對照區(qū)母牦牛[5]。本試驗中犢牦牛在出生時和生后4周齡時血清中硒濃度均高于對照區(qū)，而且分娩當日牦牛母子血清硒濃度呈高度正相關。這同樣說明硒在牦牛胎盤中的通過性良好，由于胎兒期硒通過胎盤從母體向胎兒體內大量移行，投藥區(qū)胎兒體內硒濃度增高，加上出生后，初乳中的硒濃度相對較高，投藥區(qū)犢牦牛血清中硒濃度在出生至4周齡時仍維持了比對照區(qū)高的水平。

關于VE，由于生育酚（Toc）在人體胎盤中的通過性不良，用給母體投藥來防治新生兒Toc缺乏癥比較困難的報告。犢牛出生時血清中Toc濃度極端低下，通過吮吸初乳，血清中Toc濃度才開始上升，指出Toc濃度在牛體內與人同樣從母體經胎盤對胎兒的傳遞性不良。在本試驗中，犢牦牛的血清Toc濃度雖低于母牦牛，但是也在牛血清Toc濃度的正常值范圍之內。而且犢牦牛血清Toc濃度遠高于至今在牛上的研究結果。這可能是由于自然放牧牦牛的分娩時間及速度不確定，犢牦牛的采血在出生后4～16h內進行，因為犢牦牛生后短時間內即會哺乳，而采血時犢牦牛已經吃上初乳的緣故，Toc在牦牛上從母體到胎兒的移行狀態(tài)未得到確認。

理論上硒參與機體蛋白質、脂肪和碳水化合物代謝，參與調解酶促反應和氧化-還原過程，而VE作為生育酚是動物體內重要的生物催化劑之一。在妊娠后期，胎兒生長發(fā)育速度快，而此時胎盤營養(yǎng)往往供給不足，硒與VE的協(xié)同作用，可改善胎盤血液循環(huán)狀況，促進胎兒對所需營養(yǎng)物質的轉化利用，從而緩解營養(yǎng)供需不平衡的矛盾。普遍認為低硒營養(yǎng)是家畜免疫器官硒含量和酶活性降低的基礎，王旭東等[10]報道缺硒對機體的生理功能和形態(tài)結構有廣泛的影響。

綜上所述，通過對妊娠末期牦牛肌肉注射補充硒與VE可以提高母牦牛在分娩時及哺乳期2成分的血清中濃度；硒在牦牛胎盤中亦有良好的透過性，從母體到胎兒的移行量大；VE也可通過初乳大量移行，可以提高犢牦牛在出生及哺乳期間2成分的血清中濃度。證明對妊娠后期母牦牛補充硒和VE，可有效改善哺乳期犢牦牛缺硒癥狀，今后應對補硒時期、方法和劑型進一步進行探討。

[1]盧維江.亞硒酸鈉治療犢牛腹瀉及其對生長發(fā)育的影響[J].中國牦牛，1993（2）：38-43.

[2]張金霞，陳偉民，王在模，等.青海海北高寒草甸土壤中的硒[J].環(huán)境科學學報，1989，9（4）：496-499.

[3]姜秋風，王在模.青海高原土壤中硒的研究[J].青海大學學報（自然科學版），2000（1）：10-15.

[4]SONG R，LI G，F(xiàn)EN S，et al.Selenium contents in the blood ofgrazing yaks and rangeland plants in the eastern Tibet-high Plateau，China [J].Japanese Journal of Livestock Management，2003，39（3）：105-113.

[5]SONG R，HASEGAWA N，IDOTA S，et al.Changes of serum selenium（Se），vitamin E（V.E）and progesterone concentrations of grazing late-pregnant yak after administrations of Se and V.E[J].Japanese Journal of Livestock Management，2004，40（1）：1-7.

[6]宋仁德，周玉清，李國梅，等.投硒后放牧牦牛血硒濃度的變化[J].青海畜牧獸醫(yī)雜志，2003，33（5）：9-10.

[7]宋仁德，李國梅，劉啟云，等.自然草地放牧牦牛臟器中硒濃度的研究[J].青海畜牧獸醫(yī)雜志，2004，33（1）：6-8.

[8]山田秀和，服部共生，松田聡，等.蛍光法検出高速液體クロマトグラフィーによる土壌中のセレンの定量 [J].分析科學，1987，36（9）：542-546.

[9]HIDIROGLOU M，HOFFMAN I，JENKINS K J.Selenium distribution and radiotocopherol metabolism in the pregnant ewe and fetal lamb[J].Canadian Journal of Physiology and Pharmacology，1969，47（11）：953-962.

[10]王旭東，劉潔.動物缺硒的免疫毒理學效應[J].甘肅畜牧獸醫(yī)，1991（6）：26-28.