張雁瑞 黃 犁 姜 輝 高慧軍 粱冠男

南方醫(yī)科大學附屬深圳市婦幼保健院病理科，廣東深圳 518028

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤，近年來其發(fā)病率逐年上升，且呈年輕化趨勢。三陰性乳腺癌（triple negative breast cancer，TNBC）是指雌激素受體（estrogen receptor，ER）、孕激素受體 （progesterone receptor，PR）及人表皮生長因子受體（human epidermal growth factor receptor-2，HER-2）均陰性的乳腺癌。這類乳腺癌有著高侵襲性，患者5年生存率低，復發(fā)風險高，預后差。筆者應用免疫組化的方法檢測了三陰性乳腺癌中P53的表達以及P53在不同組織學級別乳腺癌中的表達，現(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究收集深圳市婦幼保健院病理科2008年1月～2011年12月的三陰性乳腺癌（TNBC）35例，患者均為女性，年齡33～60歲，中位年齡48歲，均經術后病理及免疫組化證實，均未行輔助化療及放療。選取非三陰性乳腺癌（NTNBC）35例作對照。TNBC組及NTNBC組病理類型均為浸潤性導管癌。

1.2 方法

所有標本均經10%中性福爾馬林固定，石蠟包埋，5μm連續(xù)切片，HE染色。鏡下觀察，所有標本均經病理檢查證實為乳腺癌，并參照WHO分級標準進行組織學分級，即按組織分化程度（以腺管形成為主要依據(jù)）、核異型性及核分裂計數(shù)將70例浸潤性導管癌分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級。免疫組化染色采用SP法。P53蛋白抗體及試劑盒均購自福建邁新公司。以微波修復法進行抗原修復，DAB顯色。以已知陽性片為陽性對照，以PBS代替一抗為陰性對照。免疫組化結果判定標準為：P53陽性信號定位在細胞核。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用統(tǒng)計學軟件SPSS 11.0進行多項分析和比較，計數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 P53在TNBC與NTNBC組織中的表達差異分析

P53在TNBC中的表達明顯高于NTNBC，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 P53在TNBC及NTNBC中的表達[n（%）]

2.2 TNBC及NTNBC組織學分級的差異分析

TNBC的組織學高級別者明顯多于NTNBC，差異有高度統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。見表2。

2.3 P53在不同組織學級別乳腺癌中的表達差異分析

P53在不同組織學級別乳腺癌中的表達差異顯著，差異有高度統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。見表3。

表2 TNBC及NTNBC組織學分級的差異[n（%）]

表3 P53在不同組織學級別乳腺癌中的的表達差異[n（%）]

3 討論

乳腺癌是一類異質性明顯的惡性腫瘤，在組織學形態(tài)、免疫表型、生物學行為、預后及治療反應上存在很大差異。近年來，隨著ER、PR及HER-2等基因標志物在乳腺癌病理學中的常規(guī)應用，一種根據(jù)基因表達譜分析的既能反映預后又可指導臨床治療的乳腺癌分子病理分類法形成。根據(jù)乳腺癌基因表達的不同，可將乳腺癌分成導管A型、導管B型、Her-2過表達型、基底細胞樣型和正常乳腺樣型5個亞型，各亞型的病理學特征、生物學行為、臨床治療和預后明顯不同[1-3]。TNBC作為其中一類高危乳腺癌，已成為近年來研究的熱點。這類乳腺癌主要發(fā)生于絕經前的年輕女性，尤其是那些在哺乳期使用抑泌乳藥的人群中有較高的發(fā)病風險?；颊叨嘤腥橄侔┘易迨芳叭橄侔┮赘谢?1（breast cancer susceptibility gene-1，BRCA-1）突變[4]。TNBC 的組織學類型絕大部分表現(xiàn)為導管癌，還有大汗腺癌、混合性癌、小葉癌及髓樣癌等。TNBC相對于非TNBC，腫瘤的組織學分級高，侵襲性強。Tan等[5]研究發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)TNBC組織學分級為三級，并推斷TNBC與NTNBC在組織病理學特征方面的差異主要源于組織學級別上的差別。TNBC對內分泌治療和Herceptin靶向治療效果欠佳，總體預后差，易復發(fā)及轉移。

P53基因是迄今發(fā)現(xiàn)的與人類腫瘤相關性最高的基因。野生型P53是一種抑癌基因，它定位于17號染色體短臂，在細胞周期的G1期起關鍵的調控作用，是細胞增殖和分化的重要調控因子，在正常細胞中可以抑制細胞增殖。P53基因發(fā)生突變后，失去了對細胞增殖、凋亡及DNA修復等的調控作用，由抑癌基因轉變?yōu)榘┗颍哂写龠M惡性轉化的功能，與被激活的原癌基因起協(xié)同作用，導致細胞異常增生，最終形成惡性腫瘤[6]。絕大多數(shù)惡性腫瘤和癌前病變中存在P53基因突變。有研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌患者中50%～70%有突變型P53蛋白的表達，有家族史的乳腺癌其P53基因突變率高于散發(fā)性乳腺癌。P53基因突變是乳腺癌發(fā)生發(fā)展過程中的早期事件及重要原因。隨著腫瘤的進展，P53蛋白表達的陽性率明顯升高，患者復發(fā)及轉移的風險增加，生存期明顯縮短。因此，P53的表達可作為判斷乳腺癌生物學行為、復發(fā)和預后的一項重要指標[7-8]。

本研究結果顯示，P53在TNBC組中的表達明顯高于NTNBC，提示TNBC細胞具有更強的增殖活性，更易發(fā)生轉移及復發(fā)，預后更差，這與文獻報道的結果一致[9]。有研究表明TNBC的組織學分級多為高級別。與其他類型乳腺癌相比，TNBC細胞分化差，組織學1級患者比率較小。本研究結果亦顯示TNBC的組織學高級別者明顯多于NTNBC。同時，P53在不同組織學分級中的表達率分別為：Ⅰ級20.0%，Ⅱ級41.9%，Ⅲ級89.7%，三組比較差異有高度統(tǒng)計學意義（P＜0.01），提示隨著組織學分級的增高，P53陽性率越高，也與文獻報道的結果一致[10]，提示P53可以作為判斷乳腺癌細胞分化程度的一項重要指標。

[1]Perou CM，Sorlie T，Eisen MB，et al.Molecular portraits of human breast tumours[J].Nature，2000，406（6797）：747-752.

[2]Sorlie T，Tibshirani R，Parker J，et al.Repeated observation of breast tumor subtypes in independent gene expression data sets[J].Proc Natl Acad Sci，2003，100（14）：8418-8423.

[3]Nielsen TO，Hsu FD，Jensen K，et al.Immunohistochemical and clinical characterization of thebasal-likesubtypeof invasive breast carcinoma[J].Clin Cancer Res，2004，10（16）：5367-5374.

[4]黃玥，盧崇亮.三陰性乳腺癌的研究進展[J].中國現(xiàn)代普通外科進展，2010，13（9）：726-729.

[5]Tan DS，MarchióC，Jones RL，et al.Triple negative breast cancer：molecular profiling and prognostic impact in adjuvant anthracycline treated patient[J].Breast Cancer Res Treat，2008，111（1）：27-44.

[6]Iwamb P，Crawford L.Characterization of the human p53 gene [J].Mol cell Biol，1986，6（5）：1379-1385.

[7]Bidard FC，Matthieu MC，Chollet P，et al.p53 status and efficacy of primary anthracyclines/alkylating agent-based regimen according to breast cancer molecular classes [J].Ann Oncol，2008，19 （7）：1261-1265.

[8]Menezes MV，Cestari AL，Almeida O，et al.Protein expression of Cerb-2 and p53 in normal ducts，ductal carcinoma in situ and invasive carcinoma of the same breast[J].Sao Paulo Med J，2006，124（3）：121-124.

[9]Rakha EA，Sayed ME，Green AR，et al.Prognostic markers in triplenegative breast cancer[J].Cancer，2007，109（1）：25-32.

[10]吳祥德，董守義.乳腺疾病診治[M].2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2009：214-215.