王婷　馬云

[摘要] 目的 評(píng)價(jià)Bcl-2在三陰性乳腺癌中的預(yù)后意義。 方法 本研究納入三陰性乳腺癌改良根治術(shù)后患者68例，應(yīng)用Kaplan-Meier生存曲線分析患者總生存（OS）和無(wú)病生存率（DFS），并應(yīng)用Log-rank檢驗(yàn)Bcl-2對(duì)患者預(yù)后價(jià)值。 結(jié)果 本組病例中Bcl-2陽(yáng)性20例，占29.4%。Bcl-2陽(yáng)性組的中位生存期為（76.0±5.7）個(gè)月，而Bcl-2陰性組中位生存期僅為（64.0±5.5）個(gè)月（P = 0.040）。Bcl-2陽(yáng)性組中位DFS為（35.0±2.2）個(gè)月，而陰性組為（28±2.8）個(gè)月（P = 0.036）。 結(jié)論 Bcl-2在三陰性乳腺癌中表達(dá)較低，是其預(yù)后因素之一。

[關(guān)鍵詞] 乳腺癌；Bcl-2；預(yù)后

[中圖分類號(hào)] R737.9[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B[文章編號(hào)] 1673-9701（2012）29-0044-03

乳腺癌是女性最常見的腫瘤，依據(jù)人類表皮生長(zhǎng)因子受體2亞型（HER2）、雌激素受體（ER）和孕激素受體（PR）等表達(dá)與否，可以分為不同亞型[1]。三陰性乳腺癌是指ER、PR以及HER2均為陰性的乳腺癌，約占乳腺癌的12%～15%[2-4]。應(yīng)用基因表達(dá)譜分子分型，提示大部分三陰性乳腺癌為基底細(xì)胞樣乳腺癌。和非三陰性乳腺癌相比更好發(fā)于年輕女性，組織分化級(jí)別更高，增殖細(xì)胞比例更高。因此預(yù)后也較非三陰性乳腺癌差，容易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和局部復(fù)發(fā)，對(duì)內(nèi)分泌治療和抗HER2靶向治療均抵抗[2-4]。

Bcl-2于20世紀(jì)80年代初被發(fā)現(xiàn)是造血系統(tǒng)腫瘤的一個(gè)原癌基因， 是一種較為肯定的抗細(xì)胞凋亡基因并且受雌激素調(diào)節(jié)，表達(dá)于正常腺上皮組織，但約有60%～80%的乳腺癌存在Bcl-2過(guò)表達(dá)。Bcl-2過(guò)表達(dá)被認(rèn)為是乳腺癌預(yù)后良好的因素之一[5]。但是Bcl-2在三陰性乳腺癌預(yù)后預(yù)測(cè)價(jià)值研究報(bào)道極少，我們通過(guò)回顧性分析研究Bcl-2在三陰性乳腺癌中是否存在預(yù)后價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

以我中心2000～2008年間手術(shù)切除的所有乳腺癌病例為篩選對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①女性；②經(jīng)病理學(xué)明確的侵襲性乳腺癌；③免疫組織化學(xué)檢查HER2（HER2陰性指的是免疫組化陰性或+），ER、PR均為陰性；I、II、III期乳腺癌患者。IV期乳腺癌和組織學(xué)證實(shí)為非侵襲乳腺癌的病例排除。淋巴結(jié)和腫瘤大小分期參照第六版美國(guó)癌癥聯(lián)合委員會(huì)（AJCC）乳腺癌TNM分期系統(tǒng)[6]。陽(yáng)性淋巴結(jié)個(gè)數(shù)分組：N0（0個(gè)）；N1（1～3個(gè)）；N2（4～9個(gè)）；N3（≥10個(gè)）。腫瘤大小分組：T1（腫瘤最大徑≤2 cm）；T2（腫瘤最大徑2～5 cm）；T3/4（腫瘤最大徑≥5 cm或不管腫瘤大小，腫瘤直接侵犯皮膚或胸壁）。符合納入標(biāo)準(zhǔn)和不符合排除標(biāo)準(zhǔn)病例，通過(guò)醫(yī)院電子病歷檔案及紙質(zhì)檔案獲得患者的一般資料、臨床資料、放射學(xué)資料、病理資料等。其中病理資料包括腫瘤大小、陽(yáng)性淋巴結(jié)個(gè)數(shù)等。

1.2 隨訪

通過(guò)電話、書信以及上門等方式獲取患者生存和進(jìn)展情況。

1.3 免疫組化

石蠟標(biāo)本連續(xù)切片4 μm厚，進(jìn)行HE染色和S-P法免疫組化染色?？笲cl-2抗體購(gòu)自上海藍(lán)基生物科技公司。免疫組織化學(xué)染色按說(shuō)明書操作，DAB顯色，設(shè)陽(yáng)性和陰性對(duì)照。參考既往文獻(xiàn)，腫瘤細(xì)胞染色超過(guò)5%即認(rèn)為Bcl-2陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)錄入SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)分析軟件包?？偵鏁r(shí)間（Overall survival，OS）定義為患者確診至死亡時(shí)間或者最后一次隨訪時(shí)間，無(wú)病生存時(shí)間（Diesease free survival，DFS）定義為確診至乳腺癌復(fù)發(fā)或任何原因死亡時(shí)間。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，應(yīng)用方差分析。計(jì)數(shù)資料表示為計(jì)數(shù)和百分?jǐn)?shù)，應(yīng)用卡方檢驗(yàn)。DFS和OS采用Kaplan-meier生存曲線評(píng)價(jià)，組間的生存差異應(yīng)用Log-rank檢驗(yàn)。P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病例資料

符合條件病例共112例，其中78例獲得隨訪資料，可獲得組織標(biāo)本行免疫組化共68例，納入研究68例。該組68例患者，中位年齡59.5歲，平均（58.3±10.3）歲（33～76歲）。依據(jù)第6版乳腺癌TNM分期，其中I期4例（5.9%），II期32例（47.1%），III期32例（47.1%）。術(shù)后接受輔助放療的占63.2%（n = 43），未接受放療36.8%（n = 25）。Bcl-2陽(yáng)性20例，占29.4%，陰性48例，占70.6%。見表1。

表1 病例資料

2.2 DFS和OS

至隨訪結(jié)束時(shí)，共有46例死亡或失訪，占67.6%。其中有91.2%（62例）患者出現(xiàn)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。中位OS和中位DFS分別為（66.0±4.1）個(gè)月[95%CI，（57.8～74.1）個(gè)月]和（32.0±1.9）個(gè)月[95%CI，（28.2～35.7）個(gè)月]。5年生存率為62.1%（圖1），而三年無(wú)病生存率為28.1%（圖2）。

2.3 Bcl-2對(duì)OS的影響

以陽(yáng)性細(xì)胞占所有腫瘤細(xì)胞超過(guò)5%定義為染色陽(yáng)性，Bcl-2陽(yáng)性20例，陰性48例。Bcl-2陽(yáng)性組預(yù)后較陰性組好，其中位生存期分別為（76.0±5.7）個(gè)月[95%CI，（64.7～87.2）個(gè)月]和中位生存期僅為（64.0±5.5）個(gè)月[95%CI，（53.2～74.7）個(gè)月]，經(jīng)檢驗(yàn)P = 0.040，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖3）。

2.4 Bcl-2對(duì)DFS的影響

本組病例中，Bcl-2陽(yáng)性組中位DFS較陰性組長(zhǎng)，分別為（35.0±2.2）個(gè)月[95%CI，（30.6～39.3）個(gè)月]和（28±2.8）個(gè)月[95%CI，（22.4～33.5）個(gè)月]，經(jīng)檢驗(yàn)P = 0.036，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖4）。

圖1 總生存曲線圖（n = 68）

圖2 無(wú)病生存曲線（n = 68）

圖3Bcl-2對(duì)總生存的影響（P = 0.040）

圖4Bcl-2對(duì)無(wú)病生存的影響（P = 0.036）

3 討論

本研究中我們?cè)u(píng)價(jià)了Bcl-2在三陰性乳腺癌這一乳腺癌特殊亞群中的預(yù)后意義。三陰性乳腺癌的預(yù)后較非三陰性乳腺癌差，本組病例中三年內(nèi)復(fù)發(fā)的占71.9%，其中位DFS為32個(gè)月，中位OS為64個(gè)月，5年生存率為62.1%。有研究顯示診斷3年內(nèi)三陰性乳腺癌的大部分患者出現(xiàn)復(fù)發(fā)，這和本研究的結(jié)果類似[2]。

Bcl-2屬胞漿蛋白，與凋亡和腫瘤發(fā)生發(fā)展有關(guān)。在發(fā)育過(guò)程中，Bcl-2在所有組織中都有表達(dá)。但在成人中僅保守細(xì)胞和增殖細(xì)胞才表達(dá)。在侵襲性乳腺癌中，Bcl-2表達(dá)率達(dá)60%～80%[7，8]。在本組三陰性乳腺癌組中，有20例Bcl-2陽(yáng)性，表達(dá)率為29.4%，和非三陰性乳腺癌相比Bcl-2表達(dá)較低，與Kallel-Bayoudh等研究結(jié)果相似[9]。

Bcl-2是乳腺癌預(yù)后因素之一。Rolland等[10]研究顯示Bcl-2高表達(dá)的患者有更長(zhǎng)的生存期，且Bcl-2表達(dá)與ER受體的表達(dá)呈正相關(guān)[11，12]，而ER受體是乳腺癌預(yù)后良好的指標(biāo)之一，因此也支持Rolland等結(jié)果。而在本組三陰性乳腺癌患者，Bcl-2無(wú)論對(duì)DFS還是OS都有預(yù)測(cè)價(jià)值，Bcl-2陰性的患者更容易復(fù)發(fā)，且生存期更短。該結(jié)果與普通乳腺癌中各研究的結(jié)果相同

總之，本研究顯示Bcl-2在三陰性乳腺癌中具有重要作用，既有預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)的價(jià)值，也是預(yù)后良好的指標(biāo)之一。在三陰乳腺癌中Bcl-2的表達(dá)較非三陰性乳腺癌表達(dá)低。由于本中心條件限制、樣本量較小，且為回顧性研究，研究結(jié)果可能存在誤差，因此有必要開展前瞻性、多中心的研究。

[參考文獻(xiàn)]

[1]劉堯，劉文超，陶玉榮. HeR2過(guò)表達(dá)與乳腺癌治療的相關(guān)性研究進(jìn)展[J]. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2010，18（1）：182-184.

[2]Dent R，Trudeau M，Pritchard KI，et al. Triple-negative breast cancer：clinical features and patterns of recurrence[J]. Clin Cancer Res，2007，13（15）：4429-4434.

[3]Carey LA，Perou CM，Livasy CA，et al. Race，breast cancer subtypes，and survival in the Carolina Breast Cancer Study[J]. JAMA，2006，295（21）：2492-2502.

[4]Steponaviciene L，Lachej-Mikeroviene N，Smailyte G，et al. Triple negative breast cancer： adjuvant chemotherapy effect on survival[J]. Adv Med Sci，2011，56（2）：285-290.

[5]Dawson SJ，Makretsov N，Blows FM，et al. Bcl-2 in breast cancer： A favourable prognostic marker across molecular subtypes and independent of adjuvant therapy received[J]. Br J Cancer，2010，103（5）：668-675.

[6]Singletary SE，Allred C，Ashley P，et al. Staging system for breast cancer：revisions for the 6th edition of the AJCC Cancer Staging Manual[J]. Surg Clin North Am，2003，83（4）：803-819.

[7]Luna-More S，Casquero S，Perez-Mellado A，et al. Importance of estrogen receptors for the behavior of invasive micropapillary carcinoma of the breast. Review of 68 cases with follow- up of 54 [J]. Pathol Res Pract，2000，196（1）：35-39.

[8]Wang S，Yang D，Lippman ME. Targeting Bcl-2 and Bcl-XL with non-peptidic small- molecule antagonists[J]. Semin Oncol，2003，30（5）：132-142.

[9]Kallel-Bayoudh I，Hassen HB，Khabir A，et al. Bcl-2 expression and triple negative profile in breast carcinoma[J]. Med Oncol，2011，28（1）：S55-61.

[10]Rolland P，Spendlove I，Madjd Z，et al. The p53 positive Bcl-2 negative phenotype is an independent marker of prognosis in breast cancer [J]. Int J Cancer，2007，120（6）：1311-1137.

[11]Lee KH，Im SA，Oh DY，et al. Prognostic significance of Bcl-2 expression in stage III breast cancer patients who had received doxorubicin and cyclophosphamide followed by paclitaxel as adjuvant chemotherapy[J]. BMC Cancer，2007，7：63.

[12]Kyndi M，Sorensen FB，Knudsen H，et al. Impact of Bcl-2 and p53 on postmastectomy radiotherapy response in high-risk breast cancer. A subgroup analysis of DBCG82 b&c[J]. Acta Oncol，2008，47（4）：608-617.

（收稿日期：2012-06-07）