東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所 劉瑩 李垚＊ 索艷麗 呼林林 馮香安 張琳 金芳

槲皮素（Quercetin）又名櫟精、槲皮黃素，一種天然黃酮類化合物，是黃酮醇類化合物的典型代表，具有抗炎、抗氧化、清除氧自由基、抗黏附、抗病毒以及免疫調(diào)節(jié)等作用，但其作為飼料添加劑應(yīng)用于動物生產(chǎn)中仍鮮見報道。本試驗選用39周齡海賽蛋雞，在基礎(chǔ)飼糧中添加不同水平的槲皮素，研究蛋雞產(chǎn)蛋后期蛋品質(zhì)的變化。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 槲皮素≥97%（HPLC），購于阿拉丁公司；39周齡海賽蛋雞，購于哈爾濱益農(nóng)禽業(yè)。

1.2 試驗設(shè)計與飼糧配方 采用單因素隨機分組設(shè)計，選擇健康活潑、發(fā)育正常、體重和產(chǎn)蛋率相近的39周齡海賽蛋雞240只，隨機分4組，每組6個重復(fù)，每重復(fù)10只雞。對照組飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧，試驗組分別在基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)上添加0.02%、0.04%、0.06%槲皮素。試驗共8周，預(yù)飼期為1周。參照NRC（1994）蛋雞營養(yǎng)需要配制玉米-豆粕型日糧，基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理及樣品采集與測定 飼養(yǎng)試驗在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)香坊試驗基地進行，試驗期為2011年11月至2012年1月。采用半開放式雞舍，3層立體籠養(yǎng)，試驗期內(nèi)雞舍溫度18～26℃，相對濕度50% ～ 70%，白天自然光照，早晚輔以人工補光，每天光照時間16 h。根據(jù)蛋雞飼喂規(guī)程進行飼喂，自由采食和飲水，常規(guī)防疫消毒和免疫。

試驗期內(nèi)，每周相同時間隨機從每重復(fù)組采集2枚蛋，當(dāng)天測定蛋品質(zhì)。分別測定蛋形指數(shù)、哈氏單位、蛋殼強度、蛋殼厚度、蛋黃顏色。試驗第4周和第8周，隨機從每重復(fù)組采集2枚蛋，分離蛋清與蛋黃并將其烘干至恒重，使用粉碎機將其制成蛋黃粉和蛋清粉于密封陰涼通風(fēng)處保存。采用二價銅催化消煮-硼酸吸收法于凱氏定氮儀（KT-2300，F(xiàn)OSS）測定蛋白質(zhì)含量；采用索氏抽提法測定蛋黃中粗脂肪；使用膽固醇試劑盒（購于北京北化康泰臨床試劑有限公司）和無機磷試劑盒（購于南京建成生物工程研究所）于紫外可見光光度計（UV1206）測定蛋中膽固醇（王惠蕓和高應(yīng)，1995）和磷脂（高云仙和智變英，1999）。試驗第8周時，每重復(fù)組隨機選取1只蛋雞，進行翅靜脈采血，置干凈離心管中，待血清析出后，以3000 r/min低溫離心15 min，取血清分裝，用FULLY全自動生化分析儀測定血清中膽固醇、總蛋白、尿素氮、尿酸、鈣和磷，所用試劑均購于中生北控科技股份有限公司。

1.4 數(shù)據(jù)處理 試驗數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件中One-way ANOVA進行分析，并進行Ducan’s法多重比較。

2 結(jié)果

2.1 槲皮素對蛋中主要營養(yǎng)成分的影響 由表2可知，與對照組相比，添加不同個水平槲皮素對蛋清中蛋白質(zhì)含量、蛋黃中脂肪含量均無顯著影響（P＞0.05）；0.04%槲皮素組蛋黃中蛋白質(zhì)含量比對照組和0.06%槲皮組分別顯著提高2.86%（P＜ 0.05） 和 2.68%（P ＜ 0.05）；0.02%、0.04%和0.06%槲皮素組蛋黃總磷脂含量均分別較對照組顯著提高 3.57%、8.23%和 8.73%（P＜0.05）；0.06%槲皮素組蛋黃中膽固醇含量極顯低于對照組12.82%（P＜0.01），并顯著低于0.02%添加量組10.53%（P＜0.05），但與0.04%槲皮素組無顯著差異（P ＞ 0.05）。

表2 槲皮素對海賽蛋雞蛋中主要營養(yǎng)成分的影響

2.2 槲皮素對蛋品質(zhì)的影響 由表3可知，與對照組相比，添加不同水平槲皮素對蛋形指數(shù)和蛋殼強度均無顯著影響（P＞0.05）；0.04%和0.06%槲皮素組的蛋殼厚度較對照組分別極顯著提高8.45%和5.59%（P＜0.01），其中0.04%槲皮素組的蛋殼厚度極顯著高于0.02%槲皮素組 （P＜0.01）；各水平槲皮素添加組的蛋黃顏色均極顯著提高 （P＜0.01）；0.04%和0.06%槲皮素組雞蛋的哈氏單位分別較對照組顯著提高5.06%和6.39%（P＜0.01），分別較0.02%槲皮素組顯著提高 3.55%（P＜0.05）和 4.86%（P＜0.01）。

2.3 槲皮素對與蛋品質(zhì)相關(guān)的血液生化指標的影響 由表4可知，與對照組相比，添加不同水平槲皮素對蛋雞血液中的膽固醇和磷含量均無顯著影響（P＞0.05）；0.04%和0.06%槲皮素組蛋雞血清中總蛋白和鈣含量均顯著提高（P＜0.05），其中總蛋白含量較對照組分別提高9.92%和10.23%，鈣含量較對照組分別提高18.69%和14.88%；與對照組相比，0.06%槲皮素組血清中尿素氮含量顯著降低53.49%（P＜0.05）；0.04%槲皮素組血清中尿酸含量顯著降低66.83%（P＜0.05）。

表3 槲皮素對海賽蛋雞蛋品質(zhì)的影響

表4 槲皮素對海賽蛋雞血液生化指標的影響

3 討論

3.1 槲皮素對蛋中主要營養(yǎng)物質(zhì)及相關(guān)指標的影響 雞蛋中含有豐富蛋白質(zhì)且?guī)缀跞磕鼙蝗梭w吸收，因此，研究雞蛋中蛋白質(zhì)含量變化具有實際意義。本試驗結(jié)果表明，0.04%槲皮素組蛋黃中的蛋白質(zhì)含量顯著高于對照組（P＜0.05），但蛋清中蛋白含量各組間無顯著差異（P＞0.05）。為探究蛋白質(zhì)變化原因，進一步研究表明，0.04%和0.06%槲皮素組蛋雞血清總蛋白含量顯著高于對照組（P＜0.05）；0.06%槲皮素組蛋雞血清尿素氮含量顯著降低（P＜0.05）；0.04%槲皮素組蛋雞血清中尿酸含量顯著降低（P＜0.05）。其中血清總蛋白含量可在一定程度上反映機體蛋白質(zhì)代謝，總蛋白中的白蛋白不但可作為營養(yǎng)物質(zhì)的載體，同時還是機體的蛋白質(zhì)來源之一；血清尿素氮和尿酸也可反映機體的蛋白質(zhì)代謝，動物體內(nèi)未被利用的氨基酸可被分解成氨，氨在肝臟中被合成尿素氮或尿酸并釋放入血。研究認為，血中的尿酸可直接反映體內(nèi)蛋白質(zhì)分解代謝水平，血清中尿素氮含量與蛋白質(zhì)利用率之間呈顯著的負相關(guān)。Malmlof（1988）研究認為，血漿中的尿素氮可較準確反映動物體內(nèi)蛋白質(zhì)的代謝情況，蛋白質(zhì)代謝良好時，血漿尿素氮濃度降低。本試驗結(jié)果提示，槲皮素可通過改善蛋白質(zhì)代謝相關(guān)的血液生化指標提高機體對蛋白質(zhì)的利用率，從而增加蛋中蛋白質(zhì)含量，提高雞蛋品質(zhì)。

雞蛋蛋黃富含豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，但其中還含有可引起心血管疾病的膽固醇，因此，研究低膽固醇雞蛋具有一定的必要性。大量研究表明，黃酮類化合物可不同程度降低蛋黃中膽固醇含量，如大豆黃酮、蜂膠黃酮、橙皮素和柚皮素等（許合金等，2009；Lien 等，2008；尹靖東等，2004）。 本試驗結(jié)果表明，0.06%槲皮素組蛋黃中膽固醇含量顯著低于對照組（P ＜ 0.01）和 0.02%槲皮素組（P ＜ 0.05），提示槲皮素具有降低蛋黃中膽固醇的作用。蛋雞膽固醇的代謝途徑主要是將其轉(zhuǎn)運到蛋中（Naber，1983），蛋中膽固醇含量下降，提示蛋雞血液中膽固醇含量也可能產(chǎn)生相應(yīng)變化，但本試驗進一步研究表明，槲皮素對血液中膽固醇并無顯著影響（P＞0.05），說明槲皮素對蛋雞血清中總膽固醇與蛋中膽固醇的影響變化趨勢并不一致。有研究表明，黃酮類化合物具有提高蛋用家禽血清17-β雌二醇、孕酮等激素水平的作用（張響英等，2008；朱新建等，2004），而禽類多數(shù)的類固醇激素都以膽固醇為底物進行合成，提示槲皮素可能通過促進類固醇激素的合成從而減少膽固醇向蛋中的轉(zhuǎn)運。此外，雞蛋中的磷脂具有降低膽固醇、軟化血管、降低血壓等作用，對人類健康同樣具有重要意義。本試驗結(jié)果表明，槲皮素組蛋黃中總磷脂含量均顯著提高（P＜0.05或P＜0.01）。上述試驗結(jié)果說明，槲皮素對蛋中脂質(zhì)代謝有一定作用，可不同程度地改善蛋中脂類的營養(yǎng)物質(zhì)組分，提高其營養(yǎng)價值。但槲皮素對蛋黃粗脂肪含量并無顯著影響（P＞0.05），因此，槲皮素對蛋黃中各種脂質(zhì)的不同作用以及作用程度尚有待進一步研究。

3.2 槲皮素對蛋品質(zhì)及相關(guān)指標的影響 蛋殼強度和蛋殼厚度是反映蛋殼質(zhì)量的重要指標，同時也是重要的蛋品質(zhì)指標。良好蛋殼厚度和蛋殼強度可減少雞蛋的破損率，提高經(jīng)濟效益。此外，蛋殼厚度和蛋殼強度對雞蛋的新鮮度有一定影響（孫從佼等，2010）。 Sahin 等（2007）在產(chǎn)蛋后期的鵪鶉飼糧中添加大豆黃酮，結(jié)果表明，正常條件下大豆黃酮可有效提高蛋品質(zhì)，改善蛋殼厚度；另有研究表明，在蛋雞日糧中添加大豆黃酮后，蛋殼厚度和蛋殼重均相對提高（馬學(xué)會，2003），這些研究提示黃酮類化合物可改善家禽蛋殼品質(zhì)。本試驗結(jié)果表明，蛋雞飼糧中添加0.04%和0.06%槲皮素均可極顯著提高產(chǎn)蛋后期的蛋殼厚度 （P＜0.01），且0.04%槲皮素效果更好；但各試驗組雞蛋的蛋殼強度與對照組相比差異并不顯著 （P＞0.05）。有研究表明，黃酮類化合物可通過提高血清鈣含量改善蛋殼品質(zhì)（金小軍等，2005）。本試驗中0.04%和0.06%槲皮素組蛋雞血清鈣含量均顯著高于對照組（P＜0.05），說明槲皮素也可通過提高血清中鈣含量，為蛋殼的形成提供充足鈣源，從而改善蛋殼品質(zhì)。

哈氏單位是現(xiàn)在國際上對蛋品質(zhì)評定的重要指標，也是衡量雞蛋蛋白品質(zhì)和蛋的新鮮程度的重要指標，其值越高，蛋白質(zhì)越黏稠，蛋白品質(zhì)越好。本試驗結(jié)果表明，0.04%和0.06%槲皮素組雞蛋的哈氏單位極顯著高于對照組（P＜0.01），這與倪迎冬等（2007）在產(chǎn)蛋后期蛋雞飼糧中添加大豆黃酮的研究結(jié)果一致。蛋黃顏色作為蛋品質(zhì)的指標之一，并不影響雞蛋的食用價值，但其對消費者的購買力有一定影響。試驗結(jié)果表明，不同添加水平槲皮素均能顯著影響蛋黃顏色（P＜ 0.01），這與蛋雞飼糧中添加大豆黃酮和染料木黃酮的結(jié)果相同（弓琴等，2009）。蛋形指數(shù)是蛋雞種質(zhì)分類的指標之一，僅與包裝和運輸有關(guān)。此外，較早的研究表明，蛋形指數(shù)與蛋重具有一定相關(guān)性，隨蛋重的增加呈下降趨勢（Bratova等，1982），而本試驗研究表明，槲皮素對蛋形指數(shù)并無顯著影響（P＞0.05），其原因有待于進一步探討。

4 結(jié)論

本試驗條件下，飼糧中添加不同劑量的槲皮素能均能改善產(chǎn)蛋后期蛋雞的蛋品質(zhì)，且最適添加量為0.04%。

[1]高云仙，智變英.雞蛋磷脂質(zhì)的測定[J].中國畜產(chǎn)與食品，1999，3：46～47.

[2]弓琴，咼于明，袁建敏.大豆黃酮與染料木黃酮對蛋雞生殖內(nèi)分泌和蛋品質(zhì)的影響[J].飼料研究，2009，4：1 ～ 3.

[3]金小軍，于東游，黃利權(quán).依普黃酮對蛋雞產(chǎn)蛋性能及蛋品質(zhì)的影響[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2005，4：325 ～ 327.

[4]馬學(xué)會.大豆黃酮對蛋雞作用研究[D].保定：河北農(nóng)業(yè)大學(xué).2003.

[5]倪迎冬，洪文杰，任靈芝，等.大豆黃酮對母雞的蛋品質(zhì)及后代仔雞肉品質(zhì)的影響[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報， 2007，38（11）：1188 ～ 1194.

[6]孫從佼，徐桂云，楊寧.蛋殼質(zhì)量對雞蛋新鮮度的影響[J].農(nóng)產(chǎn)品加工，2010，11：8 ～ 9.

[7]王惠蕓，高應(yīng).雞蛋中膽固醇快速測定方法的研究[J].食品科學(xué)，1995，16（6）：58 ～ 59.

[8]許合金，張軍民，王修啟，等.類黃酮對蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)和血液生化指標特性的影響[J].中國畜牧獸醫(yī)，2009，36（6）：19 ～ 22.

[9]尹靖東，齊廣海，張萍，等.大豆黃酮對蛋雞膽固醇及其耐氧化性的影響[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2004，37（5）：756 ～ 761.

[10]張響英，唐現(xiàn)文，劉海霞，等.大豆黃酮對白羽番鴨繁殖性能及相關(guān)激素水平的影響[J].畜生態(tài)學(xué)報，2008，29（6）：43 ～ 45.

[11]朱新建，韓正康，王國杰.日糧中長期添加大豆黃酮對產(chǎn)蛋雞產(chǎn)蛋性能及有關(guān)內(nèi)分泌的影響[J].畜牧與獸醫(yī)，2004，3（36）：5 ～ 6.

[12]Bratova K，Ganovski K h.Effect of Black Sea algae on chicken egg production and on chick embryo development[J].Veterinarno-meditsinski Nauki，1982，19（8）：99 ～ 105.

[13]Lien T F，Yeh H S，Su W T.Effect of adding extracted hesperetin，naringenin ands pectin on egg cholesterol，serum traits and antioxidant activity in laying hens[J].Archives of Animal Nutrition，2008，62（1）：33 ～ 43.

[14]Malmlof K.Amino acid in farm animal nutrition metabolism，partition and consequences of imbalance [J].Swedish Journal of Agriculture Research，1988，18（4）：191 ～ 193.

[15]Naber E C.Nutrient and drug affects on cholesterol metabolism in the laying hen[J].Federation Proceedings，1983，42（8）：2486 ～ 2493.

[16]Sahin N，Onderci M，Balci T A，et al.The effect of soy isoflavones on egg quality and bone mineralisation during the late laying period of quail[J].British Poultry Science，2007，48（3）：363 ～ 369.