王 靚，施 慧，龍子江，黃金玲，陳 明，王雅娟，卞 海

（安徽中醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室，安徽合肥230038）

無(wú)患子皂苷是從無(wú)患子科植物無(wú)患子的果實(shí)中提取的皂苷成分。據(jù)《中華本草》記載，無(wú)患子的根、果均可入藥，能清熱解毒、化痰止咳，果實(shí)含無(wú)患子皂苷等三萜皂苷，本課題組前期的研究已發(fā)現(xiàn)無(wú)患子皂苷對(duì)原發(fā)性及腎性高血壓模型大鼠有顯著的降壓作用［1-3］。心肌肥厚是高血壓重要的合并癥，是冠心病的易患因素和心力衰竭的前期病變，是心臟對(duì)多種疾病包括高血壓、機(jī)械壓力負(fù)荷、心肌梗死、心律失常、內(nèi)分泌機(jī)能紊亂以及心肌收縮蛋白基因突變而產(chǎn)生的適應(yīng)性病理反應(yīng)，而持續(xù)性的心肌肥厚能夠引起擴(kuò)張性心肌病、心律失常、心力衰竭甚至猝死。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)探討無(wú)患子皂苷對(duì)腹主動(dòng)脈縮窄制備的壓力超負(fù)荷模型大鼠的抗心肌肥厚作用及對(duì)血流動(dòng)力學(xué)的影響，為臨床指導(dǎo)無(wú)患子皂苷用于抗心肌肥厚治療提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 78只SD大鼠體重180 g～220 g，由安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SCXK（皖）2005-0001。

1.1.2 主要藥品及儀器 無(wú)患子皂苷，由無(wú)患子果實(shí)中提取，純度達(dá)到90%以上，由安徽省醫(yī)學(xué)研究所化學(xué)室提供；纈沙坦膠囊由北京諾華制藥有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字 H20040217，批號(hào)：X0780；Medlab生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)由南京美易科技有限公司生產(chǎn)；ASP300型全自動(dòng)組織脫水機(jī)由德國(guó)徠卡公司生產(chǎn)；DP70型顯微鏡由日本奧林巴斯公司生產(chǎn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法［4-6］

SD雄性大鼠，隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、陽(yáng)性組（21.6 mg/kg）、無(wú)患子皂苷?。?4 mg/kg）、中（162 mg/kg）、大劑量組（486 mg/kg）6組，每組 13只（保證檢測(cè)指標(biāo)時(shí)每組剩余10只）。各組大鼠以3.5%水合氯醛10 mL/kg腹腔注射麻醉，打開(kāi)腹腔，分離兩腎動(dòng)脈之間的腹主動(dòng)脈，除假手術(shù)組外，其余各組沿腹主動(dòng)脈平行放置一直徑為0.7 mm的醫(yī)用針頭，用手術(shù)線結(jié)扎后，抽出注射針頭，閉合腹腔并注射青霉素鈉4萬(wàn)U/只，連續(xù)3 d抗感染。手術(shù)后4 w，假手術(shù)組、模型組以1 mL/100 g蒸餾水灌胃，其余4組給予相應(yīng)劑量藥物，藥物均以蒸餾水配制，灌胃容積為1 mL/100 g體重，1次/d，連續(xù)給藥4 w。末次給藥后30 min，各組大鼠以氨基甲酸乙酯麻醉，分離右側(cè)頸總動(dòng)脈，插入導(dǎo)管至左心室，另股動(dòng)脈插管，用Medlab生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)檢測(cè)收縮壓（SBP）、左室壓（LVSP）、左室舒張末期壓（LVEDP）和左室最大變化速率（±dp/dtmax）變化，并取心臟稱(chēng)左心室重量，計(jì)算左心室重量指數(shù)。

左心室重量指數(shù)（mg/g）=左心室重量（mg）/體重（g）

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 無(wú)患子皂苷對(duì)壓力超負(fù)荷模型大鼠左心室重量指數(shù)的影響

結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 無(wú)患子皂苷對(duì)壓力超負(fù)荷模型大鼠左心室重量指數(shù)的影響 （±s）

表1 無(wú)患子皂苷對(duì)壓力超負(fù)荷模型大鼠左心室重量指數(shù)的影響 （±s）

注：與模型組比較，1）P<0.05，2）P<0.01

?

由表1可見(jiàn)，腹主動(dòng)脈縮窄后，模型大鼠左心室重量顯著增加，且左心室重量指數(shù)與假手術(shù)組比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），說(shuō)明模型大鼠由于壓力超負(fù)荷出現(xiàn)了代償性的左心室肥厚，心肌肥厚模型成功；而無(wú)患子皂苷中劑量及大劑量組能顯著降低模型大鼠左心室重量及左心室重量指數(shù)，與模型組比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01，P<0.05），說(shuō)明無(wú)患子皂苷能夠有效地抑制壓力超負(fù)荷導(dǎo)致的左心室肥厚。

2.2 無(wú)患子皂苷對(duì)壓力超負(fù)荷模型大鼠血流動(dòng)力學(xué)的影響

結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可見(jiàn)，腹主動(dòng)脈縮窄后，模型大鼠SBP、LVSP和LVEDP較假手術(shù)組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），說(shuō)明壓力超負(fù)荷模型成功；而無(wú)患子皂苷各劑量組較模型大鼠SBP、LVSP和LVEDP水平顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01，P<0.05），說(shuō)明無(wú)患子皂苷能夠顯著改善腹主動(dòng)脈縮窄導(dǎo)致的壓力超負(fù)荷心肌肥厚模型大鼠的血流動(dòng)力學(xué)改變。

表2 無(wú)患子皂苷對(duì)壓力超負(fù)荷模型大鼠SBP、LVSP、LVEDP和±dp/dtmax的影響 （±s）

表2 無(wú)患子皂苷對(duì)壓力超負(fù)荷模型大鼠SBP、LVSP、LVEDP和±dp/dtmax的影響 （±s）

注：與模型組比較，1）P<0.05，2）P<0.01

組別 n 劑量（m g/k g） S B P（m m H g） L V S P（m m H g） L V E D P（m m H g） ＋d p/d t m a x（m m H g/s） －d p/d t m a x（m m H g/s）假手術(shù)組 10 - 118.06±12.50 2） 143.99±14.98 2） -1.32±2.10 2） 12892.00±1892.68 8272.30±840.99模型組 10 - 155.36±11.03 189.91±14.42 2.72±0.55 14757.70±1919.30 8314.10±819.99陽(yáng)性組 10 21.6 128.64±10.40 2） 160.51±11.05 2） 1.96±0.53 2） 13898.00±1720.82 8267.10±739.90小劑量組 10 54 140.60±11.56 1） 175.00±13.10 1） 2.20±0.67 14414.30±1359.19 8285.80±585.75中劑量組 10 162 132.26±12.71 2） 166.84±15.62 2） 2.06±0.42 1） 14032.70±1393.80 8323.00±465.93大劑量租 10 486 126.18±8.65 2） 157.99±12.23 2） 2.01±0.41 2） 14046.30±1122.01 8347.90±522.03

3 討 論

心室肥厚的產(chǎn)生是心臟為了維持正常的泵血功能，借助心肌結(jié)構(gòu)的改變對(duì)過(guò)度的壓力負(fù)荷產(chǎn)生的代償，表現(xiàn)為心肌細(xì)胞體積增大，心肌組織增生及無(wú)細(xì)胞分裂和細(xì)胞數(shù)增多，心臟的順應(yīng)性和循環(huán)泵功能降低［4］。心肌肥厚早期是對(duì)心室內(nèi)壓力增加的一種有益的適應(yīng)性反應(yīng)，可增加心輸出量，維持組織器官的血流灌注，但這種代償并非全是良性的，越來(lái)越多的研究表明，心肌肥厚是加重冠心病、心力衰竭和腦卒中等心血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素［5］。誘發(fā)心肌肥厚的細(xì)胞外刺激信號(hào)主要包括：機(jī)械性因素、神經(jīng)體液因素和細(xì)胞因子。當(dāng)周?chē)茏枇υ龈邥r(shí)，心臟壓力負(fù)荷過(guò)重，刺激心肌纖維蛋白合成，心肌細(xì)胞體積增大，肌節(jié)增多，伴間質(zhì)增生，從而導(dǎo)致心肌肥厚［6］。其機(jī)制可能是由于增加的壓力負(fù)荷直接通過(guò)牽張心肌細(xì)胞膜上一些敏感性離子通道進(jìn)行向下轉(zhuǎn)導(dǎo)，引起心肌細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化，從而引起其下游的各種生物分子發(fā)生磷酸化或者去磷酸化反應(yīng)，導(dǎo)致細(xì)胞代謝產(chǎn)物的變化，最后可以增加心肌細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)和糖原等的合成，同時(shí)也可能是通過(guò)刺激局部心肌組織產(chǎn)生各種各樣的神經(jīng)體液因子來(lái)間接刺激心肌細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的合成，最后導(dǎo)致心肌細(xì)胞的肥大［7-8］。

目前臨床上用于治療心肌肥厚的藥物主要有血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑、血管緊張素受體拮抗劑和鈣離子通道阻滯劑，但皆因存在不同程度的副作用而使其臨床應(yīng)用受到一定限制。心肌肥厚是一個(gè)長(zhǎng)期的過(guò)程，因此尋找一些療效好而毒副作用低的藥物顯得十分重要。

本課題組在前期研究證實(shí)無(wú)患子皂苷具有顯著降壓作用的基礎(chǔ)上，通過(guò)腹主動(dòng)脈縮窄術(shù)復(fù)制壓力超負(fù)荷模型大鼠，誘發(fā)大鼠出現(xiàn)左心室肥厚，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示模型大鼠左心室重量、左心室重量指數(shù)、SBP、LVSP和LVEDP顯著增高，說(shuō)明模型復(fù)制成功，而無(wú)患子皂苷可以顯著抑制壓力超負(fù)荷所導(dǎo)致的左心室肥厚，同時(shí)降低模型大鼠SBP、LVSP和LVEDP，改善血流動(dòng)力學(xué)。因此，證明無(wú)患子皂苷對(duì)壓力超負(fù)荷所誘發(fā)的心肌肥厚模型大鼠有較好的防治作用，但其逆轉(zhuǎn)心肌肥厚的作用機(jī)制仍需進(jìn)一步深入探討，以期為其臨床用于治療心肌肥厚提供依據(jù)。

［1］王維勝，龍子江，張玲，等.無(wú)患子皂苷對(duì)腎性高血壓大鼠血壓及左心室血流動(dòng)力學(xué)的影響［J］.現(xiàn)代中醫(yī)藥，2007，27（3）：63-64.

［2］龍子江，陳明，王秋立，等.無(wú)患子皂苷對(duì)大鼠動(dòng)脈血壓影響的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2009，15（6）：53-54.

［3］卞海，龍子江，陳明，等.無(wú)患子皂苷對(duì)原發(fā)性高血壓大鼠的影響［J］.中成藥，2009，31（3）：367-368.

［4］李儀奎.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2006：307.

［5］蔡輝，張群燕，趙智明，等.壓力負(fù)荷增加大鼠左心室重構(gòu)模型的建立［J］.醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào)，2010，23（2）：150-151.

［6］嚴(yán)麗，梁黔生，楊光田.丹參酮HA磺酸鈉鹽抑制腹主動(dòng)脈縮窄高血壓大鼠的心肌肥厚［J］.中華高血壓雜志，2009，17（2）：119-120.

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［8］張偉，張連峰.高血壓心室肥厚機(jī)制的研究進(jìn)展［J］.中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志，2009，19（9）：63-66.