周素敏，王巧玲

(華北制藥股份公司制劑分廠生產(chǎn)一部，河北 石家莊 050014)

頭孢克肟干混懸劑適用于對頭孢克肟敏感的鏈球菌、肺炎球菌、淋球菌等引起的感染性疾病，用于治療支氣管炎、腎盂腎炎、膽囊炎、猩紅熱、中耳炎、副鼻竇炎，尚無現(xiàn)行的國家藥品標(biāo)準(zhǔn)。為更好控制產(chǎn)品質(zhì)量，進(jìn)一步完善制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，筆者采用高效液相色譜(HPLC)法測定了其含量，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

1100型安捷倫高效液相色譜儀，G1314A型紫外檢測器，77251I型進(jìn)樣器;AE－104N型電子天平。頭孢克肟對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號為130503－200502);乙腈(色譜純)，水(蒸餾水)，其他試劑(分析純);頭孢克肟干混懸劑(市售品)。

2 方法與結(jié)果

2．1 色譜條件

色譜柱:Inertsil ODS － SP C18柱(150 mm ×4．6 mm，5 μm);流動(dòng)相為氫氧化四丁胺(取10%氫氧化四丁胺溶液25 mL，用水稀釋至 1 000 mL，用磷酸調(diào)節(jié) pH為 7．0)－乙腈(3∶1)，柱溫:40℃;流速:1．2 mL/min;檢測波長:254 nm。理論板數(shù)按頭孢克肟峰計(jì)算應(yīng)不低于3 000。

2．2 溶液制備

精密稱取頭孢克肟對照品，加磷酸鹽緩沖液(pH=7．0)制成每1 mL含頭孢克肟0．2 mg的對照品溶液。取供試品10袋，精密稱定，研細(xì)，精密稱取4．4 g，置100 mL容量瓶中，加磷酸鹽緩沖液(pH=7．0)60 mL超聲處理30 min，取出，放冷至室溫，加磷酸鹽緩沖液(pH=7．0)稀釋至刻度，搖勻后濾過，即得供試品溶液。

2．3 方法學(xué)考察

陰性干擾試驗(yàn):按處方比例制備不含頭孢克肟的空白樣品，照供試品溶液制備方法制備陰性對照品溶液，依法進(jìn)樣。結(jié)果見圖1，表明陰性對照品溶液對測定無干擾。

圖1 高效液相色譜圖

線性關(guān)系考察:精密稱取頭孢克肟對照品0．118 2 g，置100 mL量瓶中，用磷酸鹽緩沖液(pH=7．0)溶解并稀釋至刻度，精密量取 0．9，1．0，2．0，3．0，4．0，5．0 mL，置 50 mL 量瓶中，加磷酸鹽緩沖液(pH=7．0，至刻度，搖勻，各取 20 μL，注入液相色譜儀，測定峰面積，以頭孢克肟進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為Y=1 433．41X－11．82，r=0．999 2(n=6)。結(jié)果表明，頭孢克肟進(jìn)樣量在0．4～2．4 μg范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

精密度試驗(yàn):取同一對照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣5次。結(jié)果峰面積的RSD為0．04%(n=6)，表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn):取同一供試品(批號為2009091001)溶液，于配制后 0．2，2，4，6，8 h 時(shí)分別依法測定。結(jié)果峰面積的RSD為0．65%(n=6)，表明供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

重復(fù)性試驗(yàn):取同一供試品(批號為2009091002)溶液，依法制備5份供試品溶液并測定。結(jié)果含量的RSD為0．45%(n=5)，表明方法重現(xiàn)性良好。

加樣回收試驗(yàn):取已知含量(4．503 mg/g)的樣品約0．26 g，精密稱定。分別精密加入對照品適量，按供試品溶液制備方法制備溶液并測定含量，計(jì)算回收率。結(jié)果見表1。

表1 加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

2．4 樣品含量測定

分別取10批樣品，照供試品溶液制備方法制備溶液20 μL，放入色譜儀;記錄色譜圖，以外標(biāo)法計(jì)算樣品中的頭孢克肟含量，結(jié) 果 批 號 分 別 為 091001，091002，091003，091004，091005，091006，091007，091008，091009，091010 的樣品中的含量分別為44．8，44．6，43．9，43．6，44．2，44．2，43．8，43．9，44．5，44．4 mg/g。

3 討論

本試驗(yàn)采用2010年版《中國藥典(二部)》[1]中頭孢克肟含量測定法，用色譜條件進(jìn)行比較，其中流動(dòng)相為四丁基氫氧化銨溶液(10%四丁基氫氧化銨溶液25 mL，加水1 000 mL，搖勻用1．5 mol/L磷酸調(diào)節(jié) pH 至 3．0)－乙腈(72∶28)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，流速為1．0 mL/min。結(jié)果采用文中所用流動(dòng)相的比例、色譜柱、流速，主峰峰形良好，分離效果最佳。

[1]國家藥典委員會(huì)．中華人民共和國藥典(二部)[M]．北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:184．