周美英，周紅波

(上饒市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,江西 上饒 334000)

乙型肝炎e抗原定量與HBV-DNA定量的關(guān)系及臨床意義

周美英，周紅波

(上饒市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,江西 上饒 334000)

乙型肝炎；HBeAg定量；HBV-DNA定量；時(shí)間分辨免疫熒光；熒光PCR

近年來隨著抗病毒藥物的大量使用，聯(lián)合檢測(cè)乙型肝炎患者乙型肝炎e抗原 (HBeAg)定量、HBV-DNA定量已成為乙型肝炎治療過程中的重要指標(biāo)，HBeAg定量采用時(shí)間分辨免疫熒光分析(TRFIA)是以銪(Eu)作為熒光標(biāo)記物，具有測(cè)量靈敏度高、示蹤物穩(wěn)定、定量線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn)，在抗病毒藥物的選擇、療效觀察、療程確定上有重要意義[1]，現(xiàn)使用DR6608時(shí)間分辨熒光分析系統(tǒng)及美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)中國(guó)公司ABI－7300熒光定量PCR檢測(cè)儀對(duì)579份標(biāo)本進(jìn)行同時(shí)檢測(cè)，對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 597例標(biāo)本均為本院門診部及住院部的乙肝患者，其中男463例，女134例，年齡19～67歲，平均45歲，診斷符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染學(xué)分會(huì)、中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)2010年聯(lián)合制訂的《中國(guó)慢性乙型肝炎防治指南》。清晨空腹靜脈抽血5ml，待血液自然凝固后2500r/min離心15min分離血清。

1.2 試劑與方法 ⑴HBeAg定量采用DR6608時(shí)間分辨免疫熒光(TRFIA)分析，試劑由廣州達(dá)安基因技術(shù)有限公司提供。(2)HBV-DNA采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)進(jìn)行測(cè)定，試劑由廣州達(dá)安基因技術(shù)有限公司提供。⑶結(jié)果判讀：HBeAg定量>1.0S/CO為陽(yáng)性，HBV-DNA定量>100IU/ml判斷為HBV DNA陽(yáng)性。均嚴(yán)格按試劑說明書操作。

1.3 主要儀器 DR6608時(shí)間分辨熒光免疫分析儀,DEM-3型全自動(dòng)洗板機(jī),KG-201C微量振蕩儀，美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)中國(guó)公司ABI－7300熒光定量PCR檢測(cè)儀。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，計(jì)數(shù)資料比較用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用配對(duì)t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HBeAg定量與HBV-DNA定量關(guān)系 201例HBeAg陽(yáng)性患者中HBV-DNA陽(yáng)性195例，陽(yáng)性相符率為97.01%，HBeAg陽(yáng)性患者HBV-DNA陽(yáng)性率顯著大于HBeAg陰性者(P＜0.05)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,見表1

2.2 HBeAg定量值與HBV-DNA定量拷貝值關(guān)系HBV DNA定量值在105～108IU/ml時(shí)，HBeAg定量值與HBV-DNA定量值呈現(xiàn)正相關(guān)(r=0.865)，見表2。

3 討論

臨床資料顯示，HBV病毒復(fù)制活躍的慢性肝病發(fā)生疾病進(jìn)展的危險(xiǎn)性較高，高滴度病毒血癥與肝硬化或肝癌相關(guān)[2]。HBV復(fù)制水平對(duì)判斷患者預(yù)后有重要意義，聯(lián)合檢測(cè)血清HBeAg定量和HBV-DNA含量可直接了解乙肝患者體內(nèi)HBV復(fù)制活躍程度，在抗HBV治療時(shí)有重要意義。

HBV感染人體后，血清中出現(xiàn)大量的HBV Dane顆粒，完整的病毒顆粒含有外衣殼抗原和內(nèi)衣殼抗原，前者包括HbsAg前S1抗原和S2抗原，后者包括HBeAg、HbcAg。 傳統(tǒng)方法檢測(cè)的HBV血清標(biāo)志物 (HBV-M)俗稱 “兩對(duì)半”檢測(cè)的是HBeAg定性試驗(yàn)，隨著臨床檢驗(yàn)科學(xué)的發(fā)展，HBeAg定量檢測(cè)已經(jīng)在臨床中廣泛開展，用具體的數(shù)值反映患者血液中的HBeAg濃度值?！按笕?yáng)”患者定期檢測(cè)HBeAg定量具有重要的臨床意義：(1)HBeAg定量值的高低與HBV-DNA定量有良好的相關(guān)性，一般情況為HBeAg定量值越高說明患者體內(nèi)乙肝病毒復(fù)制越活躍，傳染性越強(qiáng)。(2)HBeAg定量檢測(cè)可以判斷慢性乙肝病毒攜帶者是否會(huì)發(fā)病，通過每4～6個(gè)月定期檢測(cè)HBeAg定量，如果持續(xù)穩(wěn)定地處于較高水平，一般情況是近期不會(huì)出現(xiàn)肝炎發(fā)作；如果HBeAg定量值有比較明顯的下降，再結(jié)合轉(zhuǎn)氨酶的變化，要警惕肝炎活動(dòng)的可能。(3)HBeAg定量檢測(cè)對(duì)抗病毒治療時(shí)機(jī)的選擇有參考價(jià)值。如果HBeAg定量數(shù)值較高，往往反映患者對(duì)乙肝病毒的免疫反應(yīng)較弱，此時(shí)若轉(zhuǎn)氨酶水平不高，在使用抗病毒藥物時(shí)則療效不佳。(4)HBeAg定量檢測(cè)對(duì)于確定抗病毒藥物的療程和判斷是否復(fù)發(fā)具有較大的臨床意義。“大三陽(yáng)”患者在抗病毒治療期間，如果HBeAg定量和HBVDNA定量同步下降，表明抗病毒治療有效；如果HBeAg定量值下降較快，但是HBV-DNA定量下降不明顯，則預(yù)示患者體內(nèi)大部分乙肝病毒在免疫清除和抗病毒藥物的雙重打擊下已經(jīng)發(fā)生了變異，變異病毒將更難治療[3-6]。病毒變異患者使用干擾素治療有效的情況下，停藥后復(fù)發(fā)的概率較高，應(yīng)密切復(fù)查HBeAg定量值和HBV-DNA定量值。

通常認(rèn)為HBeAg陽(yáng)性患者病毒復(fù)制活躍，傳染性強(qiáng)，對(duì)比HBeAg與HBV-DNA的關(guān)系，一般認(rèn)為兩者水平一致。本次實(shí)驗(yàn)表明：201例HBeAg陽(yáng)性患者中HBV-DNA陽(yáng)性195例，兩者陽(yáng)性相符率為97.01%，乙型肝炎患者HBeAg定量陽(yáng)性者HBV-DNA陽(yáng)性率遠(yuǎn)高于HBeAg陰性者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05)；HBeAg陽(yáng)性患者依據(jù)HBVDNA定量值將病例分為5組，HBV-DNA定量≥105IU/ml時(shí)，HBeAg定量值明顯高于HBV-DNA定量＜105IU/ml時(shí)的HBeAg定量值，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，且當(dāng) HBV-DNA定量值在 105～108IU/ml時(shí)，HBeAg定量值與HBV-DNA定量值呈現(xiàn)正相關(guān)(r=0.865)，與黃松潔，林永志等報(bào)道相符[3]，證實(shí)乙型肝炎患者血清中存在HBeAg是病毒復(fù)制活躍的標(biāo)志，同時(shí)也說明HBeAg定量比定性更能反映HBV復(fù)制狀態(tài)。

因此，HBeAg定量檢測(cè)在乙型肝炎的傳染性，病毒復(fù)制水平判斷及抗病毒治療效果評(píng)價(jià)方面具有重要的臨床意義，值得推廣。

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[3]黃松潔，林永志，HBeAg定量與HBV DNA定量的相關(guān)性及臨床意義[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2010，6(7)12：1236.

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R446.62,R512.6+3

B

1674-1129(2012)04-0404-03

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江西省上饒市科技計(jì)劃項(xiàng)目(121C2D21)