吳昊 區(qū)敬華 蒲榮

通脈軟膠囊的制備工藝和含量測定分析

吳昊 區(qū)敬華 蒲榮

目的 對通脈軟膠囊的制備工藝和含量測定方法進行制定，并對方法的可行性進行分析。方法 對通脈軟膠囊的制備工藝進行設(shè)計，使用高效液相色譜法對通脈軟膠囊中的有效成分丹酚酸B的含量進行測定。并考察制備工藝的穩(wěn)定性，以及含量測定的精密性、穩(wěn)定性以及重復(fù)性。結(jié)果使用制備工藝共制備五批樣品，質(zhì)量均穩(wěn)定；丹酚酸B的進樣量在0.05～2.0g的范圍內(nèi)，與色譜峰面積有良好的線性關(guān)系。并且使用高效液相色譜法對通脈軟膠囊的含量進行測定，具有很好的精密性、穩(wěn)定性和重復(fù)性。結(jié)論 該制備工藝符合大規(guī)模生產(chǎn)的條件，劑型的含量穩(wěn)定，使用高效液相色譜法進行質(zhì)量控制可行。

通脈軟膠囊；制備工藝；含量測定

通脈軟膠囊是由通脈口服液經(jīng)過進行改變而制成，主要中藥成分是丹參、川芎和葛根，具有活血通脈的功效，臨床上主要用于治療動脈硬化、腦血栓、冠心病等心腦血管疾病[1]。本文通過對通脈軟膠囊的制備工藝進行設(shè)計，使用高效液相色譜法對通脈軟膠囊中的有效成分丹皮酚酸B的含量進行測定?？疾煸摴に嚨姆€(wěn)定性以及質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 膠體磨，軟膠囊機成套設(shè)備，高效液相色譜儀,電子分析天平，超聲儀，紫外可見分光光度計。對照品為中國藥品生物制品鑒定所生產(chǎn)的丹酚酸B，批號10032-200701；水為純化水；甲醇為色譜純；其他試劑全部為分析純。

1.2 方法[2]

1.2.1 制備工藝 使用水提取1250g川芎中的揮發(fā)油，再將1250g丹參和1250g葛根同川芎的殘渣一同用水煎煮，連續(xù)兩次，第一次一個半小時，第二次一個小時，將煎液合并，濾過后進行濃縮，將濾液濃縮至其相對密度在50℃時為1.20～1.22，放冷后，上大孔樹脂柱，使用濃度為50%的乙醇進行洗滌，收集洗滌液，進行乙醇回收直至沒有醇味后，再濃縮至其相對密度在50℃時為1.14～1.16，使用噴霧干燥法進行干燥，得到干粉后，加入從川芎中提取出的揮發(fā)油以及適量的大豆油，進行混勻，制成1000粒軟膠囊。

1.2.2 含量測定

1.2.2.1 對照品溶液制備 精密稱取對照品丹酚酸B[3]適量，加適量甲醇溶液，進行超聲溶液后制成濃度為0.025mg/ml的對照品溶液。

1.2.2.2 供試品溶液制備 精密稱取按此工藝生產(chǎn)出的同批次通脈軟膠囊的內(nèi)容物2g放入100ml錐形瓶中，精密移取50ml甲醇溶液對通脈軟膠囊的內(nèi)容物進行溶解，精密稱定質(zhì)量，超聲溶解后，進行再次精密稱重使用甲醇溶液補足重量，搖均后濾過即得供試品溶液。

1.2.2.3 色譜條件設(shè)定 使用Puresil-C18（4.6mm× 150mm,5m）的色譜柱；甲醇—乙腈—水溶液為流動相；流速為1.0ml/min；柱溫為30℃；檢測波長為286nm；進樣量為10μL。

1.2.2.4 線性關(guān)系考察 精密稱取對照品丹酚酸B適量，放置在100ml的容量瓶中，使用甲醇溶解液進行稀釋，稀釋至刻度線，搖勻后使用流動相溶液分別制取0.005g/L，0.025g/L，0.05g/L，0.1g/L，0.2g/L的丹酚酸B對照品溶液[4]。分別吸取10μL，依次進樣后，以色譜峰面積做為縱坐標(biāo)(Y),以丹酚酸B的進樣量做為橫坐標(biāo)(X)，測定出丹酚酸B的回歸方程。

1.2.2.5 精密度的試驗 進行精密吸取丹酚酸B對照品溶液10μL,在“色譜設(shè)定條件”下，連續(xù)進樣五次,對色譜圖進行記錄，得出丹酚酸B的峰面積相對標(biāo)準(zhǔn)偏差—RSD。

1.2.2.6 穩(wěn)定性的試驗 分別精密吸取同一批次的供試品溶液10μL,分別在0h、1h、2h、3h、4h、6h、8h、12 h、18h、24h進樣進行測定，記錄所測量色譜圖，測得峰面積相對標(biāo)準(zhǔn)偏差—RSD。

1.2.2.7 重復(fù)性試驗 分別精密稱取同一批次通脈軟膠囊樣品五份，按“供試品溶液的制備方法”項的制備方法，制備五份供試品溶液，并按“色譜設(shè)定條件”項進行分別測定，計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差—RSD。

2 結(jié)果

2.1 制備工藝 使用制備工藝共制備五批樣品，質(zhì)量均穩(wěn)定，證明該制備工藝符合大規(guī)模生產(chǎn)的條件。

2.2 含量測定

2.2.1 線性關(guān)系考察 測定出丹酚酸B的回歸方程為（Y＝342522X-243.15，r=0.9999，n=5），該試驗證明丹酚酸B的進樣量在0.05～2.0g的范圍內(nèi)，與色譜峰面積有良好的線性關(guān)系。

2.2.2 精密度考察 得出丹酚酸B的峰面積相對標(biāo)準(zhǔn)偏差—RSD為1.2%，試驗結(jié)果表明使用該法對通脈軟膠囊的主要成分丹酚酸B的含量進行測量精密度良好。

2.2.3 穩(wěn)定性考察 測得峰面積相對標(biāo)準(zhǔn)偏差—RSD是0.8%，結(jié)果顯示供試在進行制備后24h內(nèi)進行測定，其試驗結(jié)果均穩(wěn)定。

2.2.4 重復(fù)性考察 結(jié)果顯示相對標(biāo)準(zhǔn)偏差—RSD分別是1.2%。試驗結(jié)果表明，使用高效液相色譜法進行通脈軟膠囊的含量測定具有良好的重復(fù)性。

3 討論

3.1 制備工藝特點 通脈軟膠囊的內(nèi)容物為混懸液，具有生物利用度高、穩(wěn)定性好、掩蓋藥物氣味、外形美觀的優(yōu)點，目前具有比較良好的市場前景以及經(jīng)濟效益[5]。本文在對丹參、葛根、川芎的有效成分提取中[6]，首先對川芎的揮發(fā)油進行提取，不但減少了大豆油的使用量，也同時增加了通脈軟膠囊的療效，再用水煎煮濃縮的方法對丹參、川芎的殘渣、葛根進行提取，不但很好的保存了這三味中藥的有效成分，也同時對有效成分進行了精提，使患者的服用量更少，效果更理想。通脈軟膠囊所使用的軟膠囊殼使用的主要原料是明膠、甘油和水，使用軟膠囊的形式進行包裝具有較口服液更加良好的保護、隔離作用，能將藥物和空氣和光線進行有效的隔離，避免藥物中的有效成分出現(xiàn)氧化，可以更有效地保持產(chǎn)品在其有效期內(nèi)更好的保持有效成分的含量穩(wěn)定，并可以保證藥物功效的更好發(fā)揮。使用軟膠囊進行包裝，藥物的定量更加準(zhǔn)確，吸收更加快。使用大規(guī)模的機器生產(chǎn)進行定量的灌裝，并且使用軟膠囊進行包裝，其劑量的誤差更加小，流入市場后患者的使用量更加穩(wěn)定，更重的是軟膠囊在患者的體內(nèi)經(jīng)過崩解后，其內(nèi)容物可以很快被其身體所吸收。

3.2 含量測定波長的設(shè)定 在進行含量測試時，先稱取適量丹酚酸B的對照品，并加入甲醇適量制備成溶液，在200～800nm的波長范圍內(nèi)進行掃描，測得丹酚酸B在286nm的波長處的吸收比較大，所以在色譜條件的設(shè)定上，將波長測定為286nm。

3.3 含量測定的溫度設(shè)定 在進行含量測定前，首先使用不同的柱溫對含量測定，發(fā)現(xiàn)如果溫度低于30℃，因為流動相黏度比較大，會出現(xiàn)柱壓的升高，而基線發(fā)生漂移；同時當(dāng)柱溫高出30℃，會因為柱溫比較高而出現(xiàn)有效成分的分離度變差；所以在進行含量測定時設(shè)定的柱溫為30℃。

[1] 馮素香，謝彩俠，王淑美，等.通脈軟膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].廣東藥學(xué)學(xué)報，2008,24（5）：466-468.

[2] 孟秀芬，孫君輝.通脈軟膠囊的提取工藝研究[J].山東商業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報，2011，11（5）：85-105.

[3] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：中國醫(yī)藥出版社，2010：52.

[4] 張國良，王國振.通脈軟膠囊的制備工藝和含量測定[J].中國藥業(yè)，2010,19（18）：52-53.

[5] 梅林，宋世遠(yuǎn)，熊云，等.通脈膠囊中葛根素和丹參酮的含量測定[J].激光雜志，2009,30（1）：97.

[6] 覃偉.高效液相色譜法測定通脈顆粒中葛根素的含量[J].中國藥業(yè)，2005,14（4）：38-39.

Objective To soft capsule preparation technics and content determination method for making, and method of feasibility analysis. Methods The soft capsule preparation process design, using high-performance liquid chromatography on Tongmai Capsule in the effective constituent salvianolic acid B content determination. Inspection and preparation process of stability, and the determination of the precision, stability and reproducibility. Results The use of preparation process, preparation of f ve batches of samples, quality stability; salvianolic acid B sample volume in 0.05 g to 2 within g, and chromatographic peak area there is a good linear relationship. And the use of high-performance liquid chromatography for the soft capsule content determination, has good precision and stability and repeatability. Conclusion The preparation process in accordance with the conditions of mass production, dosage forms in stability, using high-performance liquid chromatography in quality control of feasible.

Soft capsule; Preparation technology; Content determination

10.3969/j.issn.1009-4393.2012.12.025

523005 東莞市中醫(yī)院臨床藥學(xué)室 （吳昊） 510080 中山大學(xué)藥學(xué)院（區(qū)敬華） 523400 東莞市寮步醫(yī)院（蒲榮）