劉亭婷 滑 靜 王曉霞 劉莉如 海 鵬

隨著抗生素作為飼料添加劑的廣泛應(yīng)用，它的弊端也逐漸被人們所認(rèn)識(shí)，如導(dǎo)致動(dòng)物胃腸道正常菌群失調(diào)，產(chǎn)生耐藥性和藥物殘留等副作用，給畜禽和人類的健康都帶來(lái)了危害，有些國(guó)家已從立法上限制了抗生素的使用。因此，尋求綠色、無(wú)公害并能夠提高畜禽營(yíng)養(yǎng)素利用率和免疫功能的添加劑越來(lái)越受到人們的關(guān)注。研究發(fā)現(xiàn)，微生態(tài)制劑能夠提高飼料報(bào)酬、促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)、降低幼畜禽死亡率、防治消化道疾病等［1］。丁酸梭菌是普遍存在于人和動(dòng)物腸道內(nèi)的一種益生菌，丁酸梭菌代謝可以產(chǎn)生丁酸，從而抑制腸道有害菌生長(zhǎng)和繁殖，同時(shí)刺激黏膜免疫；還可以產(chǎn)生B族維生素、維生素K、葉酸和多種酶類物質(zhì)等，對(duì)機(jī)體有重要的生理功能。目前，對(duì)該菌的研究主要集中在人的腹瀉、炎癥性腸病的防治與預(yù)防上，然而，在動(dòng)物，尤其在蛋用仔公雞生產(chǎn)上應(yīng)用的研究鮮有報(bào)道。本試驗(yàn)旨在通過(guò)在蛋用仔公雞基礎(chǔ)飼糧中添加丁酸梭菌，測(cè)定蛋用仔公雞的生長(zhǎng)性能、免疫器官指數(shù)和血清免疫指標(biāo)等，來(lái)探討該菌對(duì)生長(zhǎng)和免疫的影響，并從分子水平探討丁酸梭菌對(duì)機(jī)體細(xì)胞因子的影響機(jī)理，為其在家禽生產(chǎn)中的應(yīng)用提供科學(xué)理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

丁酸梭菌由浙江惠嘉生物科技有限公司提供，其中活菌數(shù)≥1.0×108CFU／g。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼糧組成

試驗(yàn)采用單因子完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，選用1日齡健康的海蘭褐蛋用仔公雞240只，平均體重為（39.36±0.11）g，隨機(jī)分為6組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只雞。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，抗生素組飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加150 mg／kg金霉素的飼糧，試驗(yàn)組飼喂分別在基礎(chǔ)飼糧中添加250、500、750、1 000 mg／kg丁酸梭菌的飼糧。基礎(chǔ)飼糧是根據(jù)美國(guó)NRC（1994）推薦的肉仔雞營(yíng)養(yǎng)需要配制的玉米－豆粕型飼糧，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)雞采用3層籠養(yǎng)，自由采食和飲水，光照、溫度和濕度嚴(yán)格按照常規(guī)飼養(yǎng)管理要求進(jìn)行，按照常規(guī)免疫程序進(jìn)行免疫，并定期清掃雞舍和消毒保持雞舍清潔衛(wèi)生。試驗(yàn)期為42 d。

1.4 檢測(cè)指標(biāo)與方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能指標(biāo)

試驗(yàn)雞空腹12 h，以重復(fù)為單位分別在試驗(yàn)的第14、28和42天稱重結(jié)料，并記錄死亡雞只數(shù)，及時(shí)結(jié)料用于計(jì)算平均體重（average body weight，ABW）、平均日采食量（average daily feed intake，ADFI）、平 均 日 增 重 （average daily gain，ADG）和料重比（f eed／gain ratio，F(xiàn)／G）。

1.4.2 免疫器官指數(shù)

于試驗(yàn)的第42天對(duì)試驗(yàn)雞無(wú)菌采樣，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)取1只雞稱重后屠宰，屠宰時(shí)采血，制備血清，樣品于－20℃保存待測(cè)。摘取胸腺、脾臟和法氏囊，剔除脂肪后稱鮮重。用所得的免疫器官重與體重的比計(jì)算免疫器官指數(shù)［公式：免疫器官指數(shù)（g／kg）＝免疫器官重（g）／體重（kg）］。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）Table 1 Co mposition and nutrient levels of the basal diet（air－dry basis） %

1.4.3 血清免疫指標(biāo)

血清中的免疫球蛋白G（Ig G）、免疫球蛋白A（Ig A）和免疫球蛋白M（Ig M）含量采用免疫透射比濁法進(jìn)行測(cè)定，補(bǔ)體3（C3）、補(bǔ)體4（C4）含量采用ELISA試劑盒檢測(cè)，溶菌酶活性測(cè)定采用比色法，所用試劑盒均購(gòu)于北京康源瑞得生物技術(shù)有限公司。

1.4.4 空腸組織中相關(guān)細(xì)胞因子的基因mRNA相對(duì)表達(dá)水平

1.4.4.1 引物設(shè)計(jì)與合成

根據(jù)Gen Bank公布的雞基因序列設(shè)計(jì)引物如表2，引物由北京優(yōu)博奧生物技術(shù)有限公司合成。

表2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物序列Table 2 Pri mer sequences f or fluorescence－based quantitative real－ti me PCR

1.4.4.2 組織樣本總RNA的提取和反轉(zhuǎn)錄

用超純 RNA提取試劑盒（CWbio.Co.，Ltd.，Cat＃CW0581）提取組織樣本中總 RNA。操作按照產(chǎn)品說(shuō)明書進(jìn)行。對(duì)所提取的RNA進(jìn)行檢測(cè)，判斷有無(wú)污染。c DNA合成按Hi Fi－MMLV c DNA第1鏈合成試劑盒（CWbio.Co.，Ltd.，Cat＃CW0744）說(shuō)明書操作。

1.4.4.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增條件

采用20μL反應(yīng)體系：Real SYBR Mixture（2×）10μL，10μmol／L上、下游引物各0.4μL，c DNA 2μL，加入去離子水至20μL。反應(yīng)條件：95℃10 min，（95℃15 s，60℃60 s）×40個(gè)循環(huán)。

1.4.4.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

本試驗(yàn)以逆轉(zhuǎn)錄的c DNA作為待測(cè)基因的標(biāo)準(zhǔn)品，制作各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線。具體方法如下：取逆轉(zhuǎn)錄的c DNA樣本，進(jìn)行5倍梯度稀釋，每個(gè)稀釋度設(shè)3組重復(fù)，進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)，采用2－△△Ct法分析待測(cè)空腸組織中相關(guān)細(xì)胞因子白細(xì)胞介素－6（IL－6）、干擾素－γ（IFN－γ）、腫瘤壞死因子－α（TNF－α）的基因mRNA相對(duì)表達(dá)水平。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和處理

所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)均用Excel進(jìn)行初步處理，應(yīng)用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，用one－way ANOVA比較各組間相關(guān)指標(biāo)的差異，采用最小顯著級(jí)差法對(duì)差異顯著的數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較。試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 結(jié) 果

2.1 飼糧中丁酸梭菌水平對(duì)蛋用仔公雞生長(zhǎng)性能的影響

由表3可知，蛋用仔公雞在1 4日齡時(shí)500 mg／kg 添 加 組、750 mg／kg 添 加 組、1 000 mg／kg添加組的平均體重顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），750 mg／kg添加組為最大值，但與其他試驗(yàn)組間差異不顯著（P＞0.05），各試驗(yàn)組與抗生素組相比也差異不顯著（P＞0.05）。28日齡時(shí)，1 000 mg／kg添加組的平均體重顯著高于對(duì)照組和抗生素組（P＜0.05），42日齡時(shí)，顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。

試驗(yàn)期間，平均日增重最高的是1 000 mg／kg添加組，比對(duì)照組高出10.26%（P＜0.05），其他各組間差異不顯著（P＞0.05）。

各組的平均日采食量、料重比均差異不顯著（P＞0.05），但各試驗(yàn)組平均日采食量隨著飼糧中丁酸梭菌添加量的增加有增加的趨勢(shì)，料重比則有下降的趨勢(shì)。

2.2 飼糧中丁酸梭菌水平對(duì)蛋用仔公雞免疫器官指數(shù)的影響

所有屠宰的蛋用仔公雞免疫器官外觀均未見異常。由表4可知，42日齡時(shí)，各試驗(yàn)組胸腺指數(shù)均在一定程度上高于對(duì)照組，但差異不顯著（P＞0.05），各試驗(yàn)組之間也差異不顯著（P＞0.05），但胸腺指數(shù)隨著飼糧中丁酸梭菌添加量的增加而呈現(xiàn)出遞增趨勢(shì)。

1 000 mg／kg添加組的脾臟指數(shù)最高，比對(duì)照組提高了24.87%（P＜0.05），比抗生素組提高了10.55%（P＞0.05），其他各試驗(yàn)組也比對(duì)照組略有升高，但與對(duì)照組和抗生素組均差異不顯著（P＞0.05）。

各組之間的法氏囊指數(shù)均差異不顯著（P＞0.05）。

表3 飼糧中丁酸梭菌水平對(duì)蛋用仔公雞生長(zhǎng)性能的影響Table 3 Effects of dietar y Clostridiu m butyricu m level on gr owth perf or mance of egg－laying male chicks

表4 飼糧中丁酸梭菌水平對(duì)42日齡蛋用仔公雞胸腺、脾臟、法氏囊指數(shù)的影響Table 4 Effects of dietary Clostridiu m butyricu m level on the indices of thy mus，spleen and bursa of Fabricius of egg－laying male chicks aged 42 days

2.3 飼糧中丁酸梭菌水平對(duì)蛋用仔公雞血清免疫指標(biāo)的影響

由表5可知，隨著飼糧中丁酸梭菌添加量的增加，檢測(cè)的蛋用仔公雞各項(xiàng)血清免疫指標(biāo)均有增加的趨勢(shì)。1 000 mg／kg添加組對(duì)試驗(yàn)期各免疫指標(biāo)的影響最大。

42日齡時(shí)，各添加組血清Ig G的含量與對(duì)照組相比均顯著提高（P＜0.05），750 mg／kg添加組、1 000 mg／kg添加組血清Ig G的含量與抗生素組相比均有提高，差異顯著（P＜0.05），試驗(yàn)組中血清Ig G含量最高的是1 000 mg／kg添加組，與250 mg／kg添加組、500 mg／kg添加組相比差異顯著（P＜0.05）。

1 000 mg／kg添加組血清Ig A的含量最高，顯著高 于 對(duì) 照 組 和 抗 生 素 組 （P＜0.05），與250 mg／kg添加組、500 mg／kg添加組相比也均差異顯著（P＜0.05），但與750 mg／kg添加組相比差異不顯著（P＞0.05）。

各試驗(yàn)組血清Ig M含量與對(duì)照組和抗生素組相比差異不顯著（P＞0.05）。

血清C3含量的檢測(cè)結(jié)果顯示，各試驗(yàn)組血清C3含量與對(duì)照組相比顯著提高（P＜0.05），除250 mg／kg添加組外，其余各試驗(yàn)組血清C3含量與抗生素組相比也顯著提高（P＜0.05），其中1 000 mg／kg添加組血清C3含量最高，比對(duì)照組提高62.82%，比抗生素組提高51.18%，各試驗(yàn)組之間差異不顯著（P＞0.05）。

血清C4的含量隨著丁酸梭菌添加量的增加有增加趨勢(shì)，但組間差異不顯著（P＞0.05），與對(duì)照組相比也均差異不顯著（P＞0.05）。

各試驗(yàn)組血清溶菌酶活性與對(duì)照組相比均略有提高，但差異不顯著（P＞0.05）。

表5 飼糧中丁酸梭菌水平對(duì)42日齡蛋用仔公雞血清Ig G、IgA、Ig M、C3、C4含量和溶菌酶活性的影響Table 5 Effects of dietary Clostridiu m butyricu m level on the contents of Ig G，Ig A，Ig M，C3 and C4 and the activity of lysozy me in ser u m of egg－laying male chicks aged 42 days

2.4 飼糧中丁酸梭菌水平對(duì)蛋用仔公雞空腸組織中IL－6、IFN－γ 及 TNF－α mRNA 相 對(duì) 表 達(dá)水平的影響

由表6可知，關(guān)于42日齡時(shí)蛋用仔公雞空腸組織中IL－6 mRNA相對(duì)表達(dá)水平，750 mg／kg添加組、1 000 mg／kg添加組與對(duì)照組相比顯著降低（P＜0.05），與 抗 生 素 組 均 差 異 不 顯 著 （P＞0.05），250 mg／kg添加組、500 mg／kg添加組與對(duì)照組和抗生素組均差異不顯著（P＞0.05），各試驗(yàn)組之間差異也不顯著（P＞0.05）。

關(guān)于IFN－γmRNA相對(duì)表達(dá)水平，各試驗(yàn)組與對(duì)照組和抗生素組相比均差異不顯著（P＞0.05），各試驗(yàn)組之間也差異不顯著（P＞0.05），但隨著飼糧中丁酸梭菌添加量的增加，蛋用仔公雞空腸組織中IFN－γmRNA相對(duì)表達(dá)水平呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)。

關(guān)于TNF－αmRNA相對(duì)表達(dá)水平，1 000 mg／kg添加組最低，與對(duì)照組相比差異顯著（P＜0.05），比對(duì)照組降低了45.91%，與抗生素組差異不顯著（P＞0.05），其余各試驗(yàn)組與對(duì)照組和抗生素組均差異不顯著（P＞0.05），各試驗(yàn)組之間也差異不顯著（P＞0.05）。

表6 飼糧中丁酸梭菌水平對(duì)42日齡蛋用仔公雞空腸組織中IL－6、IFN－γ及TNF－αmRNA相對(duì)表達(dá)水平的影響Table 6 Eff ects of dietary Clostridiu m butyricu m level on IL－6，IFN－γand TNF－α mRNA relative expression levels in jejunu m tissue of egg－laying male chicks aged 42 days

3 討 論

3.1 飼糧中丁酸梭菌水平對(duì)蛋用仔公雞生長(zhǎng)性能的影響

畜禽平均日增重和料重比是反映丁酸梭菌飼喂效果的重要指標(biāo)。丁酸梭菌的促生長(zhǎng)作用已經(jīng)被很多試驗(yàn)證實(shí)。杜云平等［2］研究表明，基礎(chǔ)飼糧中添加0.3%的丁酸梭菌制劑能夠改善肉雞的生產(chǎn)性能，有提高日增重、降低料重比的趨勢(shì)，還有效預(yù)防了腸炎的發(fā)生，提高了肉雞的抗病力和免疫力。楊欣［3］在不同油脂類型飼糧中添加丁酸梭菌飼喂肉仔雞，顯著降低了肉仔雞盲腸食糜p H，顯著增加了盲腸乳酸桿菌數(shù)，同時(shí)還顯著增加了盲腸中丁酸、乙酸、戊酸及總短鏈脂肪酸含量和空腸黏膜堿性磷酸酶活性，這表明丁酸梭菌可以提高腸道食糜中主要代謝產(chǎn)物丁酸的含量，降低p H，進(jìn)而抑制大腸桿菌等有害菌生長(zhǎng)，促進(jìn)乳酸菌等有益菌的繁殖，并進(jìn)一步增加其他短鏈脂肪酸的含量，從而改善腸道環(huán)境，起到促生長(zhǎng)的作用。Araki等［4－6］報(bào)道，丁酸梭菌在腸道內(nèi)能產(chǎn)生丁酸、B族維生素、維生素K、葉酸等物質(zhì)，對(duì)機(jī)體具有保健作用，還能產(chǎn)生淀粉酶、蛋白酶、纖維素酶等，這些酶系有重要的生理功能，這可能也是丁酸梭菌改善動(dòng)物生長(zhǎng)性能的機(jī)理之一。本試驗(yàn)結(jié)果表明，丁酸梭菌添加水平為1 000 mg／kg時(shí)，平均日增重最高，料重比最小，說(shuō)明適宜的丁酸梭菌添加水平對(duì)蛋用仔公雞的生長(zhǎng)性能有一定的促進(jìn)作用。但蛋用仔公雞42日齡時(shí)體重總體上偏低，推測(cè)可能在試驗(yàn)后期飼養(yǎng)環(huán)境溫度較高，超過(guò)了生長(zhǎng)適宜溫度范圍，仔公雞采食量下降，導(dǎo)致42日齡時(shí)平均體重偏低。

3.2 飼糧中丁酸梭菌水平對(duì)蛋用仔公雞免疫器官指數(shù)的影響

胸腺、脾臟和法氏囊是禽類的重要免疫器官。胸腺和法氏囊是雞的中樞免疫器官，胸腺參與機(jī)體非特異性免疫，對(duì)細(xì)胞免疫以及體液免疫都有重要的調(diào)節(jié)作用。法氏囊是禽類特有的，是B細(xì)胞分化成熟的場(chǎng)所。脾臟是禽類最大的外周免疫器官，是機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫的中心，是產(chǎn)生致敏淋巴細(xì)胞和抗體的重要場(chǎng)所。上述3個(gè)器官的發(fā)育狀態(tài)和機(jī)能強(qiáng)弱直接影響家禽全身的免疫水平。一般認(rèn)為免疫器官質(zhì)量增加是由于其自身細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育和分裂增殖所致，是免疫增強(qiáng)的表現(xiàn)，免疫指數(shù)的提高表明該器官成熟快。本試驗(yàn)的結(jié)果表明，42日齡時(shí)，蛋用仔公雞的胸腺指數(shù)和法氏囊指數(shù)與對(duì)照組均差異不顯著，但隨著飼糧中丁酸梭菌添加量的增加均有升高的趨勢(shì)，1 000 mg／kg丁酸梭菌添加組的脾臟指數(shù)，雖與抗生素組相比差異不顯著，但顯著高于對(duì)照組，這表明丁酸梭菌對(duì)蛋用仔公雞生長(zhǎng)發(fā)育前期的免疫器官發(fā)育有積極作用，能夠促進(jìn)仔公雞免疫系統(tǒng)發(fā)育，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)外界刺激的抵抗能力，達(dá)到健康生長(zhǎng)的目的。

3.3 飼糧中丁酸梭菌水平對(duì)蛋用仔公雞血清免疫指標(biāo)的影響

免疫是機(jī)體識(shí)別和排除抗原性異物、保持體內(nèi)外平衡的生理反應(yīng)。動(dòng)物機(jī)體的免疫功能主要是通過(guò)免疫分子（免疫球蛋白、細(xì)胞因子和補(bǔ)體）來(lái)發(fā)揮作用，提高抗體免疫應(yīng)答能力。免疫球蛋白（Ig G、Ig A、Ig M等）是主要的免疫分子。Ig G是單體免疫球蛋白，其血清含量遠(yuǎn)高于其他免疫球蛋白，且維持時(shí)間長(zhǎng)，是機(jī)體抗感染的主要力量。Ig M產(chǎn)生時(shí)間最早，其調(diào)理、殺菌和凝集作用均強(qiáng)于Ig G，但半衰期短，作用范圍窄，在感染早期起先鋒免疫作用。Ig A是外分泌液中的主要免疫球蛋白，在保護(hù)腸道、呼吸道等抵抗微生物入侵方面起關(guān)鍵作用，能凝集顆粒性抗原和中和病毒。C3、C4是補(bǔ)體系統(tǒng)中含量最多、最重要的組成部分，對(duì)免疫功能起著重要的作用，它們?cè)跈C(jī)體防御過(guò)程中可以通過(guò)調(diào)理吞噬、裂解細(xì)胞、清除免疫復(fù)合物等機(jī)理對(duì)病原微生物進(jìn)行清除及活化炎性細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞的殺傷作用。溶菌酶主要由巨噬細(xì)胞分泌，是非特異性免疫的效應(yīng)物，通過(guò)降解細(xì)菌多糖細(xì)胞壁殺滅細(xì)菌，保護(hù)機(jī)體免受感染［7］。

張彩云等［8］選用160頭21日齡杜×長(zhǎng)×大斷奶仔豬作研究，結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，飼糧中添加丁酸梭菌組血清中Ig G和C3含量顯著提高，還具有提高血清Ig A含量的趨勢(shì)。宋增福［9］的研究表明了丁酸梭菌對(duì)鮸魚消化酶、體液免疫等方面的影響，該菌可以提高鮸魚腸道消化酶、血清和體表黏液溶菌酶等的活性，增加血漿中的Ig M含量。上述報(bào)道與本研究相一致，本試驗(yàn)的結(jié)果表明，丁酸梭菌可以提高血清中Ig G、Ig A、C3的含量，1 000 mg／kg添加組顯著高于對(duì)照組和抗生素組，說(shuō)明一定劑量的丁酸梭菌可提高機(jī)體的體液免疫水平，改善蛋用仔公雞免疫功能，增強(qiáng)疾病抵抗力。

3.4 飼糧中丁酸梭菌水平對(duì)蛋用仔公雞空腸組織中IL－6、IFN－γ 及 TNF－α mRNA 相 對(duì) 表 達(dá)水平的影響

細(xì)胞因子包括淋巴因子、干擾素、白細(xì)胞介素、腫瘤壞死因子、趨勢(shì)化因子等，主要是由免疫細(xì)胞分泌的能調(diào)節(jié)細(xì)胞功能的參與炎癥反應(yīng)、免疫反應(yīng)、創(chuàng)傷愈合等過(guò)程的蛋白質(zhì)和小分子多肽組成［10］。IL－6、TNF－α是黏膜免疫中介導(dǎo)炎癥的細(xì)胞因子，在急慢性炎癥反應(yīng)中起重要作用，IFN－γ是獲得性免疫的細(xì)胞因子，可介導(dǎo)獲得性免疫的3個(gè)時(shí)相，使機(jī)體獲得性免疫得到加強(qiáng)［11］。IL－6等前炎癥細(xì)胞因子可促進(jìn)免疫細(xì)胞增殖和分化，從而提高動(dòng)物機(jī)體的抵抗力。有試驗(yàn)證明，丁酸梭菌對(duì)于葡聚糖硫酸鈉（DSS）誘導(dǎo)的急性潰瘍性結(jié)腸炎（UC）小鼠有治療作用，可以抑制TNF－α的基因表達(dá)［12］。其實(shí)，在正常情況下，這些細(xì)胞因子的過(guò)度分泌會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生負(fù)面影響，即導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的重新分配，將用于維持生長(zhǎng)和骨骼肌沉積的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)向于維持免疫反應(yīng)，從而降低營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用效率，最終影響機(jī)體生長(zhǎng)［13］。這說(shuō)明正常的生理情況下，沒(méi)有病毒或其他誘生劑的作用，機(jī)體的免疫功能處于平穩(wěn)狀態(tài)，細(xì)胞因子的分泌受到一定程度的抑制，對(duì)于機(jī)體是有利的。本試驗(yàn)的結(jié)果表明，1 000 mg／kg丁酸梭菌添加組與對(duì)照組相比顯著降低了IL－6和TNF－αmRNA相對(duì)表達(dá)水平，IFN－γmRNA相對(duì)表達(dá)水平與對(duì)照組差異不顯著，但隨著丁酸梭菌添加量的增加也呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)。分析其作用機(jī)理可能與丁酸的作用密不可分，丁酸梭菌的主要代謝產(chǎn)物是丁酸，丁酸能夠促進(jìn)動(dòng)物腸道的上皮細(xì)胞繁殖，尤其對(duì)于炎癥性腸疾病，具有腸道黏膜修復(fù)和逆轉(zhuǎn)黏膜通透性增加的功能，并且丁酸能夠刺激腸道黏膜免疫活性，影響參與免疫調(diào)節(jié)的某些細(xì)胞因子等［14－16］。另外一個(gè)原因可能是與其對(duì)腸道微生物群平衡的調(diào)整有關(guān)，益生菌的增加，導(dǎo)致致病菌和潛在致病菌無(wú)法或較少與腸黏膜接觸，其啟動(dòng)下游事件的能力被降低，結(jié)果表現(xiàn)為各種促炎細(xì)胞因子、組織因子表達(dá)的下調(diào)，從而免疫功能增強(qiáng)，抑制炎癥［17］。也有一些試驗(yàn)結(jié)果與本試驗(yàn)不一致，可能是由于各試驗(yàn)所使用的菌株、試驗(yàn)地點(diǎn)、試驗(yàn)時(shí)間（季節(jié)）、飼養(yǎng)條件、動(dòng)物生理狀態(tài)的不同而導(dǎo)致的。

4 結(jié) 論

① 本試驗(yàn)條件下，飼糧中添加適量丁酸梭菌可以促進(jìn)蛋用仔公雞的生長(zhǎng)，提高平均體重和日增重，降低料重比。

② 飼糧中添加適量丁酸梭菌可以提高免疫器官指數(shù)，促進(jìn)免疫器官發(fā)育；能夠增加血清中Ig G、Ig A等免疫指標(biāo)的含量，增強(qiáng)免疫功能。

③ 飼糧中添加適量丁酸梭菌可以降低空腸組織中IL－6、IFN－γ 及 TNF－α mRNA 相 對(duì) 表 達(dá) 水平，從而增強(qiáng)機(jī)體的免疫力，減輕腸道炎癥的發(fā)生。

④ 本試驗(yàn)條件下，1 000 mg／kg的添加量效果最好。

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