王敏珠，張莉，錢夢(mèng)蘭

1 國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局杭州醫(yī)療器械質(zhì)監(jiān)督檢驗(yàn)中心，浙江，杭州，310002

2 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院，浙江，杭州，310002

眼科手術(shù)用全氟辛烷純度分析

【作者】王敏珠1，張莉1，錢夢(mèng)蘭2

1 國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局杭州醫(yī)療器械質(zhì)監(jiān)督檢驗(yàn)中心，浙江，杭州，310002

2 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院，浙江，杭州，310002

眼科手術(shù)用全氟辛烷經(jīng)紅外光譜法定性后，采用氣相色譜-FID檢測(cè)器進(jìn)行純度分析，對(duì)其含有的代表雜質(zhì)1-氫全氟正辛烷進(jìn)行探討和研究。1-氫全氟正辛烷在線性范圍內(nèi)加標(biāo)回收率為93% ～97%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2%。上述方法操作簡(jiǎn)單、方法穩(wěn)定、準(zhǔn)確，為今后眼科手術(shù)用全氟辛烷的質(zhì)量控制項(xiàng)目納入醫(yī)療器械行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)提供參考。

氣相色譜法；紅外光譜法；眼科手術(shù)；全氟辛烷

0 引言

全氟化碳是一種無(wú)毒、無(wú)色透明的惰性液體，具有高穩(wěn)定性、低運(yùn)動(dòng)黏度和較高比重,這些特性使它對(duì)視網(wǎng)膜下方巨大裂孔產(chǎn)生的封閉作用優(yōu)于硅油[1]。因此，它被廣泛應(yīng)用于增值性玻璃體視網(wǎng)膜病變、巨大視網(wǎng)膜病變、晶體全脫位，人工晶體下沉以及脈絡(luò)膜上腔出血等。但全氟化碳液體術(shù)中可能會(huì)殘留于眼內(nèi)，在無(wú)晶體等情況下會(huì)進(jìn)入前房，與角膜接觸，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床均有報(bào)道[2-4]全氟化碳液體引起角膜水腫、炎癥和新生血管等病癥。目前，針對(duì)全氟化碳對(duì)角膜毒性影響的實(shí)驗(yàn)研究比較多[5]，Stolba等[6]通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)用不同劑量(0.8 mL和0.2 mL)全氟化碳填充玻璃體腔，對(duì)視網(wǎng)膜損害程度有明顯差異。而對(duì)于其本身的化學(xué)物質(zhì)和雜質(zhì)，如分子中含有羥基成分和不穩(wěn)定的碳鍵，在不純狀態(tài)時(shí)含有氫鍵和氟羥鍵[7]，研究試驗(yàn)則比較少，行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中也無(wú)相關(guān)檢測(cè)方法。Flores-aguilar等[8]報(bào)道在不全氟化物中，氫原子可以很容易地從分子中釋放出來(lái)，產(chǎn)生具有潛在損害作用的自由基,作用于前房角膜組織，使小梁組織變性及結(jié)構(gòu)破壞，影響房水流出。從毒理學(xué)角度考慮，這可能是引起病發(fā)癥的重要原因。因此，為了降低對(duì)角膜毒性，保護(hù)患者在眼科手術(shù)中的安全，對(duì)全氟化碳液體的純度研究和控制非常重要。本實(shí)驗(yàn)選擇適當(dāng)?shù)臉悠非疤幚矸椒ê蛢x器檢測(cè)條件，對(duì)全氟辛烷其可能含有的不全氟化物進(jìn)行詳細(xì)分析，確定其在樣品中全氟辛烷的純度。探討試驗(yàn)是否可作為眼科手術(shù)用全氟辛烷質(zhì)量控制的方法。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器和試劑

Thermofisher Nicolet 6700傅立葉變換紅外光譜儀(全反射ATR附件)，Agilent 6890N氣相色譜儀（氫火焰離子化檢測(cè)器)；全氟辛烷（美國(guó)TEDIA“天地”試劑公司）、1-氫全氟正辛烷譜純（美國(guó)TEDIA“天地”試劑公司）。

1.2 定性試驗(yàn)

分別取少量樣品和全氟辛烷標(biāo)準(zhǔn)品于傅立葉變換紅外光譜儀全反射ATR附件上，通過檢測(cè)器DTGSKBr在4000 cm-1～ 400 cm-1的波數(shù)范圍內(nèi)測(cè)定紅外譜圖（見圖1）。如圖顯示：在1233 cm-1、1137 cm-1是CF3的對(duì)稱和反對(duì)稱伸縮振動(dòng)吸收峰，在1200 cm-1、1127 cm-1是CF2的對(duì)稱和反對(duì)稱伸縮振動(dòng)吸收峰，在1004 cm-1是CF伸縮振動(dòng)，在1078 cm-1是直鏈C—C的伸縮振動(dòng)，全氟代烷烴中在1000 cm-1會(huì)出現(xiàn)一些吸收譜帶[9]。

圖1 樣品紅外譜圖Fig.1 Sample Infrared spectrum

1.3 純度試驗(yàn)

1.3.1 溶液配制

根據(jù)生產(chǎn)工藝及相關(guān)說(shuō)明[10-11]被鑒定：分析目標(biāo)物全氟辛烷（PFnO）中潛在雜質(zhì)的有全氟-2-甲基戊烷、1-氫全氟正辛烷(PFECH)、全氟乙基環(huán)己烷、乙基全氟己基乙醚等。

本實(shí)驗(yàn)選擇1-氫全氟正辛烷作為代表性雜質(zhì)進(jìn)行定量分析。以全氟辛烷標(biāo)準(zhǔn)品為溶劑分別配制成分別含1-氫全氟正辛烷0.02%，0.05%，0.1%，0.15%，0.2%的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.3.2 試驗(yàn)條件

HP-5 毛細(xì)管柱(30 mm×0.32 mm，0.5 μm)，進(jìn)樣口溫度150oC，分流比50:1；FID檢測(cè)器溫度220oC，采用程序升溫，起始溫度為70oC，升溫速率10oC/min，終止溫度200oC，保持7 min.；載氣：氮?dú)?，流速?.5 ml/min；在該條件下，1-氫全氟正辛烷及未知雜質(zhì)和全氟正辛烷將依次洗脫：全氟辛烷在6.46 min出峰，已知雜質(zhì)都在7.5內(nèi)出峰。

1.3.3 樣品檢測(cè)結(jié)果及分析

樣品（美國(guó)Alcon Laboratories,Inc.生產(chǎn)的眼科用重水PerfluoronTM）是99%以上的全氟辛烷，因此樣品不需前處理。根據(jù)測(cè)試條件，按指示用氣相色譜對(duì)1.0 μL的各個(gè)樣品溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液1-5進(jìn)行試驗(yàn)。根據(jù)用于已知雜質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)曲線y=14.35x-8.19 計(jì)算已知雜質(zhì)含量，報(bào)告已知雜質(zhì)的百分濃度。

總未知雜質(zhì)百分比=∑Ai/At×100

Ai=各個(gè)未知峰面積

At=色譜圖中所有峰的總面積

根據(jù)以下公式計(jì)算全氟正辛烷（PFnO）含量：

% PFnO = 100%-% PFECH -%總未知雜質(zhì)

表1 全氟正辛烷含量結(jié)果Tab.1 Perfluorooctane content result

2 討論

2.1 檢測(cè)驗(yàn)證 連續(xù)檢測(cè)1 μL含0.02%～0.2%1-氫全氟正辛烷的5個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液，曲線相關(guān)系數(shù)大于0.999，定量下限為0.02%。

2.2 系統(tǒng)性能 根據(jù)測(cè)試條件，檢測(cè)1μL 0.15%標(biāo)準(zhǔn)溶液，1-氫全氟正辛烷和全氟正辛烷將依次洗脫，分辨率大于1。

2.3 系統(tǒng)重現(xiàn)性 根據(jù)測(cè)試條件，重復(fù)檢測(cè)6次1μL 0.1%標(biāo)準(zhǔn)溶液，1-氫全氟正辛烷峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2.0%。

2.4 加標(biāo)回收率試驗(yàn) 取同一樣品3份，分別加入3種不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定1-氫全氟正辛烷濃度。結(jié)果顯示80%、100%、120%的樣品回收率分別在93%～97%。

3 結(jié)論

全氟辛烷廣泛應(yīng)用于玻璃體視網(wǎng)膜手術(shù)中，對(duì)它純度進(jìn)行控制有利于臨床應(yīng)用。本試驗(yàn)先用紅外對(duì)眼科手術(shù)全氟辛烷定性，然后采用氣相色譜法測(cè)定其純度。通過試驗(yàn)驗(yàn)證該方法沒有干擾、且實(shí)驗(yàn)線性范圍、系統(tǒng)性能和重現(xiàn)性均良好，可作為醫(yī)療器械行業(yè)對(duì)眼科手術(shù)全氟辛烷質(zhì)量控制的方法之一。

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Analysis Residues of Perfluorooctane Used in Ophthalmic Operation

【W(wǎng)riters 】Wang Minzhu1, Zhang Li1, Qian Menglan2
1 Medical Device Supervising and Testing Center of Hangzhou, State Food and Drug Administration, Hangzhou 310009 2 The First Affiliated Hospital of Medical School of Zhejiang University, Hangzhou 310009

gas chromatography, infrared spectroscopy, ophthalmic operation, perfluorooctane

R318.08

B

10.3969/j.issn.1671-7104.2012.05.017

1671-7104(2012)05-0373-02

2012-06-13

王敏珠，助理工程師，主要從事醫(yī)療衛(wèi)生理化檢驗(yàn)。E-mail: wangminzhu@21cn.com

【 Abstract 】Analyzed the purity of the Perfluorooctane used for Ophthalmic operation using the FID(Flame Ionization Detector) method after the qualitative analysis of that. Research and discussion of the 1 - hydrogen perfluorocarbon octane, which is the typical impurity of Perfluorooctane. The standard recovery of the 1 - hydrogen perfluorocarbon octane is 93% ～97% within the range of linearity, and the RSD(relative standard deviation) is below 2%. The above test method has the advantages of easy operation, stability and accuracy. So it is a good reference support to bring the specification of quality control of the Perfluorooctane which is used for Ophthalmic operation into YY of medical device.