套算法與消化率計(jì)算法測定鴨飼糧脂肪代謝能值的比較研究/尹玉港（揚(yáng)州大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院 揚(yáng)州225009），趙峰，李輝…//動物營養(yǎng)學(xué)報(bào).-2011,23(7).-1176～1184

本研究旨在通過比較套算法與消化率計(jì)算法測定鴨飼糧脂肪代謝能值中內(nèi)源性干擾、測試精度的差異,探討測定脂肪代謝能值的適宜生物學(xué)方法。試驗(yàn)1是比較套算法和消化率計(jì)算法測定飼糧脂肪真代謝能值的差異。飼糧脂肪設(shè)4個(gè)處理,飼糧4為不添加油脂的基礎(chǔ)飼糧,飼糧1、2、3分別為添加了玉米油、大豆油和豬油的試驗(yàn)飼糧。通過代謝試驗(yàn)測定飼糧1～4脂肪的真代謝能值。試驗(yàn)2是在試驗(yàn)1篩選出的消化率計(jì)算法的基礎(chǔ)上,探討在不同類型的飼糧背景條件下脂肪真代謝能值的差異。采用兩因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì),即飼糧設(shè)2個(gè)處理(玉米-豆粕飼糧和玉米淀粉飼糧),脂肪設(shè)3個(gè)處理[玉米油+大豆油1(5.22∶1)、玉米油+大豆油2(1.90∶1)、玉米油+大豆油+豬油(14.28∶3.50∶4)]。通過代謝試驗(yàn)測定飼糧5～10的能量及脂肪的攝入量、排泄量。結(jié)果表明,套算法中由內(nèi)源性糞能排泄量引起的飼糧脂肪真代謝能值的變異系數(shù)為11.39%,消化率計(jì)算法中由內(nèi)源性脂肪排泄量引起的飼糧脂肪真代謝能值的變異系數(shù)為1.43%。套算法測定的3種脂肪的平均變異系數(shù)及重復(fù)內(nèi)最大值、最小值和極差分別為22.39%、41.70M J/kg、24.77M J/kg、16.94M J/kg,而消化率計(jì)算法測定的分別為4.44%、36.23M J/kg、33.03M J/kg、3.19M J/kg。通過消化率計(jì)算法測定2種飼糧背景條件下：玉米油+大豆油組成的混合油脂的真代謝能值無顯著性差異(P＞0.05),但玉米油+大豆油+豬油組成的混合油脂的真代謝能值存在顯著性差異(P＜0.05)。綜上,消化率計(jì)算法測定鴨飼糧脂肪代謝能值比套算法受內(nèi)源性干擾更少,重復(fù)性更高,但飼糧的組成成分對脂肪的真代謝能值仍有一定影響。

10株火雞組織滴蟲18S rRNA基因的克隆及進(jìn)化分析/劉進(jìn)輝（湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院 長沙 410128），彭俊宇，宋海燕…//畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,42(3).-448～452

應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)鑒定湖南婁底(簡稱HMLD1-3)、湘潭(HMXT1-2)、永州(HMYZ1-3)和寧鄉(xiāng)(HMNX1-2)共10株火雞組織滴蟲,并用18SrRNA部分序列重構(gòu)火雞組織滴蟲與其它相近原蟲的種群遺傳關(guān)系。作者通過PCR擴(kuò)增火雞組織滴蟲蟲株的18S rRNA部分序列,將PCR擴(kuò)增出的片段純化后克隆至pGEM-T Easy載體,重組質(zhì)粒通過菌落PCR鑒定后,對陽性菌落進(jìn)行序列測定并進(jìn)行序列分析。結(jié)果表明,來自湖南省的10株火雞組織滴蟲18SrRNA序列長度一致,均為532bp,與GenBankTM公布的火雞組織滴蟲序列相似性在97.5%以上,與其它原蟲差異均大于20%。種系發(fā)育樹分析表明,10個(gè)分離株與已知火雞組織滴蟲位于同一分枝。本研究證實(shí)該病原為火雞組織滴蟲,從分子生物學(xué)水平證明了湖南省存在火雞組織滴蟲。本研究為火雞組織滴蟲病診斷及火雞組織滴蟲種群體遺傳學(xué)研究奠定了良好基礎(chǔ)。

PRRSV GP5蛋白和CSFV E2蛋白在桿狀病毒囊膜表面的共展示及展示蛋白的免疫原性分析/許信剛（西北農(nóng)林科技大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院 楊凌 7121），王志昇，李兆才…//畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,42(6).-892～898

本試驗(yàn)旨在構(gòu)建以桿狀病毒表面展示系統(tǒng)為基礎(chǔ)的豬繁殖與呼吸綜合征和豬瘟雙價(jià)基因工程亞單位疫苗候選株。利用桿狀病毒表面展示技術(shù)構(gòu)建展示豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)GP5蛋白和豬瘟病毒(CSFV)E2蛋白的重組桿狀病毒BacSC-Dual-ORF5-E2。該重組病毒帶有His6標(biāo)簽,且胞質(zhì)區(qū)域(CTD)和跨膜區(qū)域(TM)均來源于桿狀病毒囊膜蛋白gp64的CTD和TM。對重組病毒進(jìn)行Western blot分析、激光共聚焦顯微鏡觀察、免疫金電子顯微鏡檢測、動物免疫試驗(yàn)以及淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)。Western blot分析結(jié)果表明,重組桿狀病毒中表達(dá)了重組GP5和E2蛋白；激光共聚焦顯微鏡檢測表明,重組桿狀病毒感染昆蟲細(xì)胞Sf-9后在細(xì)胞膜上展示了重組GP5和E2蛋白；免疫金電子顯微鏡觀察表明,重組GP5和E2蛋白展示在桿狀病毒囊膜上；動物免疫試驗(yàn)表明,重組桿狀病毒免疫小鼠后產(chǎn)生了抗PRRSV和抗CSFV的特異性抗體；淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)表明,重組桿狀病毒能誘發(fā)較強(qiáng)的細(xì)胞免疫應(yīng)答。本試驗(yàn)成功構(gòu)建表面展示PRRSV GP5蛋白和CSFV E2蛋白的重組桿狀病毒,為下一步應(yīng)用該重組桿狀病毒作為雙價(jià)亞單位疫苗預(yù)防PRRSV和CSFV的混合感染奠定基礎(chǔ)。

豬卵母細(xì)胞化學(xué)輔助手工去核及手工核移植胚胎發(fā)育能力因素的研究/任子利（廣西大學(xué)動物繁殖研究所 廣西南寧530004）/亞熱帶農(nóng)業(yè)生物資源保護(hù)與利用國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室），趙彥玲，楊小淦…//畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,42(7).-921～931

本研究在篩選豬化學(xué)輔助手工去核最佳脫羰秋水酰堿(Demecolcine,DC)濃度的基礎(chǔ)上,探討了各種因素對手工重構(gòu)胚發(fā)育的影響,以期建立高效的豬手工體細(xì)胞核移植技術(shù)體系。觀察不同成熟時(shí)間卵母細(xì)胞在不同DC濃度下的去核效率,并進(jìn)一步比較了化學(xué)輔助手工去核法和熒光染色去核法、不同類型的供體細(xì)胞(顆粒細(xì)胞、新生巴馬肌肉成纖維細(xì)胞和胎兒成纖維細(xì)胞)和供體細(xì)胞的不同處理方法(70%～80%匯合、血清饑餓法和100%接觸抑制法)對重構(gòu)胚發(fā)育能力的影響。結(jié)果表明：(1)利用DC誘導(dǎo)去核,對體外成熟培養(yǎng)44h的卵母細(xì)胞以濃度0.4μg.mL-1作用0.5～1h為宜。(2)用DC化學(xué)輔助手工去核與用熒光染色去核的重構(gòu)胚囊胚發(fā)育率差異不顯著(13.11%vs 9.25%,P＞0.05)。(3)以胎兒成纖維細(xì)胞、顆粒細(xì)胞和新生巴馬小型豬肌肉成纖維細(xì)胞為供體構(gòu)建的重構(gòu)胚的融合率、卵裂率及囊胚率均差異不顯著(P＞0.05)。(4)用70%～80%匯合(對照組)組、接觸抑制組和血清饑餓組的細(xì)胞作供體構(gòu)建的重構(gòu)胚,在融合率上,接觸抑制組顯著高于對照組(P＜0.05)；在分裂率與囊胚率上,各組之間均無顯著差異(P＞0.05)。研究結(jié)果表明,化學(xué)輔助手工去核法在實(shí)際生產(chǎn)中可以替代熒光染色去核法,能省去去核過程中熒光染色及紫外光照射去核等步驟,從而簡化了豬手工體細(xì)胞核移植程序,提高了豬手工體細(xì)胞核移植效率,能為高效的豬手工體細(xì)胞核移植技術(shù)體系的建立提供參考。

一例A亞型禽白血病病毒引起的纖維肉瘤的病理學(xué)和病毒學(xué)分析/王鑫（山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院 泰安 271018），齊鵬飛，杜艷…//中國動物傳染病學(xué)報(bào).-2011,19(1).-11～16

將禽白血病A亞型(Avian leukosis virus subgroup A,ALV-A)SDAU09C3毒株人工感染SPF引起的腎臟和肝臟纖維細(xì)胞樣肉瘤進(jìn)行病理組織學(xué)觀察,同時(shí)檢測是否有其它腫瘤相關(guān)病毒感染,另外,應(yīng)用PCR擴(kuò)增病毒囊膜蛋白gp85基因,并對其基因編碼的氨基酸序列與原攻毒株比較分析。結(jié)果顯示,SDAU09C3毒株引起的腫瘤,主要為纖維細(xì)胞肉瘤,膠原纖維較少,細(xì)胞及纖維排列極不規(guī)則。病毒學(xué)檢測證明發(fā)病雞只存在ALV-A的感染,而ALV-J、馬立克氏病病毒(Marek's disease virus,MDV)、網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)均為陰性。所分離的ALV-A病毒的囊膜蛋白gp85基因編碼的氨基酸序列與原攻毒株同源性為99.5%。

日本血吸蟲基因重組抗原rSj06868對小鼠的免疫保護(hù)效果/王素娟（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所國家防治動物血吸蟲病專業(yè)實(shí)驗(yàn)室農(nóng)業(yè)部動物寄生蟲學(xué)重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室上海 200241），劉金明，邢榮鶴…//中國動物傳染病學(xué)報(bào).-2011,19(2).-51～56

為克隆、表達(dá)日本血吸蟲假想蛋白SJCHGC068068編碼基因(暫命名為Sj06868)并觀察重組抗原的免疫預(yù)防效果。應(yīng)用PCR技術(shù)從日本血吸蟲7 d童蟲、14 d童蟲mRNA反轉(zhuǎn)錄制備的cDNA中克隆到Sj06868基因的46-438 bp DNA片段,BLASTn分析未發(fā)現(xiàn)其他物種中的同源性序列,也未發(fā)現(xiàn)其保守序列和相關(guān)功能結(jié)構(gòu)域。以pET32a為表達(dá)載體、Sj06868基因在大腸桿菌Rosetta(DE3)中獲得高效表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物rSj068068分子量為36 kDa,能被感染血吸蟲14 d兔血清識別。將純化的重組抗原與佐劑ESSAI ISA 206 CELL混合后免疫BALB/c小鼠,與佐劑對照組和PBS對照組相比,分別獲得了31.63%、29.19%減蟲率以及55.63%、56.27%肝臟蟲卵減少率。用ELISA檢測各組血清中抗rSj068068特異性抗體結(jié)果顯示,免疫組在攻擊感染前、佐劑對照組和PBS對照組在感染后均產(chǎn)生了較高水平的特異性抗體。本研究結(jié)果說明,Sj068068是日本血吸蟲特有的童蟲期高表達(dá)基因,rSj068068在抗血吸蟲疫苗和血吸蟲感染的診斷方面均有潛在應(yīng)用價(jià)值。

豬鏈球菌2型在家兔體內(nèi)的分布及致病性/胡東波（江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)研究所 江蘇南京 210014），何孔旺，倪艷秀…//中國獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,31(6).-843～847

用豬鏈球菌2型SS2-1株按109 CFU/只分別以靜脈、肌肉、皮下、滴鼻、口服5種途徑人工感染健康家兔,結(jié)果前4種感染途徑均可引起發(fā)病并死亡,口服不發(fā)病,且以靜脈感染發(fā)病最急。當(dāng)分別靜脈注射109,108,107,106,105 CFU/只SS2-1株,肌肉注射108,106 CFU/只SS2-1株,結(jié)果證實(shí)感染劑量與發(fā)病程度有正相關(guān)性,家兔臨床癥狀和病理變化明顯。用熒光定量PCR方法檢測所有感染家兔組織的含菌量,結(jié)果提示發(fā)病程度與含菌量呈正相關(guān),且各組織含菌量有差異。另外,人工感染家兔后在不同時(shí)間點(diǎn)取動物組織做菌體含量動態(tài)監(jiān)測,結(jié)果提示體內(nèi)含菌量隨時(shí)間推移遞增,發(fā)病高峰或死亡時(shí)達(dá)最高值。試驗(yàn)結(jié)果證明SS2-1株對家兔易感,致病性穩(wěn)定,且細(xì)菌在動物體內(nèi)增殖穩(wěn)定并具有規(guī)律性。

15株臨床分離耐藥大腸桿菌耐氟喹諾酮類抗生素基因的檢測與序列分析/朱僧（吉林大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院 長春 130118），邢艷萍，胡騰…//中國獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,31(6).-875～879

15株動物源性耐氟喹諾酮類藥物大腸桿菌進(jìn)行PCR檢測、測序、WDNASIS軟件分析gyrA基因中的氟喹諾酮耐藥決定區(qū)(QRDR)、AcrA以及編碼與質(zhì)粒介導(dǎo)的氟喹諾酮類藥物耐藥機(jī)制相關(guān)的qnrA、qnrB、qnrS、qepA和aac(6′)-Ib-cr基因。結(jié)果表明,15株耐藥菌中,QRDR基因在其編碼第72、75、83位或第87位氨基酸均發(fā)生突變；AcrA基因未檢測到氨基酸的突變；qnrS、qepA和aac(6′)-Ib-cr耐藥基因陽性菌各檢測到1株,序列分析表明不存在氨基酸突變。QRDR基因編碼的氨基酸4個(gè)位點(diǎn)發(fā)生突變,其中Ser83→Leu和Asp87→Asn 2個(gè)基因的突變均與文獻(xiàn)報(bào)道的突變相同,雙突變的7個(gè)菌株均表現(xiàn)為高度耐氟喹諾酮類抗生素,表明gyrA基因?yàn)榇竽c桿菌耐氟喹諾酮類抗生素的一個(gè)重要機(jī)制。高度耐氟喹諾酮類抗生素的菌株中有2株沒有檢測到氨基酸突變的存在,但是aac-(6′)-Ib-cr基因和qnrS檢測為陽性,表明質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥也可單獨(dú)導(dǎo)致菌株的耐藥。存有一個(gè)菌株gyrA基因編碼的氨基酸發(fā)生突變Ser83→Leu,AcrA基因和qnrA、qnrB、qnrS、qepA和aac(6′)-Ib-cr基因檢測均為陰性,但是菌株仍然表現(xiàn)為高度耐藥,說明還有未知的耐藥機(jī)制存在。

GMP玻璃化冷凍未成熟牛卵母細(xì)胞核成熟及冷凍損傷試驗(yàn)/許衛(wèi)華（南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物胚胎工程技術(shù)中心 江蘇 南京 210095），王學(xué)瓊，王子玉…//中國獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,31(6).-917～920，932

本試驗(yàn)通過熒光染色的方法建立了未成熟牛卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)過程中第1次減數(shù)分裂的各個(gè)階段的參考判定圖譜；根據(jù)這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)來觀察毛細(xì)玻璃管(GMP)玻璃化冷凍對卵母細(xì)胞核成熟和冷凍損傷的影響。結(jié)果表明,從屠宰場廢棄的卵巢表面卵泡內(nèi)抽取的COCs,70%處于生發(fā)泡期,12.5%生發(fā)泡開始破裂,7.5%已開始濃縮,這說明從屠宰場獲得的COCs有較高的異質(zhì)性；卵母細(xì)胞在成熟培養(yǎng)22h時(shí)收獲排出第一極體的卵母細(xì)胞,可得到豐度較高的極體-胞質(zhì)染色體對稱、緊密相鄰的成熟卵母細(xì)胞；GMP玻璃化冷凍損傷主要有2種表現(xiàn)形式,首先,直接影響膜結(jié)構(gòu)的完整性,包括細(xì)胞膜和核膜,這可從退化的細(xì)胞比例看出(8～24h,有21.9%～27.2%的細(xì)胞處于該階段),其次,影響CONDENSED向MⅠ期的過渡,這可從處于CONDENSED卵母細(xì)胞的比例看出(8～24h,有24.1%～34.3%的細(xì)胞處于該階段)。

微生態(tài)制劑在養(yǎng)殖生產(chǎn)中的應(yīng)用現(xiàn)狀與展望/侯海鋒（保定職業(yè)技術(shù)學(xué)院 河北保定 071000），李茜，史萬玉…//中國畜牧獸醫(yī).-2011,(7).-27-30

微生態(tài)制劑是一類新型活菌制劑,合理運(yùn)用于動物生產(chǎn)中可提高畜禽的生產(chǎn)性能,提高機(jī)體免疫力,改善畜產(chǎn)品品質(zhì),減少環(huán)境污染是一類新型綠色飼料添加劑。作者論述了微生態(tài)制劑在養(yǎng)殖生產(chǎn)中的應(yīng)用現(xiàn)狀,具有廣闊的應(yīng)用前景。

吸蟲線粒體基因組及其應(yīng)用研究進(jìn)展/賈萬忠（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所家畜疫病病原生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)公共衛(wèi)生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室甘肅省動物寄生蟲病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 甘肅蘭州 730046），閆鴻斌，史萬貴…//中國獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,31(6).-926～932

吸蟲病(Trematodiasis)如血吸蟲病、肝片形吸蟲病等是一類重要的人獸共患寄生蟲病,在我國和世界各地普遍流行,危害嚴(yán)重。本文將對吸蟲線粒體基因組全序列分析的研究進(jìn)展、應(yīng)用和今后的發(fā)展方向作一綜述。目前,已完成包括復(fù)殖亞綱10個(gè)種和單殖亞綱4個(gè)種總計(jì)14種吸蟲線粒體基因組全序列測定。吸蟲線粒體基因組堿基組成、基因結(jié)構(gòu)與排列、基因變異等分析結(jié)果為線粒體功能基因組學(xué)研究、比較基因組學(xué)研究、分子分類學(xué)研究、物種起源、分子系統(tǒng)發(fā)育與進(jìn)化分析及其疾病診斷等提供了重要依據(jù)和指導(dǎo)作用。線粒體基因組序列分析有助于解決一些新近發(fā)現(xiàn)的種如三平并殖吸蟲、中華血吸蟲等獨(dú)立種的分類地位；而怡樂村并殖吸蟲和佐渡并殖吸蟲是大平并殖吸蟲的同物異名吸蟲。日本片形吸蟲與大片形吸蟲的cox1基因序列完全一致,這些日本片形吸蟲應(yīng)為大片形吸蟲；大片形吸蟲不同株雖然在cox1基因序列上無差異,但nad1基因卻有8.3%變異性,這表明大片形吸蟲不同株中可能存在隱蔽種?？傊?線粒體基因組序列可為吸蟲蟲種與蟲株的分類學(xué)地位的確定提供重要依據(jù)。同時(shí),人們可根據(jù)線粒體基因組序列,通過PCR方法有效地對臨床上易混淆的吸蟲的種、株或群等作出確切的鑒別與診斷,從而為吸蟲病流行病學(xué)調(diào)查和防治工作等提供重要參考依據(jù)。

水貂EGF基因SNPS與皮張長度的相關(guān)性試驗(yàn)/李玉梅（吉林大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院 吉林長春 130062），趙云，孫博興…//中國獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,31(6).-921～925

以水貂的表皮生長因子基因(EGF)作為候選基因,采用單鏈構(gòu)象多態(tài)性和DNA測序的方法檢測了EGF基因單核苷酸多態(tài)性(SNPs)。針對該群體的特點(diǎn)建立合適的統(tǒng)計(jì)分析模型,并進(jìn)行了EGF基因多態(tài)性與皮長性狀的關(guān)聯(lián)分析。結(jié)果表明,EGF基因?qū)λ醯钠堥L度有一定影響。BB基因型個(gè)體與AA基因型個(gè)體之間有一定的差異(P＜0.05)。CD基因型個(gè)體皮長平均要高于CC和DD基因型,且與CC型個(gè)體差異顯著(P＜0.05),與DD型差異不顯著(P＞0.05)。統(tǒng)計(jì)各基因型之間的組合給水貂皮長帶來的影響時(shí),發(fā)現(xiàn)多數(shù)組合基因型對所檢測的水貂皮長有顯著影響(P＜0.05)。

高原反芻家畜Ca、P代謝/田發(fā)益（西藏農(nóng)牧學(xué)院生物技術(shù)中心 西藏拉薩 850032），巴平，李曉忠…//中國獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011，31(6).-913～916，925

西藏農(nóng)區(qū)反芻家畜體格較小,不及內(nèi)地牛、羊體質(zhì)量的1/2。對牛、羊各主要物質(zhì)代謝進(jìn)行了測定分析后,發(fā)現(xiàn)P的沉積量較少,僅為(0.090 1±0.075 0)g/W0.75.d。因海拔高度的升高,引起的血液TCO2和血液CaO2的量降低。采用理論與實(shí)際測試相結(jié)合,總結(jié)出各值與大氣壓的關(guān)系,即,TCO2(mmol/L)=0.01×CO2結(jié)合力(CO2CP)(mmol/L)×大氣壓(kPa)；CaO2(mL/dL)=0.002 7×大氣壓+1.366 8×Hb(g/dL)-1.386 9×Hb(g/dL)×exp(-0.043×大氣壓)；尿P(mg/d)=血磷閾值(mmol/L)×正常TCO2(mmol/L)-高原TCO2(mmol/L)×95%×31(P原子量)×17.37%×每天尿量(0.069 3×W0.75)/正常TCO2(mmol/L),并對各式進(jìn)行了理論闡述。此式能較合理地反映高原環(huán)境下反芻家畜Ca、P的代謝狀態(tài)。

鋅、銅對實(shí)驗(yàn)性鉬中毒綿羊肝臟、腎臟中鉬含量的影響/楊自軍（河南科技大學(xué)動物科技學(xué)院 河南洛陽 471003），張才，王宏偉…//中國獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,31(6).-895～898

小尾寒羊20只,隨機(jī)分為5組,分別口服鉬、銅和鋅(mg/kg),Ⅰ組30mg/kg鉬、Ⅱ組30mg/kg鉬+15mg/kg銅、Ⅲ組30mg/kg鉬+15mg/kg鋅、Ⅳ組30mg/kg鉬+15mg/kg銅+15mg/kg鋅,Ⅴ組去離子水。試驗(yàn)90d期滿,采取肝臟和腎臟,硫酸-高氯酸消化,原子吸收法測定鉬、鋅、銅含量,結(jié)果顯示,Ⅰ組肝臟鉬含量與第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組差異極顯著(P＜0.01),Ⅱ、Ⅲ組與Ⅳ、Ⅴ組差異極顯著(P＜0.01)；Ⅳ組肝臟銅含量與Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ組差異極顯著(P＜0.01),與Ⅱ組差異顯著(P＜0.05),Ⅱ組肝銅含量與Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ組差異極顯著(P＜0.01)；組間肝臟鋅含量均差異極顯著(P＜0.01)。Ⅰ、Ⅲ組腎鉬含量顯著高于Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ組(P＜0.01)；Ⅱ與Ⅳ、Ⅴ組差異極顯著(P＜0.01)；腎銅含量Ⅲ組與Ⅰ組差異極顯著(P＜0.01)；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組與Ⅰ、Ⅴ組差異極顯著(P＜0.01)；各組腎臟鋅含量差異均極顯著(P＜0.01)。結(jié)果表明,30mg的鉬可使肝臟鉬含量顯著增加(P＜0.01),鋅、銅含量降低。鋅對肝臟鉬有很好的頡抗作用,銅、鋅有效地降低了鉬在組織中的蓄積。

貴州南五味子多糖對雞細(xì)胞免疫和體液免疫的影響/王宏軍（吉林大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院 吉林長春 130062），蔣紅，鄧旭明…//中國獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,31(6).-884～886

選用600只15日齡海蘭褐雛雞,隨機(jī)分為5個(gè)處理,每個(gè)處理3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)40只雞,皮下注射貴州南五味子多糖10、20mg/kg、黃芪多糖20mg/kg、環(huán)磷酰胺40mg/kg及生理鹽水。空白對照組,連續(xù)給藥3d后免疫新城疫疫苗,分別于免疫后7、14、21、28和35d時(shí),各處理組隨機(jī)抽取8只雞檢測各項(xiàng)免疫指標(biāo),探討不同處理組對雛雞免疫功能的影響。本試驗(yàn)結(jié)果表明,皮下注射10～20mg/kg貴州南五味子多糖可顯著促進(jìn)雞外周血T淋巴細(xì)胞增殖,IL-2的產(chǎn)生(P＜0.01)；可使CD4+/CD8+淋巴細(xì)胞比值明顯升高(P＜0.01)；可使雞體內(nèi)抗ND抗體滴度明顯升高(P＜0.01)；可使法氏囊、胸腺的臟器指數(shù)均明顯升高(P＜0.01)。

豬戊型肝炎病毒熒光定量PCR檢測方法的建立及其分子流行病學(xué)/張曉峰（浙江出入境檢驗(yàn)檢疫局 浙江杭州 310012），帥江冰，李愛云…//中國獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,31(6).-822～827

對已發(fā)表的戊型肝炎病毒(HEV)不同基因型毒株全序列進(jìn)行分析,針對ORF3的保守區(qū)設(shè)計(jì)引物和探針優(yōu)化建立了HEV熒光RTPCR檢測體系。分析表明該反應(yīng)體系具有良好的擴(kuò)增效率、特異性和穩(wěn)定性,且檢測靈敏度比普通RT-PCR方法高10～100倍。利用所建立的熒光定量PCR方法對采集自浙江及其周邊上海、江蘇等地區(qū)規(guī)?；i場的樣品以及HEV抗體陽性人血清樣品進(jìn)行了HEV核酸檢測。其中,77份人血清樣本僅有2份為HEV核酸陽性(2.6%)。而豬糞便樣品陽性率則高達(dá)20.5%(56/273),且所調(diào)查的豬場均存在HEV感染。進(jìn)一步的分子流行特征分析表明,浙江及周邊地區(qū)的豬HEV毒株多為基因Ⅳ型,與其他地區(qū)的Ⅳ型HEV毒株同源性較高(83.4%～89.5%),但它們之間也存在較多的變異位點(diǎn)。豬源HEV毒株P(guān)J-1則與多數(shù)Ⅲ型HEV毒株同源性較高(88%),進(jìn)化分析也表明其為基因Ⅲ型。人血清樣品中檢測到的2份HEV毒株Human-1與Human-2與本地區(qū)Ⅳ型豬源毒株在分子進(jìn)化關(guān)系上具有很高的親源性,它們分布于同一分支內(nèi),而不構(gòu)成獨(dú)立分支。以上分析結(jié)果表明浙江及其周邊地區(qū)豬HEV感染較為廣泛,且以基因Ⅳ型毒株為主,但也存在基因Ⅲ型毒株的流行。

淺議肉禽無禽流感生物安全隔離區(qū)國家評估機(jī)制/張衍海（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所 上海 200241），劉俊輝，范欽磊…//中國動物傳染病學(xué)報(bào).-2011,19(2).-82～86

生物安全隔離區(qū)國家評估工作,既是我國《動物防疫法》等法律法規(guī)的要求,也是當(dāng)前動物和動物產(chǎn)品國際貿(mào)易中進(jìn)口方對出口方生物安全隔離區(qū)實(shí)施無疫認(rèn)可的前提條件。生物安全隔離區(qū)是我國無規(guī)定動物疫病區(qū)的一種重要類型。本文在《無規(guī)定動物疫病區(qū)評估管理辦法》基礎(chǔ)上,結(jié)合肉禽無禽流感生物安全隔離區(qū)有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的相關(guān)技術(shù)要求,研究構(gòu)建了我國肉禽無禽流感生物安全隔離區(qū)國家評估機(jī)制,明確了生物安全隔離區(qū)國家評估的評估管理、評估程序和方法、評估結(jié)果發(fā)布以及評估后管理等方面的要求,為我國下一步開展肉禽無禽流感生物安全隔離區(qū)國家評估工作提供借鑒和參考。

環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)及其在動物疫病診斷中的應(yīng)用/楊德全（上海市動物疫病預(yù)防控制中心 上海 201103），鞠厚斌，葛菲菲…//中國動物傳染病學(xué)報(bào).-2011,19(2).-75～81

環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(loop-mediated isothermal amplifi cation,LAMP)技術(shù)是一門新興的分子生物學(xué)檢測技術(shù),因其具有特異性強(qiáng)、敏感性高、簡單、快捷及不需要昂貴的儀器設(shè)備等特點(diǎn),受到了生物醫(yī)學(xué)研究者的高度關(guān)注。目前,該方法已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于各種病原微生物檢測。本文綜述了近年來LAMP在動物疫病檢測中的具體應(yīng)用實(shí)例和目前的研究進(jìn)展,并對LAMP方法在動物疫病診斷中的應(yīng)用前景做了展望。

Ⅰ型鴨肝炎病毒RNA聚合酶基因的克隆及原核表達(dá)/王超（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所 上海 200241），付玉志，張偉偉…//中國動物傳染病學(xué)報(bào).-2011,19(2).-20～25

根據(jù)Ⅰ型鴨肝炎病毒(Duck hepatitis virus,DHV-Ⅰ)ZJ-Ⅴ株基因組序列(GenBank登錄號：EF382778),設(shè)計(jì)了一對擴(kuò)增RNA聚合酶基因(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)的特異性引物,以ZJ-Ⅴ株基因組為模板,擴(kuò)增DHV-Ⅰ的RdRp基因。運(yùn)用DNAStar軟件對ZJ-Ⅴ株病毒與GenBank上已發(fā)表的其他不同DHV毒株的RdRp基因序列進(jìn)行同源性比較和遺傳進(jìn)化分析,結(jié)果表明,ZJ-Ⅴ株與A型DHV-ⅠR85952株(DQ226541)的同源性為97.1%,親緣關(guān)系最近,與2株臺灣新型(B型)DHV之間為76.9%和77.0%,與C-GY株和4株韓國新型(C型)DHV株之間為76.2%～76.5%,親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。將RdRp基因克隆至原核表達(dá)載體pET-32a(+),獲得重組表達(dá)質(zhì)粒pETRdRp,轉(zhuǎn)化宿主菌E.coli BL21(DE3),用IPTG進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)。SDSPAGE分析結(jié)果顯示RdRp蛋白分子量約為65 kDa,Western blot檢測證明RdRp蛋白能與Ⅰ型鴨病毒性肝炎陽性血清產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng),具有良好的免疫學(xué)活性。本文為進(jìn)一步研究DHV-Ⅰ的復(fù)制機(jī)理奠定了基礎(chǔ)。

豬源TTV Taqman實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測方法的建立和應(yīng)用/侯軍委（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所 上海200241），周艷君，王礞礞…//中國動物傳染病學(xué)報(bào).-2011,19(2).-13～19

根據(jù)TTV1和TTV2的非編碼區(qū)(UTR)的保守序列分別設(shè)計(jì)并合成兩套特異性引物和Taqman探針,建立了鑒別TTV1和TTV2的Taqman實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法。通過常規(guī)PCR方法分別克隆TTV1和TTV2的非編碼區(qū)(UTR)的保守序列并將其連入pMD18-T載體,制備陽性標(biāo)準(zhǔn)品,優(yōu)化反應(yīng)條件,以10倍系列稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品分別繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,TTV1標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)為0.984,TTV2標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)為0.994。檢測結(jié)果顯示,兩種方法的靈敏度均可達(dá)10 copies/μL,除豬源TTV外,對豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬瘟病毒、豬2型圓環(huán)病毒、豬流感病毒檢測結(jié)果均為陰性。該方法重復(fù)性好,批內(nèi)和批間變異系數(shù)均小于3%。檢測采集自廣西和內(nèi)蒙古的44份病料,TTV1的陽性率為47.73%,TTV2陽性率為70.45%,TTV1和TTV2混合感染的陽性率為31.82%。豬源TTV檢測方法的建立為該病毒的流行病學(xué)調(diào)查和定量提供了有效的手段。

豬源牛病毒性腹瀉病毒實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測方法的建立/鄧宇（四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院 四川雅安 625014），張榮，叢雁方…//畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào).- 2011,42(7).-1046～1050

本研究旨在建立一種熒光定量PCR檢測方法,用于豬源牛病毒性腹瀉病毒(BVDVs)檢測,同時(shí)能鑒別診斷豬瘟病毒(CSFV)。根據(jù)BVDVs與CSFV 5′-UTR保守序列,設(shè)計(jì)一套引物和特異TaqMan探針,以本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的豬源BVDVs 5′-UTR陽性重組質(zhì)粒為標(biāo)準(zhǔn)品,通過優(yōu)化反應(yīng)條件,建立了標(biāo)準(zhǔn)曲線。以構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn)品為模板進(jìn)行了特異性、敏感性、重復(fù)性試驗(yàn)、并應(yīng)用于臨床檢測。結(jié)果顯示,該方法檢測CSFV、豬繁殖與呼吸綜合征病毒均為陰性；最低可檢測到每個(gè)反應(yīng)相當(dāng)于10拷貝的標(biāo)準(zhǔn)品DNA；重復(fù)性試驗(yàn)的批內(nèi)變異系數(shù)為0.20%～0.95%；應(yīng)用所建立方法對臨床樣品進(jìn)行檢測,其結(jié)果與普通RT-PCR結(jié)果的符合率為86.7%。本研究建立的實(shí)時(shí)熒光定量PCR具有特異、敏感、快速、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),可用于豬感染BVDVs、豬瘟疫苗污染BVDVs的監(jiān)測。

免疫PCR檢測微量H5亞型禽流感病毒/鄧明?。ㄎ鞅鞭r(nóng)林科技大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院 陜西楊凌 712100），肖西志，吳振興…//畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào).- 2011,42(7).- 1039～1045

為了有效檢測低濃度禽流感病毒,筆者通過將高特異性的抗原-抗體反應(yīng)與高靈敏性的PCR擴(kuò)增技術(shù)相結(jié)合,建立了一種快速檢測痕量H5亞型禽流感病毒的間接免疫PCR方法和間接”三明治”抗體夾心免疫PCR方法。以TopYield 96孔板為固相免疫吸附載體,以禽流感病毒H5蛋白為檢測對象,通過一系列免疫反應(yīng)及親和素-生物素橋聯(lián)作用,將生物素標(biāo)記的報(bào)告DNA分子和生物素標(biāo)記的禽流感病毒H5亞型抗體分子連接。充分洗滌后,在TopYield板孔中添加PCR反應(yīng)液,對板壁偶聯(lián)的報(bào)告DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,間接達(dá)到檢測微量禽流感病毒H5蛋白的目標(biāo)。通過優(yōu)化報(bào)告DNA分子和鏈親和素的濃度,2種免疫PCR技術(shù)都可檢測到約1fg的禽流感病毒H5蛋白,與常規(guī)ELISA方法相比,靈敏性提高了近1 000倍。

鵝垂體特異性轉(zhuǎn)錄因子熒光素酶報(bào)告基因重組體的構(gòu)建和鑒定/趙榮雪（揚(yáng)州大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院 江蘇揚(yáng)州 225009），段修軍，趙文明…//畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,42(7).-1032-1038

為研究垂體特異性轉(zhuǎn)錄因子(Pituitary transcription factor 1,Pit1)啟動子轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制,將獲得的Pit1基因的啟動子,插入熒光素酶報(bào)告基因載體中,構(gòu)建Pit1基因啟動子調(diào)控的報(bào)告基因重組表達(dá)質(zhì)粒。本研究利用染色體步移技術(shù)擴(kuò)增鵝Pit1基因的啟動子,定向亞克隆至熒光素酶表達(dá)載體pGL3-Basic中,構(gòu)建含有正確目的基因的報(bào)告基因重組體pGL3-Pit1,并通過限性內(nèi)切酶酶切、PCR及測序進(jìn)行鑒定。通過酶切鑒定及基因測序證明,所克隆的基因產(chǎn)物與預(yù)期結(jié)果一致,序列無堿基突變。結(jié)果,成功構(gòu)建了含有Pit1啟動子基因序列的熒光素酶報(bào)告基因真核表達(dá)載體,為下一步分析該啟動子活性及轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)理奠定基礎(chǔ)。

中國荷斯坦牛SCD1基因多態(tài)性與泌乳性狀的關(guān)聯(lián)分析/王小龍（揚(yáng)州大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院 江蘇揚(yáng)州 225009），陳仁金，楊章平…//畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,42(7).- 1022～1026

本研究旨在探索中國荷斯坦牛SCD1基因多態(tài)性與產(chǎn)奶性狀的相關(guān)性。以上海某奶牛場610頭中國荷斯坦牛為試驗(yàn)材料,采用PCR-SSCP法對SCD1基因A293V位點(diǎn)遺傳多態(tài)性進(jìn)行分析,利用一般線性模型分析SCD1基因A293V位點(diǎn)突變對測定日產(chǎn)奶量、乳脂率、乳蛋白率、305天校正產(chǎn)奶量、乳脂量、乳蛋白量及體細(xì)胞評分7個(gè)泌乳性狀的影響。共檢測到AA、AV和VV 3種基因型,頻率分別為0.634、0.323和0.043,等位基因A和V的頻率分別為0.796和0.204。該位點(diǎn)突變對乳脂率、乳蛋白率的影響達(dá)到顯著水平(P＜0.05),對測定日產(chǎn)奶量、305天校正產(chǎn)奶量、305天乳蛋白量和305天乳脂量以及體細(xì)胞評分影響不顯著(P＞0.05)。多重比較表明,VV基因型個(gè)體的乳蛋白率、乳脂率極顯著高于AA、AV型個(gè)體(P＜0.01)。SCD1基因A293V位點(diǎn)突變對中國荷斯坦牛泌乳性狀的遺傳效應(yīng)有一定程度的影響,但影響機(jī)理需要進(jìn)一步的研究。

山羊MyoG基因內(nèi)含子Ⅱ變異及其在體質(zhì)量上的遺傳效應(yīng)分析/劉錚鑄（河北科技師范學(xué)院動物科技學(xué)院 河北倉黎 066600），鞏元芳，付志新…//畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,42(7).-1015～1021

旨在研究MyoG基因內(nèi)含子Ⅱ多態(tài)性與波爾山羊及其級進(jìn)雜交后代部分生長性狀的關(guān)系。以純種波爾山羊及波爾山羊與唐山奶山羊級進(jìn)雜交一代(F1)、二代(F2)和三代(F3)為研究對象,采用測序和PCR-RFLP方法對山羊MyoG基因遺傳多態(tài)性進(jìn)行分析,并研究基因型對初生體質(zhì)量、1月齡體質(zhì)量和斷奶體質(zhì)量的影響。結(jié)果在MyoG基因內(nèi)含子Ⅱ的1 823bp處(依據(jù)序列號：FJ607135)發(fā)現(xiàn)了1個(gè)SNP(C→T),且存在3種基因型(AA、AB和BB),這3種基因型在波爾山羊和波唐級進(jìn)雜交后代4個(gè)群體中的分布基本一致,B等位基因?yàn)閮?yōu)勢等位基因。通過對有效等位基因數(shù)(Ne)、群體雜合度(H)、Shannon's信息指數(shù)(I)和多態(tài)信息含量(PIC)等群體遺傳參數(shù)的計(jì)算,發(fā)現(xiàn)此SNP是1個(gè)中、低多態(tài)位點(diǎn)。最小二乘分析結(jié)果表明,AA基因型與其它2種基因型比較有較小的初生體質(zhì)量且達(dá)到顯著水平(P＜0.05),而對于1月齡體質(zhì)量和斷奶體質(zhì)量,3種基因型間雖未達(dá)顯著水平(P＞0.05),但具AA基因型個(gè)體的表型值明顯低于具其它2種基因型個(gè)體的表型值,AA、AB和BB 3種基因型在這3個(gè)生長性狀的大小排列順序均為BB＞AB＞AA。推測MyoG基因?qū)ι窖蛏L性狀存在一定影響,提示選擇帶有B等位基因的個(gè)體有望提高山羊體質(zhì)量相關(guān)的生長性狀。

磺胺二甲嘧啶快速直接競爭ELISA試劑盒的研制及應(yīng)用/龔云飛（中國計(jì)量學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院 浙江杭州310018），王唯芬，張明洲…//畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,42(7).-1007～1014

在多克隆抗體的基礎(chǔ)上研制一種用于檢測動物源性食品中磺胺二甲嘧啶(SMZ)殘留量的直接競爭酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)試劑盒,并與高效液相色譜(HPLC)分析方法比較和驗(yàn)證。將磺胺二甲嘧啶添加到豬肝、豬肉和雞肉樣品中,用所制備的試劑盒和HPLC分析方法檢測樣品中的磺胺二甲嘧啶殘留,并對試劑盒的靈敏度、特異性、精密度、準(zhǔn)確度和有效期進(jìn)行測定。研究結(jié)果表明,磺胺二甲嘧啶濃度在0.5～50ng.mL-1,方法的檢測靈敏度IC10=0.47ng.mL-1,板內(nèi)平均變異系數(shù)為7.4%,板間平均變異系數(shù)為9.27%。豬肝、豬肉與雞肉組織樣品中SMZ最低檢測限分別為3.91、4.81與1.59μg.kg-1。在添加10.0～50.0μg.kg-1時(shí),平均回收率在85%～110%。試劑盒的檢測時(shí)間為12.6min,在4℃至少可以保存6個(gè)月。研制的試劑盒可以滿足豬肝、豬肉和雞肉中磺胺二甲嘧啶殘留的現(xiàn)場快速檢測。

斷喙應(yīng)激對雛雞胸腺細(xì)胞凋亡及相關(guān)凋亡蛋白表達(dá)的影響/孫桂榮（河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院 河南鄭州 450002），李燕，康相濤…//畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,42(7).-1000～1006

為研究斷喙應(yīng)激對雛雞胸腺細(xì)胞凋亡及相關(guān)凋亡蛋白表達(dá)的影響,采用電子顯微鏡技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)和免疫組織化學(xué)技術(shù)分析斷喙對雞胸腺淋巴細(xì)胞的細(xì)胞增殖、分化、凋亡及相關(guān)凋亡蛋白(Bcl-2和Bax)表達(dá)的影響。結(jié)果表明：采用電子顯微鏡技術(shù)觀察到斷喙對胸腺淋巴細(xì)胞產(chǎn)生明顯的影響,斷喙組胸腺細(xì)胞內(nèi)可看到細(xì)胞核明顯的應(yīng)激反應(yīng),細(xì)胞核凝集,較致密,部分細(xì)胞核即將溶解,并出現(xiàn)一定數(shù)量的凋亡和壞死細(xì)胞；流式細(xì)胞儀檢測表明對照組和斷喙組的胸腺內(nèi)淋巴細(xì)胞都是以G1期為主,但斷喙組G1期淋巴細(xì)胞數(shù)量比試驗(yàn)組高；對照組和斷喙組胸腺淋巴細(xì)胞凋亡率在斷喙后5d時(shí)差異顯著(P＜0.05)；免疫組化結(jié)果表明斷喙應(yīng)激沒有影響B(tài)cl-2和Bax蛋白在免疫器官內(nèi)的表達(dá)部位；但有降低Bcl-2在胸腺細(xì)胞內(nèi)表達(dá)量的趨勢；有提高Bax在胸腺細(xì)胞內(nèi)表達(dá)量的趨勢。結(jié)果表明斷喙應(yīng)激促進(jìn)了雛雞胸腺淋巴細(xì)胞凋亡。

乳房炎奶牛金黃色葡萄球菌毒素基因的檢測及PFGE分型研究/王新（西北農(nóng)林科技大學(xué)食品學(xué)院 陜西楊凌 712100），韋藝媛，張靜…//畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,42(7).-974～980

作者針對臨床及亞臨床乳房炎奶牛乳汁中金黃色葡萄球菌分離株的毒素基因進(jìn)行檢測和脈沖場凝膠電泳(PFGE)基因分型,比較2種類型乳房炎金黃色葡萄球菌分離株的差異。無菌法采集奶樣,采用國際標(biāo)準(zhǔn)方法從中分離金黃色葡萄球菌,用多重PCR方法擴(kuò)增nuc基因和mecA基因以確證金黃色葡萄球菌(SA)和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)。進(jìn)一步用PCR方法檢測SA的各種毒素基因(SEs、ETs、TSST-1和PVL基因等)。利用限制性內(nèi)切酶SmaⅠ對SA基因組DNA進(jìn)行酶切和PFGE分析,最后利用BioNumerics軟件進(jìn)行聚類分析。結(jié)果：19.3%(23/119)的臨床乳房炎奶樣和14.8%(26/176)的亞臨床乳房炎奶樣確定為金黃色葡萄球菌陽性樣品,分別從中分離鑒定出43株和26株金黃色葡萄球菌,其中臨床乳房炎分離株中有5株為mecA基因陽性。臨床乳房炎奶牛奶樣中檢測到SA的SEA、SEB、SED、SEJ和PVL毒素基因,檢出率分別為3.8%(1株)、11.5%(3株)、19.2%(5株)、7.7%(2株)和31.2%(10株)；亞臨床乳房炎奶牛乳樣中僅檢測到SA的SEA和PVL毒力基因,檢出率分別為7.0%(3株)和84.1%(37株)。表明臨床與亞臨床乳房炎奶牛乳汁中SA菌株攜帶的毒素基因不一樣,SEs可能是臨床乳房炎菌株的重要致病基因,PVL可能是亞臨床乳房炎菌株的重要致病基因。69株SA使用SmaⅠ酶切分型后,可分為7個(gè)大簇、50個(gè)基因型,來源相同的SA分型后大部分位于同一簇內(nèi)。臨床乳房炎奶牛乳汁中檢測到MRSA菌株,PVL基因在亞臨床乳房炎中的檢出率為臨床乳房炎的2.7倍。PFGE方法能較好的區(qū)分臨床乳房炎和亞臨床乳房炎的SA分離菌株。

基于人工消化液與密閉消化器的酶法測定豆粕鴨代謝能值的研究/趙峰（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所動物營養(yǎng)學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 北京 100094），趙江濤，張宏福//畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,42(7).-946～954

本試驗(yàn)旨在通過探討基于人工消化液與密閉消化器的酶法條件下酶法與排空強(qiáng)飼法的測試精度及測定豆粕鴨代謝能值的差異,為鴨飼料養(yǎng)分生物學(xué)效價(jià)酶學(xué)評定方法的設(shè)計(jì)提供參考。酶法與排空強(qiáng)飼法測試精度的比較研究采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì),其中酶法每個(gè)消化階段設(shè)5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)1個(gè)樣品,排空強(qiáng)飼法設(shè)4個(gè)重復(fù)測定,每個(gè)重復(fù)3只試驗(yàn)鴨,比較兩方法間重復(fù)測定的極差、相對標(biāo)準(zhǔn)差偏差。酶法與排空強(qiáng)飼法測定豆粕鴨代謝能值的比較研究中,采用配對設(shè)計(jì),對25個(gè)豆粕樣品的酶水解物能值與排空強(qiáng)飼代謝能作系統(tǒng)比較。結(jié)果表明,鴨排空強(qiáng)飼法重復(fù)測定的日糧干物質(zhì)消化率極差為2.89%,相對偏差為1.57%,代謝能值極差為0.36MJ.kg-1,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.13%。酶法重復(fù)測定的日糧干物質(zhì)消化率極差和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為1.57%和1.13%,其測試的精度可以達(dá)到鴨排空強(qiáng)飼法類似的測試精度。25個(gè)豆粕樣品的鴨排空強(qiáng)飼法真代謝能(TME)平均值、酶水解物能值平均值分別為13.33和13.55MJ.kg-1DM,兩平均值間無顯著性差異(P＞0.05)。在考慮到允許誤差的前提下,本試驗(yàn)所用酶法準(zhǔn)確估測豆粕鴨代謝能值的概率為68%(n=25,差值為0.85MJ.kg-1以內(nèi))。

SCAR分子標(biāo)記對水貂食毛癥遺傳病因的初步研究/李秋芳（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院 黑龍江哈爾濱150030），魏來，呂晶…//畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,42(7).-

本研究利用序列特異性擴(kuò)增(SCAR)技術(shù)對健康和食毛水貂進(jìn)行遺傳分析,旨在從分子水平探討水貂食毛癥的發(fā)病原因。首先從126個(gè)隨機(jī)引物中篩選出4個(gè)重復(fù)性好的標(biāo)記引物,通過引物A20和S139的擴(kuò)增在兩群體中找到差異標(biāo)記(A20-1000,S139-400),對其進(jìn)行克隆、測序,并根據(jù)測序結(jié)果設(shè)計(jì)2對SCAR引物,回到原樣本群體中擴(kuò)增驗(yàn)證。結(jié)果,SA20-757在食毛和健康水貂群體的分布頻率分別為86.88%和27.41%,差異極顯著(P＜0.001)；MS139-230在食毛和健康水貂群體的分布頻率分別為94.21%和39.38%,差異極顯著(P＜0.001)。SA20-757與MS139-230聯(lián)合分析表明,特異性條帶在患病水貂群體的分布頻率高達(dá)95.36%,均比單個(gè)SCAR特異引物的擴(kuò)增比例要高。結(jié)果提示,SA20-757與MS139-230聯(lián)合診斷分析,可以很好的區(qū)分健康與食毛水貂群體,可初步作為水貂食毛癥早期診斷的分子生物學(xué)手段,為進(jìn)一步研究水貂食毛癥奠定基礎(chǔ)。

山羊IGFBP-1基因的克隆及其mRNA豐度在多種組織中的發(fā)育性變化/李利（四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物遺傳育種研究所 四川雅安 625014），李秋，王林杰…//畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,42(7).- 899～904

本研究旨在探討胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(Insulin-like growth factor-binding protein 1,IGFBP-1)基因在山羊出生后不同組織的發(fā)育性表達(dá)模式。在出生后0、15、30、60、90和120d共屠宰36只南江黃羊羔羊(公、母羔羊各18只),取心臟、肝臟、脾臟、肺臟、背最長肌、半膜肌、臂三頭肌和股二頭肌樣品以抽提RNA,進(jìn)行克隆及熒光定量PCR分析。山羊IGFBP-1基因的ORF(Open reading frame)長792bp,共編碼263個(gè)氨基酸,其核苷酸和氨基酸序列相似性在反芻動物(牛、綿羊)之間遠(yuǎn)大于其它物種。羔羊肝臟IGFBP-1mRNA表達(dá)量最高(P＜0.01)；肺臟、脾臟、心臟表達(dá)水平中等；肌肉中最低且在4種肌肉間表達(dá)差異不顯著(P＞0.05)。出生后尤其是60d內(nèi)羔羊IGFBP-1mRNA豐度變化很大,且明顯呈現(xiàn)持續(xù)下降(肝臟)、先升后降(心臟)以及下降-上升-下降(脾臟、肺臟和肌肉)3種模式的變化。結(jié)果提示,IGFBP-1基因CDS區(qū)在物種間保守性較強(qiáng),肝臟是山羊合成IGFBP-1mRNA的主要部位,IGFBP-1基因在出生后羔羊的早期生長中發(fā)揮著重要的作用且其mRNA發(fā)育性表達(dá)模式具有組織器官特異性。

一種從鴨新分離的黃病毒研究初報(bào)/李玉峰（山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所禽病診斷與免疫重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 山東濟(jì)南 250100），馬秀麗，于可響…//畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,42(6).- 885～891

從以產(chǎn)蛋下降為主的櫻桃谷種鴨以及出現(xiàn)神經(jīng)癥狀的雛鴨各分離出1株病毒,分別命名為BZ株和LC株。該2株病毒對SPF雞胚和健康鴨胚均能產(chǎn)生相同的病變,分離病毒不能凝集雞、鴨、鵝、鴿等的紅細(xì)胞,在鴨胚成纖維細(xì)胞(DEF)能夠產(chǎn)生典型的細(xì)胞病變(CPE),電鏡下觀察到約50nm的病毒粒子。病理組織學(xué)研究表明,二者在臨床上均可導(dǎo)致腦組織危害,表現(xiàn)為腦膜水腫、血管充血和皮質(zhì)層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增生等。血清學(xué)檢測表明,分離病毒與禽流感病毒(AIV)、鴨瘟病毒(DEV)、新城疫病毒(NDV)等病原無交叉。生物學(xué)特性鑒定該病原為有囊膜單股RNA病毒。利用不同禽病的特異性引物分別進(jìn)行PCR或RT-PCR,均未擴(kuò)增出特異條帶。設(shè)計(jì)隨機(jī)引物進(jìn)行RT-PCR,擴(kuò)增出基因片段,利用GenBank進(jìn)行Blast同源比較,結(jié)果發(fā)現(xiàn),分離病毒與以色列火雞腦膜腦炎病毒(Israel turkey meningo-encephalitis virus,TMEV)和在馬來西亞發(fā)現(xiàn)的Tembumu病毒至少在2段基因上具有較高的同源性,屬于黃病毒屬。測序表明,分離病毒與Tembumu病毒的非結(jié)構(gòu)蛋白(NS5基因)和囊膜蛋白(E基因)的核苷酸同源性為86.7%～90.2%和87.0%～91.8%,與TMEV的NS5基因和E基因的同源性為72.4%～73.2%和72.7%～72.8%。2分離株之間E基因和NS5基因的核苷酸同源性均為99.5%。血清中和試驗(yàn)表明,BZ株陽性血清可以中和LC病毒,因此證實(shí)二者可能是同一種病毒。綜合以上研究,建議將該病命名為”鴨病毒性腦炎”(Duck viral encephalitis disease)。

脾虛大鼠胰島胰多肽免疫陽性物質(zhì)分布變化/覃堯（中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院 北京 100193），周露云，高月異…//畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,42(6).-865～869

脾虛證的臨床表現(xiàn)以消化系統(tǒng)功能障礙為主,其中胰腺外分泌功能減退明顯,且伴有食欲與體質(zhì)量的顯著下降。胰多肽(PP)是胰島周邊F細(xì)胞分泌的主要胃腸激素,對胰腺外分泌功能與食欲的調(diào)節(jié)有抑制作用,可導(dǎo)致氧化代謝增強(qiáng),引起體質(zhì)量下降。本試驗(yàn)旨在揭示大鼠胰島胰多肽分泌變化與脾虛證發(fā)病之間的關(guān)系。筆者以利血平脾虛大鼠模型為研究對象,采用SP染色進(jìn)行免疫組織化學(xué)研究,觀察大鼠胰島中胰多肽免疫陽性物質(zhì)的分布情況。脾虛組與對照組的大鼠胰島中胰多肽免疫陽性物質(zhì)面積與胰島面積百分比相比,胰頭部分未見明顯差異(P＞0.05)；但脾虛組胰中、胰尾的PP免疫陽性物質(zhì)所占面積極顯著大于對照組(P＜0.01)。結(jié)果表明,脾虛證大鼠胰島中胰多肽總分泌量極顯著增加。因此,胰多肽的分泌增加是導(dǎo)致脾虛證動物出現(xiàn)胰腺外分泌功能低下、食欲減退以及體質(zhì)量下降的主要因素。

新霉素阻斷ELISA試劑盒的研制與應(yīng)用/王愛萍（甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院 甘肅蘭州 730070），李發(fā)弟，胡驍飛等//畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,42(6).-854～864

本研究旨在建立新霉素(Neomycin,NEO)免疫學(xué)檢測試劑盒。以制備的抗NEO單克隆抗體(NEO mAb)為基礎(chǔ),建立阻斷ELISA分析方法,組裝新霉素阻斷ELISA試劑盒,并對試劑盒的性能進(jìn)行鑒定。結(jié)果表明,NEO試劑盒(NEO-kit)標(biāo)準(zhǔn)曲線呈典型的S型,符合4參數(shù)logit曲線擬合,相關(guān)系數(shù)R2=0.990 3；檢測范圍為1.0～64.0μg.L-1,半數(shù)抑制濃度(IC50)為2.59μg.L-1,靈敏度為0.75μg.L-1,檢測限為1.0μg.L-1。試劑盒除了和NEO陽性樣品反應(yīng)呈陽性外,與慶大霉素、鏈霉素、土霉素、沙丁胺醇、環(huán)丙沙星、二氟沙星、磺胺嘧啶及磺胺甲噁唑等其他藥物均無交叉反應(yīng)性。奶樣、飼料樣及肉樣的平均添加回收率為89.50%、89.58%和87.92%；平均批內(nèi)和批間變異系數(shù)均小于15%,而且批間變異系數(shù)小于批內(nèi)變異系數(shù)；基質(zhì)對NEO-Kit的檢測結(jié)果影響比較??；NEO-Kit在4℃可保存6個(gè)月以上。試劑盒和HPLC-MS-MS對牛奶中新霉素回收率沒有顯著差異(P≥0.05)。試劑盒和HPLC-MS-MS對飼料樣檢測結(jié)果也無顯著差異(P≥0.05)。本研究成功研制出敏感、特異、準(zhǔn)確的NEO檢測試劑盒。

增茸素對塔里木馬鹿茸形態(tài)組織的影響/韓春梅（塔里木大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院 新疆阿拉爾843300），廖秋萍，楊可等//畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,42(6).-851～856

塔里木馬鹿鹿茸組織的形態(tài)學(xué)是研究鹿茸生長發(fā)育機(jī)制的基礎(chǔ)。本研究以增茸素處理和自然生長的生長期為30和60d的塔里木馬鹿二茬鮮茸為材料,采用常規(guī)石蠟切片和HE染色等方法,對其茸皮層、未分化的間充質(zhì)細(xì)胞層、成軟骨細(xì)胞層和軟骨細(xì)胞層進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)研究。結(jié)果顯示：自然生長60d的鮮茸茸皮組織切片中除了靜脈數(shù)(8.56±2.66個(gè).mm-2)外,動脈數(shù)(9.14±2.32個(gè).mm-2)、毛囊數(shù)(15.6±6.45個(gè).mm-2)、神經(jīng)數(shù)(16.44±5.67個(gè).mm-2)均分別高于30d的(分別為2.53±1.17、6.67±2.99、3.62±2.32個(gè).mm-2),其中動脈和神經(jīng)生長變化差異顯著(P＜0.05)。其它組織層附屬器官生長變化無顯著性差異。用增茸素處理后,茸皮仍有相類似的生長變化,神經(jīng)生長變化差異仍顯著(P＜0.05)；生長60d間充質(zhì)細(xì)胞層組織切片中動脈數(shù)(3.21±1.08個(gè).mm-2)顯著高于30d的(2.47±1.17個(gè).mm-2)(P＜0.05),而生長30d的成軟骨細(xì)胞層中的動脈數(shù)(10.17±2.87個(gè).mm-2)高于60d的(8.27±2.33個(gè).mm-2)(P＜0.05)。增茸素處理組30d茸皮組織切片中的動脈數(shù)(8.74±2.90個(gè).mm-2)和神經(jīng)數(shù)(8.62±2.18個(gè).mm-2)顯著地高于自然生長組30d的(2.53±1.17、3.62±2.32個(gè).mm-2)(P＜0.05),因此增茸素對鹿茸早期生長的影響較大。馬鹿茸從生長30d到60d,各組織層的變化以茸皮層最明顯,以間充質(zhì)細(xì)胞層的生長變化最小。

植酸酶預(yù)處理飼料對斑點(diǎn)叉尾鮰生長及磷利用率的影響/黃可（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院 黑龍江省哈爾濱 150030），楊雨虹，劉行彪等//動物營養(yǎng)學(xué)報(bào).-2011,23(7).- 1217～1224

本試驗(yàn)通過體外預(yù)處理方式在飼料中添加植酸酶,旨在探討其對斑點(diǎn)叉尾鮰生長及磷利用率的影響。試驗(yàn)以初始條件一致、平均體重為(1.74±0.02)g的450尾斑點(diǎn)叉尾鮰(Icta-lurus punctatus)稚魚為研究對象,采用單因素完全分組設(shè)計(jì),隨機(jī)分為5個(gè)組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)30尾魚。D0組為對照組,飼喂基礎(chǔ)飼料(所用混合蛋白質(zhì)源未經(jīng)植酸酶處理)；D1、D2、D3、D4組為試驗(yàn)組,通過預(yù)處理方式分別在基礎(chǔ)飼料中添加300、500、1 000、1 500U/kg的植酸酶,制成試驗(yàn)飼料進(jìn)行飼喂,試驗(yàn)持續(xù)90d。結(jié)果表明：植酸酶預(yù)處理飼料顯著增加魚體的增重率、特定生長率和蛋白質(zhì)效率,降低飼料系數(shù)(P＜0.05),且上述指標(biāo)均以D3組試驗(yàn)魚表現(xiàn)最好。植酸酶預(yù)處理飼料還可以顯著提高飼料中磷的表觀消化率及魚體椎骨磷含量,降低單位增重磷排放量(P＜0.05)。飼料中磷的表觀消化率隨植酸酶添加濃度的增加而提高,且D3和D4組顯著高于其他試驗(yàn)組(P＜0.05)。單位增重磷排放量與植酸酶添加濃度在一定范圍內(nèi)呈顯著的負(fù)相關(guān)(P＜0.05),但D3和D4組間差異不顯著(P＞0.05)。魚體椎骨磷含量以D3組為最高,顯著高于D1和D2組(P＜0.05),但與D4組差異不顯著(P＞0.05)。與對照組相比,各試驗(yàn)組全魚粗蛋白質(zhì)、粗灰分、鈣、磷含量顯著提高(P＜0.05),粗脂肪含量顯著降低(P＜0.05)。綜上所述,通過預(yù)處理方式在飼料中添加植酸酶可以促進(jìn)斑點(diǎn)叉尾鮰魚體生長并提高飼料中磷的利用率,降低飼料系數(shù)。從斑點(diǎn)叉尾鮰魚體生長及磷利用率等方面綜合考慮,通過預(yù)處理方式在飼料蛋白質(zhì)原料中添加1 000U/kg植酸酶最為適宜。

熱應(yīng)激建鯉飼料中吡啶甲酸鉻的適宜添加量/王晶晶（南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院江蘇省水產(chǎn)動物營養(yǎng)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室江蘇南京 210095），劉文斌，徐維娜等//動物營養(yǎng)學(xué)報(bào).-2011,23(7).-1209～1216

本研究旨在探討熱應(yīng)激建鯉(Cyprinus carpiovar.Jian)飼料中吡啶甲酸鉻的適宜添加量。試驗(yàn)選取初始均重為(32.88±0.17)g的建鯉360尾,隨機(jī)分為6組(每組4個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)15尾魚),分別投喂在基礎(chǔ)飼料中添加不同水平吡啶甲酸鉻的試驗(yàn)飼料,各組飼料Cr3+理論添加量分別為0、300、600、900、1 200和1 500μg/kg。試驗(yàn)在室內(nèi)可控溫循環(huán)流水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進(jìn)行,馴化期10d(26℃),正試期60d(“常溫-高溫-常溫”應(yīng)激模式：20d,26℃；20d,31℃；20d,26℃)。結(jié)果表明：1)飼料中添加600和900μg/kg吡啶甲酸鉻(以Cr3+計(jì),下同)可顯著提高建鯉的增重率和蛋白質(zhì)效率,降低飼料系數(shù)(P＜0.05)。與對照組相比,當(dāng)添加量達(dá)到1 500μg/kg時(shí),增重率下降3.4%(P＞0.05)。隨著飼料中吡啶甲酸鉻添加量的升高,建鯉肝體比呈上升趨勢,900、1 200和1 500μg/kg添加組肝體比顯著高于對照組(P＜0.05)。2)飼料中吡啶甲酸鉻的添加量對建鯉肌肉粗脂肪、灰分和水分含量的影響不顯著(P＞0.05),對肝胰臟粗脂肪含量也無顯著影響(P＞0.05),但300和600μg/kg添加組肌肉和肝胰臟粗蛋白質(zhì)含量較對照組顯著升高(P＜0.05)。3)飼料中添加600μg/kg吡啶甲酸鉻可顯著提高建鯉血清中白蛋白含量(P＜0.05),添加1 500μg/kg吡啶甲酸鉻可顯著降低血清總蛋白和白蛋白含量(P＜0.05),添加600、900、1 200和1 500μg/kg吡啶甲酸鉻可顯著降低血清中膽固醇含量(P＜0.05),添加900、1 200、1 500μg/kg吡啶甲酸鉻可顯著降低血清中甘油三酯含量(P＜0.05)。綜上所述,在飼料中添加600μg/kg吡啶甲酸鉻(飼料中Cr3+實(shí)際含量為912.94μg/kg)有較好的抗熱應(yīng)激效果,可促進(jìn)熱應(yīng)激建鯉生長并提高其肌肉粗蛋白質(zhì)含量。

H9N2亞型豬流感病毒誘導(dǎo)小鼠肺急性損傷模型的研究/徐明舉（河北北方學(xué)院動物科技學(xué)院 河北張家口 075000），王存連，魏東等//畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào).-2011,42(6).-838～844

本試驗(yàn)采用100μLA/swine/HeBei/012/2008/(H9N2)豬流感病毒(H9N2SIV)經(jīng)鼻腔接種6～8周齡的BALB/c小鼠,通過定時(shí)稱量小鼠的采食量和體質(zhì)量、觀察肺病理組織學(xué)變化以及測量肺系數(shù)、肺濕質(zhì)量/干質(zhì)量、動脈血?dú)夂椭夤芊闻莨嘞匆簝?nèi)炎性細(xì)胞等擬建立H9N2SIV感染誘導(dǎo)小鼠急性肺損傷模型。結(jié)果顯示：(1)感染后第2d試驗(yàn)組小鼠出現(xiàn)精神沉郁、被毛松亂、采食量和體質(zhì)量下降。感染后的第3d開始感染小鼠采食量和體質(zhì)量顯著下降(P＜0.01)；(2)試驗(yàn)組小鼠在感染后的第3d末出現(xiàn)死亡,死亡率約為62.5%,剖檢可見肺部明顯水腫、出血,肺泡內(nèi)有大量的炎性細(xì)胞滲出；肺系數(shù)和濕質(zhì)量/干質(zhì)量比顯著增加(P＜0.01)；(3)與對照組相比感染組小鼠動脈血中氧分壓從第2d開始降低,第4d出現(xiàn)明顯的差異(P＜0.01),第6d最低時(shí)僅為(6.79±1.27)kPa,呈現(xiàn)嚴(yán)重的低氧血癥,同時(shí),二氧化碳分壓顯著上升；(4)支氣管灌洗液(BALF)內(nèi)炎性細(xì)胞在感染后第4～8d增加顯著,尤其以肺泡巨噬細(xì)胞和多核型白細(xì)胞增加最為明顯(P＜0.01)。本研究證實(shí)采用A/swine/HeBei/012/2008/(H9N2)病毒感染小鼠引起肺組織彌漫性急性滲出性炎癥為主的病理過程和嚴(yán)重的低氧血癥,表明成功建立了H9N2SIV誘導(dǎo)小鼠的肺損傷模型,為進(jìn)一步研究其對哺乳動物肺損傷的致病機(jī)理奠定基礎(chǔ)。

不同脂肪源對異育銀鯽體脂沉積、內(nèi)源酶活性和脂肪酸組成的影響/王煜恒（鹽城工學(xué)院海洋技術(shù)系江蘇省沿海池塘養(yǎng)殖生態(tài)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 江蘇鹽城 224051），王愛民，劉文斌等//動物營養(yǎng)學(xué)報(bào).-2011,23(4).-604～614

本試驗(yàn)旨在探討飼料中不同脂肪源對異育銀鯽體脂沉積、脂類代謝酶活性、消化酶活性和魚體組織中脂肪酸組成的影響。選擇尾均重(6.04±0.05)g的健康異育銀鯽魚種525尾,馴養(yǎng)1周后,隨機(jī)分為5組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)35尾魚。在基礎(chǔ)飼料中分別添加4%的魚油、豆油、豬油、花生油和混合油(魚油?豆油?豬油=3?4?3),制成5種等氮等能試驗(yàn)飼料。試驗(yàn)期為60 d。結(jié)果表明,魚油組肝胰臟中粗脂肪含量顯著低于其他各組(P＜0.05),各組間腹脂率以及肌肉中脂肪含量沒有顯著差異(P＞0.05)。魚油組肝胰臟脂蛋白酯酶和肝酯酶活性顯著高于豬油組和花生油組(P＜0.05),魚油組和豆油組腸道和肝胰臟中蛋白酶活性顯著高于豬油組(P＜0.05),但與花生油組和混合油組無顯著差異(P＞0.05)。豆油組和混合油組肝胰臟脂肪酶活性顯著高于豬油組(P＜0.05),且混合油組腸道脂肪酶活性顯著高于豬油組(P＜0.05),其他各組之間沒有顯著差異(P＞0.05)。各組間肝胰臟和腸道中淀粉酶活性沒有顯著差異(P＞0.05),但腸道淀粉酶活性普遍高于肝胰臟淀粉酶活性。魚油組肌肉和肝胰臟中飽和脂肪酸(SFA)、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)含量顯著高于其他組(P＜0.05)。異育銀鯽肌肉和肝胰臟中亞油酸(C18∶2n-6)含量均以豆油組最高,魚油組最低,且上述2組間差異顯著(P＜0.05)。結(jié)果顯示,魚油能提高肝胰臟中脂蛋白酯酶和肝酯酶的活性,從而降低魚體脂肪沉積,而豬油的作用相反；飼料中脂肪酸組成影響異育銀鯽魚體組織中脂肪酸的組成。

飼糧蛋白質(zhì)水平對雌性藍(lán)狐繁殖性能的影響/張志強(qiáng)（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所 北京 100081），張鐵濤，耿業(yè)業(yè)等//動物營養(yǎng)學(xué)報(bào).-2011,23(7).- 1253～1258

本試驗(yàn)旨在研究不同蛋白質(zhì)水平飼糧對雌性藍(lán)狐繁殖性能的影響。選擇健康、平均體重為(6.23±0.67)kg的雌性初產(chǎn)藍(lán)狐180只,隨機(jī)分成4組(每組45個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)1只藍(lán)狐),分別飼喂蛋白質(zhì)水平為36%(Ⅰ組)、32%(Ⅱ組)、28%(Ⅲ組)、24%(Ⅳ組)的試驗(yàn)飼糧,試驗(yàn)期為2010-02-13—2010-06-05。結(jié)果表明,Ⅰ、Ⅱ組藍(lán)狐的發(fā)情開始時(shí)間早于Ⅲ、Ⅳ組,各組藍(lán)狐的受胎率均呈現(xiàn)出正態(tài)分布。Ⅱ組藍(lán)狐的受配率最高,并顯著高于Ⅲ組(P＜0.05)。不同蛋白質(zhì)水平飼糧對藍(lán)狐的窩產(chǎn)仔數(shù)沒有顯著影響(P＞0.05),但Ⅰ、Ⅱ組仔狐的初生個(gè)體重顯著高于Ⅳ組(P＜0.05)。隨著飼糧蛋白質(zhì)水平的降低,藍(lán)狐的受胎率、仔狐的初生窩重均呈現(xiàn)先增大后減小的趨勢,仔狐的初生成活率呈現(xiàn)降低的趨勢,但是都未達(dá)到顯著水平(P＞0.05)。由此得出,雌性藍(lán)狐繁殖期飼糧適宜蛋白質(zhì)水平為33.14%。

低聚半乳糖對延邊黃牛犢牛糞樣菌群、血液指標(biāo)及生長性能的影響/王智航（延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院 吉林延吉 133400），姜成哲，崔明勛等//動物營養(yǎng)學(xué)報(bào).-2011,23(7).-1247～1252

本試驗(yàn)旨在調(diào)查低聚半乳糖(galactooligosaccharides,GOS)對延邊黃牛犢牛糞樣菌群、血液指標(biāo)及生長性能的影響。選取12頭初生重相近,體況良好的新生犢牛,按體重和性別隨機(jī)分為3組,每組4頭,于2～29日齡分別日灌服GOS0(對照組)、10(L組)、15g/d(H組)。并于8、15、22和29日齡采集糞樣,進(jìn)行雙歧桿菌和大腸桿菌的培養(yǎng)計(jì)數(shù)；15、29日齡采集血樣,測定血液生理、生化指標(biāo)；測定犢牛初生重和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)末重。結(jié)果表明：1)初生犢牛糞樣大腸桿菌為優(yōu)勢菌,隨日齡增加,大腸桿菌數(shù)降低,雙歧桿菌數(shù)增加,22日齡后,雙歧桿菌為優(yōu)勢菌；GOS能夠顯著增加犢牛糞樣雙歧桿菌數(shù)量(P＜0.05)；2)犢牛飼喂GOS顯著提高了29日齡紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)(P＜0.05),L組15和29日齡、H組29日齡紅細(xì)胞(RBC)數(shù)顯著降低(P＜0.05),L組15日齡血紅蛋白濃度(HGB)顯著降低(P＜0.05)；3)末重、平均日增重均為L組顯著高于對照組(P＜0.05)。結(jié)果提示,犢牛飼喂GOS可改善腸道菌群平衡,使雙歧桿菌成為腸道優(yōu)勢菌,提高生長速度,而相對的造血原料的不足加重,但可以緩解低MCHC型貧血的發(fā)生；在本試驗(yàn)條件下,添加10g/d效果較好。

L-肉堿對飼糧中添加葵花油的產(chǎn)蛋雞抗氧化功能及雞蛋品質(zhì)的影響/徐少輝（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室 北京 100081），張亞男，武書庚等//動物營養(yǎng)學(xué)報(bào).-2011,23(7).- 1201～1208

本試驗(yàn)旨在探討L-肉堿和葵花油對產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能、抗氧化功能和雞蛋品質(zhì)的影響。選用288只產(chǎn)蛋率和體重相近、健康的27周齡海蘭褐產(chǎn)蛋雞,隨機(jī)分成4組,每組6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)12只雞。對照組試雞飼喂基礎(chǔ)飼糧,試驗(yàn)組試雞分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加3%葵花油、3%葵花油+200m g/kgL-肉堿和3%葵花油+400m g/kgL-肉堿的飼糧。試驗(yàn)期6周。結(jié)果表明：1)飼糧中添加L-肉堿和葵花油對產(chǎn)蛋雞的生產(chǎn)性能影響不顯著(P＞0.05)。2)與對照組相比,飼糧中添加3%葵花油顯著降低第6周雞蛋哈夫單位(P＜0.05),添加L-肉堿可緩解葵花油造成的哈夫單位的下降；葵花油對第6周雞蛋蛋殼強(qiáng)度無顯著影響(P＞0.05),與對照組相比,L-肉堿顯著提高了第6周雞蛋蛋殼強(qiáng)度(P＜0.05)并有提高蛋白高度的趨勢(P=0.06)。3)與對照組相比,飼糧中添加3%葵花油顯著降低第6周蛋雞血清總抗氧化能力(T-AOC)(P＜0.05),添加L-肉堿緩解了因葵花油而造成的T-AOC的下降；葵花油使得第6周蛋雞血清丙二醛(MDA)含量顯著升高(P＜0.05),添加L-肉堿可緩解添加葵花油導(dǎo)致的MDA含量的升高；葵花油對血清超氧化物歧化酶(SOD)活性無顯著影響(P＞0.05),但顯著提高了血清谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性(P＜0.05),飼糧中添加400m g/kgL-肉堿后,顯著提高了第6周蛋雞血清SOD活性(P＜0.05),但對血清GSH-Px活性無顯著影響(P＞0.05)。結(jié)果提示,飼糧中添加3%葵花油降低了蛋雞蛋品質(zhì),影響了機(jī)體抗氧化能力,添加L-肉堿可改善雞蛋品質(zhì)并提高蛋雞的抗氧化功能。

玉米芯-柑橘渣混合青貯料對肉牛生長性能和血清生化指標(biāo)的影響/志莉（四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所 四川雅安 625014），薛白，王之盛等//動物營養(yǎng)學(xué)報(bào).-2011,23(5).-647～653

本文旨在研究玉米芯-柑橘渣混合青貯料對肉牛生長性能、養(yǎng)分消化率和血清生化指標(biāo)的影響。選擇24頭平均體重(173.13±5.10)kg的健康西門塔爾雜種肉牛,隨機(jī)分為4個(gè)處理,每個(gè)處理6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)1頭牛,飼養(yǎng)時(shí)間為50 d。4個(gè)處理分別是：1)對照組(CON),40%精料+60%牛鞭草；2)試驗(yàn)1組(S20),40%精料+40%牛鞭草+20%青貯料(玉米芯-柑橘渣混合青貯料)；3)試驗(yàn)2組(S30),40%精料+30%牛鞭草+30%青貯料；4)試驗(yàn)3組(S40),40%精料+20%牛鞭草+40%青貯料。結(jié)果表明,S20組平均日增重最高,比CON組提高17.14%(P＜0.01),S30組干物質(zhì)采食量最高,比CON組提高14.51%(P＜0.05),S20組肉牛料重比最低(P＞0.05)。4個(gè)處理間干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維的表觀消化率無顯著差異(P＞0.05),但是S20組有機(jī)物的消化率顯著高于CON組(P＜0.05)。各處理間總蛋白、葡萄糖含量無顯著差異(P＞0.05),3個(gè)試驗(yàn)組尿素氮含量均極顯著低于CON組(P＜0.01),分別降低了23.09%、26.10%和30.32%。由此可知,玉米芯-柑橘渣混合青貯料替代部分牛鞭草能提高肉牛生長性能,主要表現(xiàn)在提高肉牛采食量、平均日增重和養(yǎng)分消化率上。玉米芯-柑橘渣混合青貯料的添加量以占飼糧的20%為宜。

飼糧中添加L-肉堿對產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)及脂質(zhì)代謝的影響/徐少輝（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室 北京 100081），武書庚，張海軍等//動物營養(yǎng)學(xué)報(bào).-2011,23(4).-640～646

本試驗(yàn)旨在研究飼糧中添加L-肉堿對產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)和脂質(zhì)代謝的影響。選用576只產(chǎn)蛋率和體重相近、健康的53周齡海蘭褐產(chǎn)蛋雞,隨機(jī)分成6個(gè)處理,每個(gè)處理6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)16只雞。6種試驗(yàn)飼糧分別添加0、25、50、100、200或400m g/kgL-肉堿,試驗(yàn)期6周。結(jié)果表明：1)飼糧中添加L-肉堿未顯著影響產(chǎn)蛋率、日采食量、平均蛋重和料蛋比(P＞0.05)；2)飼糧中添加L-肉堿顯著提高了試驗(yàn)第3周時(shí)雞蛋的蛋白高度和哈夫單位(P＜0.05),其中以25m g/kg組最佳；添加L-肉堿還提高了試驗(yàn)第6周時(shí)雞蛋蛋殼強(qiáng)度(P＜0.05),其中25m g/kg組和200m g/kg組較佳；飼糧中添加L-肉堿有提高試驗(yàn)第3周和第6周蛋黃顏色的趨勢(P=0.07,P=0.06),對蛋殼厚度和蛋形指數(shù)影響不顯著(P＞0.05)；3)飼糧中添加L-肉堿顯著降低了產(chǎn)蛋雞血清中甘油三酯和低密度脂蛋白膽固醇含量及試驗(yàn)第6周總膽固醇和高密度脂蛋白膽固醇含量(P＜0.05)。由此可知,飼糧添加L-肉堿不影響產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能,但可改善雞蛋品質(zhì),降低血脂；綜合考慮成本和雞蛋品質(zhì),以飼糧中添加L-肉堿25mg/kg為宜。

羰氨縮合尿素的營養(yǎng)價(jià)值評價(jià)/李興偉（四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所 四川雅安 625014），薛白，王之盛等//動物營養(yǎng)學(xué)報(bào).-2011,23(7).-1239～1246

本研究旨在評價(jià)羰氨縮合尿素(carbonyl-amino urea,CAU)對反芻家畜的營養(yǎng)價(jià)值。首先用體外法評定CAU的釋氨速度,然后以安裝有永久性瘤胃瘺管的3頭藏羊作為試驗(yàn)動物,采用3×3拉丁方試驗(yàn)設(shè)計(jì),評定CAU對藏羊瘤胃液pH、氨氮(NH3-N)和微生物蛋白(MCP)以及血清生化指標(biāo)的影響。體外試驗(yàn)中,CAU飼糧組8h以前各時(shí)間點(diǎn)的NH3-N濃度均低于磷酸脲(UP)飼糧組,高于豆粕(SBM)飼糧組,8h NH3-N濃度達(dá)到最大值(42.76mg/dL),此時(shí)低于UP組11.27%,高于SBM組44.08%(P＜0.01)；體內(nèi)試驗(yàn),在24h內(nèi),3個(gè)飼糧組瘤胃pH都是先降低后升高,食后6h,均降到最低,且CAU組與UP組無顯著差異(P＞0.05)；14h后,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)各組間均無顯著差異(P＞0.05)；CAU組的瘤胃液pH在8h之后高于UP組和SBM組,直到24h時(shí)才與UP組持平,低于SBM組；CAU組瘤胃液NH3-N濃度在2h時(shí),低于UP組(P＜0.01),高于SBM組(P＜0.05),在8h時(shí),SBM組與UP組瘤胃液NH3-N濃度降到最低,此時(shí),CAU組高于SBM組；24h內(nèi)CAU組藏羊瘤胃液MCP平均為17.25mg/dL,高于UP組3.01%,高于SBM組30.45%；各組間藏羊血清中白蛋白、總蛋白、尿素氮、谷丙轉(zhuǎn)氨酶,谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均無顯著差異(P＞0.05)。結(jié)果提示,飼糧中添加CAU,可使NH3-N的釋放速度減緩,保證瘤胃內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,促進(jìn)MCP合成,提高尿素氮利用水平,且不會增加藏羊的肝臟負(fù)擔(dān)。

發(fā)酵乳酸桿菌對肉雞胰腺和小腸消化酶活性及營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響/郭元晟（內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院），閆素梅，張和平等//動物營養(yǎng)學(xué)報(bào).-2011,23(7).-1225～1232

本試驗(yàn)旨在研究添加不同水平的發(fā)酵乳酸桿菌(L.fermentum F-6)對肉雞的胰腺、小腸消化酶活性及營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響。試驗(yàn)以玉米和大豆粕為主要原料配制飼糧,采用單因子隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法,選擇1日齡體重相近、健康的愛拔益加(AA)肉雞240只(雌雄各占1/2),稱重后隨機(jī)分為4個(gè)組,1個(gè)對照組和3個(gè)L.fermentumF-6組,每組6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10只雞。對照組肉雞不飼喂L.fermentumF-6,L.fermentumF-6組通過飲水添加L.fermentumF-6,添加水平分別為2×105、2×106和1×107CFU/mL。試驗(yàn)期42d。結(jié)果表明：1)添加L.fer-mentumF-6對肉雞空腸和胰腺組織淀粉酶活性、空腸和回腸胰蛋白酶活性及十二指腸糜蛋白酶活性有顯著的增強(qiáng)效果(P＜0.05),尤以添加水平為2×106CFU/mL的F2組效果最好,淀粉酶活性比對照組分別提高74.34%和65.42%(P＜0.05),胰蛋白酶活性比對照組分別提高41.61%和33.43%(P＜0.05),十二指腸糜蛋白酶活性比對照組提高56.08%(P＜0.05),但對肉雞十二指腸和回腸淀粉酶活性、十二指腸和胰腺組織胰蛋白酶活性及十二指腸、空腸、回腸和胰腺組織脂肪酶活性的影響均不顯著(P＞0.05)。2)添加L.fermentumF-6可顯著提高肉雞回腸粗蛋白質(zhì)和能量表觀消化率(P＜0.05),尤以添加水平為2×106CFU/mL時(shí)效果最好。由此可知,添加L.fermentumF-6對肉雞的消化功能有顯著增強(qiáng)作用,且增強(qiáng)效果與添加水平有關(guān),添加水平為2×106CFU/mL時(shí),效果最明顯。