曹長(zhǎng)春 韓永紅 張艷軍 劉斌 劉家秀

高效液相色譜法在藥物合成中的應(yīng)用

曹長(zhǎng)春 韓永紅 張艷軍 劉斌 劉家秀

目的介紹HPLC在藥物合成中的應(yīng)用。方法舉例說明HPLC在藥物合成中的應(yīng)用并與傳統(tǒng)方法作比較。結(jié)果HPLC已廣泛應(yīng)用于藥物合成。結(jié)論HPLC在藥物合成中的應(yīng)用前景廣闊。

HPLC;藥物;合成

高效液相色譜(high performance liquid chromatography，HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上引入氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的［1］。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒填料雖具有高柱效，但阻力高，需用高壓輸送流動(dòng)相，故又稱高壓液相色譜，又因分析速度快被稱為高速液相色譜。藥物合成需要具有高分離效能的分析方法作為“眼睛”來判斷反應(yīng)的進(jìn)程、分析組分的純度以及雜質(zhì)的含量。HPLC作為一種高效的分析方法在藥物合成中起著不可或缺的作用。

1 HPLC與化學(xué)藥物合成

1.1 跟蹤反應(yīng)和探討機(jī)理 采用合適的分析方法對(duì)藥物合成反應(yīng)進(jìn)行監(jiān)測(cè)、判斷反應(yīng)的進(jìn)程以及終點(diǎn)是至關(guān)重要的。薄層色譜法(thin layer chromatography，TLC)和HPLC是目前監(jiān)測(cè)藥物合成反應(yīng)的主要方法，后者在合成反應(yīng)中的應(yīng)用實(shí)例很多。吡喃鹽是很多有機(jī)合成反應(yīng)的前驅(qū)化合物，單繼宏等用HPLC跟蹤實(shí)驗(yàn)首次合成出了銀橋聯(lián)的多苯基吡喃鹽，確定了反應(yīng)在熱力學(xué)上的可行性，也明確了各反應(yīng)因素影響［2］。陶建清等應(yīng)用電噴霧質(zhì)譜和HPLC等譜學(xué)手段研究phen-5，6-dione與乙二胺、二胺基順式丁烯二腈等物質(zhì)的相互作用，發(fā)現(xiàn)羰基和胺基加成形成中間體后脫水形成雙鍵，如能形成共軛體系將脫氫形成稠環(huán)共軛化合物［3］。過氧化氫異丙苯(CHP)是重要的工業(yè)原料，可由異丙苯和溴苯催化合成，反應(yīng)體系有原料、催化劑、產(chǎn)物和副產(chǎn)物，合成過程需進(jìn)行跟蹤分析，一般的分析化學(xué)方法很難達(dá)到要求。向瑞禮等用HPLC測(cè)定CHP的合成反應(yīng)混合物體系，能快速觀察到各物質(zhì)的變化［4］。HPLC能對(duì)藥物合成進(jìn)行在線實(shí)時(shí)監(jiān)控，這是化學(xué)分析很難達(dá)不到的。

1.2 檢測(cè)組分含量 分析合成產(chǎn)物以及雜質(zhì)的含量也是HPLC的重要用途。張惠等采用反相HPLC對(duì)雙酚芴的粗產(chǎn)品和精制后的產(chǎn)品進(jìn)行分析，采用外標(biāo)法定量獲得了滿意的結(jié)果［5］。狄斌等運(yùn)用反相HPLC及TLC對(duì)伊立替康樣品中有關(guān)物質(zhì)的組成成分進(jìn)行研究，確證樣品中的主要雜質(zhì)為SN-38和伊立替康羥酸［6］。吳璟等建立了一種用HPLC直接測(cè)定2，4-二氯喹唑啉含量的方法［7］。范宗良等建立了異佛爾酮合成產(chǎn)物的HPLC分析法［8］。

2 HPLC與傳統(tǒng)方法比較

TLC、柱色譜等屬于傳統(tǒng)分析，HPLC、質(zhì)譜等屬于儀器分析。后者在精密性、連續(xù)性、重現(xiàn)性等方面有著前者達(dá)不到的優(yōu)點(diǎn)，后者的主要缺點(diǎn)是不靈活，須按固定程序操作，更改條件比傳統(tǒng)方法繁瑣，同時(shí)，成本高，先期投入大、人員培訓(xùn)周期長(zhǎng)、運(yùn)行維護(hù)的人力、物力費(fèi)用高。相反，這些正是傳統(tǒng)分析的優(yōu)點(diǎn)。定量分析多組分有機(jī)混合物或在有標(biāo)準(zhǔn)品的情況下確定未知物時(shí)，HPLC比TLC準(zhǔn)確度更高、重現(xiàn)性更好。原理上HPLC與經(jīng)典液相色譜沒有本質(zhì)差別，其特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測(cè)器和高效微粒固定相。相比氣相色譜，HPLC優(yōu)點(diǎn)在于分離后樣品不被破壞，可以收集或制備單一組分。

3 總結(jié)

HPLC對(duì)反應(yīng)監(jiān)測(cè)和含量分析等至關(guān)重要，制備液相更擴(kuò)大了HPLC在藥物合成中的應(yīng)用范圍。隨著固定相的發(fā)展，HPLC有可能成為解決藥物合成分析問題最有效的方法。

［1］張玉奎，張維冰，鄒漢法.分析化學(xué)手冊(cè).第六分冊(cè)，液相色譜分析.化學(xué)工業(yè)出版社，2000:126.

［2］單繼宏，寧桂玲，李新成，等.反相高效液相色譜法在合成四苯基銀橋聯(lián)吡喃鹽中的應(yīng)用;分析科學(xué)學(xué)報(bào)，2003，19(6):531-533.

［3］陶建清，孫沖，張利民，等;電噴霧質(zhì)譜法和高效液相色譜法對(duì)dpq、ttd 合成機(jī)理探討;應(yīng)用化學(xué)，2005，22(11):1234-1238.

［4］向瑞禮，祝曉紅，匡德中;高效液相色譜法檢測(cè)合成反應(yīng)產(chǎn)物過氧化氫異丙苯;廣西化工，2000(S1):109-110.

［5］張惠，呂宏飛，劉傳玉，等;反相高效液相色譜法測(cè)定合成產(chǎn)物中的雙酚芴;色譜，2007，25(3):445-446.

［6］狄斌，馮芳，于立潔，等;抗癌新藥伊立替康有關(guān)物質(zhì)的研究;中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，30(3):196-198.

［7］吳碌，何堅(jiān)剛;高效液相色譜法測(cè)定出口抗癌新藥中間體2，4-二氯喹唑啉;海峽藥學(xué)，2007，19(10):70-71.

［8］范宗良，董宇航，李貴賢，等;異佛爾酮合成產(chǎn)物的高效液相色譜法分析;分析儀器，2008(6):30-31.

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