楊金新

免疫測定血清脂蛋白(a)與臨床意義

楊金新

目的 探討免疫測定血清脂蛋白(a)的方法與臨床意義。方法 對臨床120例冠心病疾病患者的血清Lp(a)行免疫測定及臨床意義。結(jié)果 通常以300 mg/L為分界。高于此水平者冠心病危險性明顯增高。結(jié)論 將Lp(a)值在300 mg/L以上定為病理性增高。Lp(a)可作為動脈硬化性心腦血管疾病的獨立危險因素指標(biāo)。此外，Lp(a)增高還可見于各種急性時相反應(yīng)、腎病綜合征、糖尿病腎病、妊娠和服用生長激素等。

血清脂;免疫測定;臨床意義

血清脂蛋白(a)［Lp(a)］是一種大分子糖蛋白，由于其載脂蛋白［Apo(a)］中唾液酸含量很高，故也是一種急性期反應(yīng)物質(zhì)，并在急性反應(yīng)中起重要作用［1］。Lp(a)是致冠心病的一個獨立危險因素;Lp(a)測定在早期診斷和預(yù)防糖尿病并發(fā)冠心病中有一定應(yīng)用價值

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取臨床2010年收治的患者120例，男85例，女35例，年齡40～80歲，冠心病52例，糖尿病腎病患者28例，脂肪肝22例，其他炎癥18例。均空腹采血2 d內(nèi)檢測，采取McAb ELISA測定法。

1.2 試劑 包被緩沖液:0.02 mol/L碳酸鹽緩沖液，PH9.5;包被抗體與酶標(biāo)抗體:用McAb混合液，以硫酸銨沉淀法制備抗tapo(a)-IgG，部分作包被用，部分以過碘酸鹽法交聯(lián)辣根過氧化物酶(RZ≥3)得酶標(biāo)抗體，-20℃保存可穩(wěn)定數(shù)月;稀釋/封閉液:pH7.4緩沖液含磷酸鹽0.01 mol/L及氯化鈉0.15 mol/L，臨用前取適量緩沖液，加入適量小牛血清及吐溫-20;底物溶液0.lmol/L檸檬酸及0.2 mol/LNa2HPO4緩沖液，pH5.0，臨用前每100 m l緩沖液中加人鄰苯二胺0.1 g及30%H2O20.1 ml;終止液2 mol/LH2SO4;洗滌液0.15 mol/L NaCl，每升含吐溫一 20 0.5 m l。

1.3 操作 包被，聚苯乙烯板，96孔?？筧po(a)-IgG用包被液稀釋成10以/m l濃度，每孔加150μl，4℃過夜。包被后的小孔用洗滌液洗3次，每次5 min。每孔中加入封閉液0.15 ml，37℃放置30 min后，再用洗滌液洗3次。校準(zhǔn)血清1∶200稀釋起，用稀釋液倍比稀釋8管，作校準(zhǔn)曲線用。血清標(biāo)本1∶500稀釋，吸光度過低或過高的標(biāo)本可稀釋成1∶100或1∶2000后復(fù)查。

2 結(jié)果

正常人Lp(a)數(shù)據(jù)呈明確偏態(tài)分布。80%的正常人＜200 mg/L，個別人可高達l000 mg/L以上。通常以300 mg/L為分界線，高于此水平者表明冠心病危險性明顯增高。動脈粥樣硬化患者為31/52占59.6%，糖尿病腎病患者17/28占60%，腦血管病12/22占54%。

3 討論

Lp(a)主要在肝臟合成后分泌入血，血漿Lp(a)濃度主要取決于Lp(a)的合成速率，而與分解速率基本無關(guān);人群中Lp(a)濃度個體差異極大，濃度范圍可在0～1000 ml/L，這種差異最主要由ApoA基因位點決定。在個體中Lp(a)的血漿濃度相當(dāng)穩(wěn)定，這主要由遺傳因素決定，幾乎不受年齡、性別、血脂、飲食等影響，但有報道認為絕經(jīng)后女性的Lp(a)濃度較絕經(jīng)前升高［2］。

Lp(a)測定標(biāo)準(zhǔn)化研究極為困難，但臨床實驗室又迫切需要有一種可靠的參考血清(二級標(biāo)準(zhǔn))，使不同分析系統(tǒng)及世界各地實驗室測得的數(shù)據(jù)比較接近或有可比性。由于Lp(a)分子高度異構(gòu)，要使參考血清組成與一切患者的標(biāo)本一致是不可能的，但不能不提出一份參考血清作為國際標(biāo)準(zhǔn)化的基礎(chǔ)，一般主張選用apo(a)分子大小適中、TG正常的血清。Lp(a)水平主要決定于遺傳因素，家族性高LP(a)與冠心病發(fā)病傾向相關(guān)。男、女之間與不同年齡組間無明顯差異，環(huán)境、飲食與藥物對Lp(a)水平的影響也不明顯，降膽固醇藥洛伐他汀不會使Lp(a)下降，吸煙也無影響，但嚴重肝病時Lp(a)水平下降［3］，急性時期反應(yīng)(如急性心肌梗死、外科手術(shù)、急性風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)則上升?，F(xiàn)在將高LP(a)水平看作動脈粥樣硬化性疾病(心、腦血管病，周圍動脈硬化)的獨立危險因素，因為它與高血壓、吸煙、高 VLDL-C(高TC)、低HDL-C等因素?zé)o明顯相關(guān)。但LDL-C較高時LP(a)的危險性就更高。在動脈粥樣硬化病變形成中，LP(a)與 ApoB起協(xié)同作用。冠狀動脈搭橋手術(shù)者，高LP(a)易于引起血管再狹窄。因為Apo(a)與PMG在結(jié)構(gòu)上有同源性，Apo(a)故可致血凝塊(纖維蛋白)的溶解，促進動脈粥樣硬化形成。

［1］趙永平.臨床血脂學(xué).長沙:湖南科學(xué)技術(shù)出版社，1997:64.

［2］王克勤.脂蛋白與動脈粥樣硬化，北京:人民衛(wèi)生出版社，1995:180-183.

［3］姜春義，呂國良.脂蛋白(a)檢測及其臨床意義心血管康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志，2000，9(2):87-88.

163001 黑龍江省大慶油田總醫(yī)院