陸增生 施維群

1.浙江中醫(yī)藥大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院 (浙江杭州，310053) 2.浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院肝病科

肝纖維化 (hepatic fibros，HF)是指肝細(xì)胞發(fā)生壞死及炎癥刺激時(shí)，肝臟內(nèi)纖維結(jié)締組織異常增生的病理過程。從現(xiàn)有的肝纖維化的發(fā)生發(fā)展研究機(jī)制中我們可以知道，在肝纖維化形成的過程中，肝星狀細(xì)胞 (hepatic satellite cell，HSC)的活化是肝纖維化的中心環(huán)節(jié)［1］。其中激活的HSC被認(rèn)為是促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì) (extracelluar matrix，ECM)過度沉積的主要細(xì)胞，而多種細(xì)胞因子參與了肝星狀細(xì)胞的激活，其中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(trans-forming growth factor l，TGF-β1)被認(rèn)為是最關(guān)鍵的因素之一［2，3］，其可激活HSC和調(diào)節(jié)ECM的合成和降解平衡。以干擾TGF-β1靶點(diǎn)的抗肝纖維化治療己成為當(dāng)今研究的熱點(diǎn)之一。TGF-β1是一族結(jié)構(gòu)相關(guān)、功能相似的活性多肽，為雙硫鍵聯(lián)結(jié)的二聚體堿性蛋白，分子量為25KD。在生理狀態(tài)下，TGF-β1主要由淋巴細(xì)胞、血小板和巨噬細(xì)胞分泌;在慢性炎癥或肝纖維化時(shí)，間質(zhì)細(xì)胞對(duì)其表達(dá)增加，而且肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞對(duì)TGF-β1表達(dá)被啟動(dòng)。據(jù)研究，TGF-β1可促進(jìn)HSC增殖，同時(shí)促進(jìn)HSC表達(dá)和分泌I、Ⅲ、Ⅳ型膠原、纖維連接蛋白、細(xì)胞黏合素以及通過自分泌作用促進(jìn)TGF-β1自身的表達(dá)。因此，TGF-β1在肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展過程中起著重要的始動(dòng)作用和持續(xù)激活作用。中醫(yī)中藥對(duì)肝纖維化的良好預(yù)防和治療效果及低毒性反應(yīng)等特點(diǎn)目前已引起國(guó)內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注，且最近幾年中藥對(duì)于肝纖維化中TGF-β1的作用研究方興未艾，綜述如下。

1 單味藥及有效單體干預(yù)肝纖維化中TGF-β1的研究

孫玲［4］運(yùn)用豹皮樟總黃酮血清對(duì)TGF-β1干預(yù)的大鼠HSC的作用進(jìn)行研究，采用動(dòng)物體內(nèi)給藥，分離藥物血清，作用于體外培養(yǎng)細(xì)胞的血清藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法，探討豹皮樟總黃酮血清對(duì)TGF-β1干預(yù)的HSC-T6的活化增殖和平滑肌肌動(dòng)蛋白(smooth muscle actin，SMA)及I、Ⅲ型膠原基因表達(dá)的影響，從細(xì)胞分子學(xué)水平探討豹皮樟總黃酮血清抗肝纖維化的作用。發(fā)現(xiàn)豹皮樟總黃酮血清可有效降低TGF-β1水平。楊潔等［5］通過對(duì)柴胡、紅花、川芎中藥單體對(duì)CCl4造模的大鼠肝纖維化治療作用的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，生理鹽水對(duì)照組、柴胡組、紅花組、川芎組的 TGF-β1表達(dá)陽(yáng)性率分別為 87%、21%、30%、17%。表明柴胡、紅花、川芎對(duì)TGF-β1表達(dá)有明顯抑制作用。樊予惠等［6］用川芎嗪對(duì)人HSC TGF-β1影響的研究中發(fā)現(xiàn)，川芎嗪可以顯著降低TGF-β1表達(dá)陽(yáng)性率。何綺微等［7］將茯苓和苦參用于CCl4造模的肝纖維化大鼠，發(fā)現(xiàn)茯苓和苦參顯著降低了TGF-β1表達(dá)。

2 中藥復(fù)方干預(yù)肝纖維化中TGF-β1的研究

2.1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究 李豐衣等［8］用調(diào)肝理脾方對(duì)酒精性肝纖維化的研究中發(fā)現(xiàn)，調(diào)肝理脾方能顯著下調(diào)采用“白酒-吡唑-玉米油”混合液灌胃法造模的酒精性肝纖維化大鼠肝組織中TGF-β1水平。陳青鋒等［9］運(yùn)用益氣活血化瘀中藥復(fù)方對(duì)二甲基亞硝胺造模建立的肝纖維化大鼠進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，益氣活血化瘀中藥復(fù)方有明顯降低大鼠肝組織中TGF-β1水平。王麗等［10］采用腹腔注射豬血清的方法建立免疫性肝纖維化大鼠動(dòng)物模型，再運(yùn)用化濁解毒益氣方觀察對(duì)纖維化大鼠TGF-β1水平的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)化濁解毒益氣方可以顯著下調(diào)TGF-β1水平。李豐衣等［11］用復(fù)方鱉甲軟肝片對(duì)酒精性肝纖維化的研究中發(fā)現(xiàn)，與復(fù)方牛胎肝提取物相比，復(fù)方鱉甲軟肝片能顯著下調(diào)采用“白酒-吡唑-玉米油”混合液灌胃法聯(lián)合高脂飲食造模的大鼠肝組織中TGF-β1水平。王衛(wèi)華等［12］運(yùn)用二甲基亞硝胺對(duì)大鼠進(jìn)行肝纖維化造模，發(fā)現(xiàn)甲乙煎能下調(diào)實(shí)驗(yàn)性肝纖維化大鼠肝組織TGF-β1表達(dá)。謝世平等［13］用鱉甲煎丸對(duì)免疫性肝纖維化大鼠TGF-β1mRNA表達(dá)進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)和秋水仙堿組相比，鱉甲煎丸顯著抑制TGF-β1 mRNA的表達(dá)。房澍名等［14］運(yùn)用拆方益肝康不同藥物血清對(duì) HSC膠原代謝及TGF-β1的影響進(jìn)行研究，采用分別提取正常大鼠和CCl4造模肝纖維化大鼠益肝康及其拆方丹參小復(fù)方 (丹參、黃芪、歸尾)的藥物血清，作用于體外培養(yǎng)的HSC，探討該方對(duì)HSC膠原代謝及TGF-β1基因與蛋白表達(dá)的影響，去探討新的藥物作用靶點(diǎn)及配伍意義，結(jié)果顯示兩種方法均可顯著抑制TGF-β1的表達(dá)，益肝康優(yōu)于丹參小復(fù)方。賈愛芹等［15］用清肝抑纖飲及其拆方對(duì)CCl4致肝纖維化大鼠肝組織TGF-β1的表達(dá)進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，清肝抑纖飲及其拆方預(yù)防用藥可顯著降低纖維化大鼠肝組織勻漿 TGF-β1含量。并顯示清熱解毒藥物與涼血活血藥物的配伍在方中起主要作用。潘智敏等［16］用祛痰化濁法中藥復(fù)方調(diào)脂積沖劑對(duì)由CCl4復(fù)合高脂乳劑造模的脂肪肝性大鼠肝纖維化模型進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)方調(diào)脂積沖劑對(duì)脂肪肝性肝纖維化的大鼠有顯著降低TGF-β1的作用。宋星星等［17］用白酒輔以吡唑、玉米油的混合食料灌胃的方法建立大鼠酒精性肝纖維化模型，然后以五田保肝液對(duì)酒精性肝纖維化大鼠肝組織TGF-β1表達(dá)的影響進(jìn)行研究。研究發(fā)現(xiàn)，五田保肝液可抑制酒精性肝纖維化大鼠肝組織 TGF-β1的表達(dá)。吳凌康等［18］以酒精灌胃制作大鼠酒精性肝纖維化模型，然后以益氣活血化痰法中藥灌胃，用免疫組化法探測(cè)大鼠肝組織中TGF-β1蛋白的分布和表達(dá)強(qiáng)度。以動(dòng)物羊血清代替一抗制作陰性對(duì)照。發(fā)現(xiàn)益氣活血化痰法中藥組大鼠TGF-β1明顯低于對(duì)照組。趙建玲等［19］用中藥復(fù)方制劑對(duì)日本血吸蟲病肝纖維化形成的影響進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)中藥對(duì)日本血吸蟲鼠肝內(nèi)TGF-β1有明顯抑制作用。李志鋼等［20］研究中藥肝心寧對(duì)CCl4誘導(dǎo)的肝纖維化大鼠肝臟 TGF-β1及Smad3表達(dá)的影響，發(fā)現(xiàn)經(jīng)肝心寧治療后大鼠肝臟TGF-β1表達(dá)比模型組減弱，肝心寧同時(shí)下調(diào)Smad3的表達(dá)。

2.3 臨床研究 王華等［21］從病理學(xué)及肝纖維化血清標(biāo)志物角度，探討中藥強(qiáng)肝膠囊對(duì)慢性乙型肝炎肝纖維化患者的臨床療效中發(fā)現(xiàn)，強(qiáng)肝膠囊組和給予肝泰樂、復(fù)合維生素B溶液治療的對(duì)照組相比，血清學(xué)顯示TGF-β1的下降水平更明顯。白潔等［22］用中西醫(yī)結(jié)合方法治療非酒精性脂肪性肝炎 (NASH)，觀察血清的TGF-β1變化，以探討治療NASH并抑制其發(fā)生肝纖維化、肝硬化的最佳方案，3個(gè)月后，保肝降脂湯加熊去氧膽酸組的患者TGF-β1的下降水平明顯，并優(yōu)于其他組。

3 結(jié)語

肝纖維化的防治是當(dāng)今肝病治療的難點(diǎn)之一。迄今為止，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)尚無較有效的治療方法，各國(guó)科學(xué)家試圖從肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展等不同環(huán)節(jié)入手，研制抗肝纖維化藥物。目前在抗肝纖維化的眾多藥物中，中醫(yī)以其多環(huán)節(jié)、多層次及多靶點(diǎn)的綜合作用已顯現(xiàn)出較明顯的優(yōu)勢(shì)，具有廣闊的開發(fā)和應(yīng)用前景。中藥在單味藥和復(fù)方制劑以干擾TGF-β1靶點(diǎn)的抗肝纖維化治療中，對(duì)自身免疫性、酒精性、脂肪性、非酒精性、血吸蟲性肝纖維化等在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中均取得較好療效。人體臨床試驗(yàn)也在不斷增加，在已經(jīng)進(jìn)行的人體臨床實(shí)驗(yàn)的研究資料中可以知道中藥在非酒精性脂肪性肝病、病毒性肝炎方面的肝纖維化的防治也有很好的療效。但因中藥多為復(fù)方，即使是單味藥也含有多種不同成分，故要確切地說明中藥的體內(nèi)作用機(jī)制及有效作用成分就較為困難。但隨著分子生物學(xué)的發(fā)展和現(xiàn)代檢測(cè)儀器、工藝、技術(shù)的提高，為我們進(jìn)一步對(duì)TGF-β1的研究和中藥的藥物機(jī)制研究提供了可能。目前關(guān)于中藥對(duì)肝纖維化中TGF-β1的研究，大多集中在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)階段，人體臨床試驗(yàn)比較少，并且辨證論治運(yùn)用也比較少，而辨證論治是中醫(yī)精髓之所在。我們應(yīng)在研究過程中動(dòng)物實(shí)驗(yàn)造模時(shí)應(yīng)對(duì)肝纖維化各個(gè)證型的動(dòng)物模型進(jìn)行完善，結(jié)合中醫(yī)病因病機(jī)去造模。中藥運(yùn)用時(shí)應(yīng)遵循辨證論治的原則。在獲得確切療效的基礎(chǔ)上，擴(kuò)大臨床試驗(yàn)范圍，結(jié)合現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，更好地解決慢性肝病患者的痛苦。

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