何蘇琴 王三喜 羅進(jìn)倉 金秀琳 馬福全 王生榮

作者簡介： 何蘇琴（1965-），女，江西修水人，學(xué)士，副研究員，主要研究方向植物真菌病害及資源微生物利用。E-mail:gshesuqin@sina.com

王生榮為通訊作者。

摘要： 報(bào)道了甘肅省新發(fā)現(xiàn)的蛇形蟲草屬真菌細(xì)蛇形蟲草，并對其有性型(Ophiocordyceps gracilis)和無性型羽束孢(Paraisariadubia)的形態(tài)特征進(jìn)行了描述。采集自甘肅夏河的細(xì)蛇形蟲草的寄主為一種蝠蛾幼蟲(Hepialus sp.)，采集地海拔3 500 m。僵蟲體表包裹黃褐色菌索；子座單生，從僵蟲頭前端或頭背部長出，可孕部卵圓形或近球形，暗黃褐色，柄部淡黃褐色，圓柱形；子囊殼褐色，埋生，袋囊狀或瓶狀，子座少見。

關(guān)鍵詞： 細(xì)蛇形蟲草；羽束梗孢；形態(tài)特征

中圖分類號： S 567.35文獻(xiàn)標(biāo)識碼： A文章編號： 1009-5500(2011)04-0015-04

2006～2008年在甘肅冬蟲夏草主產(chǎn)區(qū)的甘南藏族自治州調(diào)查采樣時(shí)發(fā)現(xiàn)當(dāng)?shù)叵x草交易市場中的部分冬蟲夏草交易品中混雜有僵蟲體表包裹黃褐色菌索、子座可孕部卵圓形或近球形的不同種類的蟲草，經(jīng)查證，該種類蟲草均采挖自甘肅甘南藏族自治州夏河縣。對10枚該種類蟲草的內(nèi)菌核進(jìn)行了組織分離，羽束梗孢(Paraisariadubia)的分出率達(dá)100%，結(jié)合子座形態(tài)，將其鑒定為細(xì)蛇形蟲草(Ophiocordyceps gracilis)，為甘肅省新紀(jì)錄蟲草。

1 材料和方法

1.1 培養(yǎng)基及配方

PDA培養(yǎng)基 馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂12 g，水1 000 mL。

SPPDA培養(yǎng)基 馬鈴薯200 g，產(chǎn)地土20 g，蛋白胨2 g，葡萄糖20 g，瓊脂12 g，水1 000 mL

1.2 標(biāo)樣采集

蟲草標(biāo)樣于2008年5月采集自甘肅甘南藏族自治州夏河縣高寒草甸，海拔3 500 m。

1.3 相關(guān)無性型真菌的分離

以每株蟲草為單位，采用常規(guī)組織分離方法對內(nèi)菌核進(jìn)行分離培養(yǎng)。去除標(biāo)樣表面土粒及雜物，將分離組織剪成長5 mm節(jié)段，75%乙醇表面消毒后，滅菌水沖洗4～5次，用滅菌濾紙吸干表面水分后，在放于SPPDA平板上，20 ℃培養(yǎng)，每日檢查，長出真菌及時(shí)轉(zhuǎn)出純化。30 d后統(tǒng)計(jì)分出率。

分出率（%）=（分出該菌的標(biāo)樣數(shù)/標(biāo)樣總數(shù)）×100

1.4 形態(tài)學(xué)鑒定

根據(jù)蟲草子座的形態(tài)，及分離出的無性型菌株的產(chǎn)孢細(xì)胞和孢子形態(tài)（SPPDA和PDA平板上，20 ℃培養(yǎng)30 d），依據(jù)相關(guān)資料進(jìn)行蟲草種類的鑒定。

2 結(jié)果與討論

依據(jù)有性型子座及其無性型產(chǎn)孢細(xì)胞和分生孢子的形態(tài)特征（圖1），并與相關(guān)資料^[1-3]進(jìn)行比對，將采自甘肅夏河的蟲草鑒定為細(xì)蛇形蟲草。無性型羽束梗孢的分出率達(dá)100%。

有性型(Ophiocordyceps gracilis)子座（近成熟）僵蟲體表包裹黃褐色菌索，子座單生，從僵蟲頭前端或頭背部長出，不同于冬蟲夏草的子座從僵蟲頭骨縫中長出?？稍胁砍事褕A形或近似球形，暗黃褐色，柄部淡黃褐色，圓柱形，柄長10 mm，柄寬2.6 mm，可孕部4.4 mm×4 mm。

子囊殼（近成熟） 近成熟子囊殼褐色，埋生，袋囊狀或稱瓶狀，(386.1～455.4) μm×(99.0～128.7) μm，av.(412.5±22.5) μm×(114.9±11.3) μm。

無性型(Paraisariadubia)培養(yǎng)性狀 在SPPDA和PDA平板上，20 ℃培養(yǎng)，菌落乳白至鵝黃色，生長緩慢，初茸狀，后呈束羽狀。

產(chǎn)孢細(xì)胞 無色，瓶狀小梗單生于產(chǎn)孢菌絲（寬約2.5 μm）上，或形成單至多層的輪枝，每輪著生3～6個(gè)小梗，或數(shù)個(gè)小梗生于棒狀至頭狀孢梗上，小梗近中部

圖1 細(xì)蛇形蟲草(Ophiocordyceps gracilis)及其無性型羽束梗孢(Paraisaria dubia)的形態(tài)特征

Fig.1 Morphological characters of Ophiocordyceps gracilis and Paraisaria dubia

1,2. 示內(nèi)菌核、根狀菌索及近成熟的子座；3～4. 無性型羽束梗孢菌落形態(tài)（PDA,20 ℃,30 d）；5. 示埋生的子囊殼；6. 子囊殼孔口頂面觀；7～10. 羽束梗孢分生孢子梗和產(chǎn)孢細(xì)胞形態(tài)；11,12. 羽束梗孢分生孢子形態(tài)。

標(biāo)尺：1～4=10 mm；5,6=150 μm；7～12=20 μm

膨大，頂部尖。瓶狀小梗(6.2～14.9) μm×(1.3～2.5) μm，av.(9.5±2.3) μm×(1.7±0.3) μm。

分生孢子 分生孢子無色，擬梭形，細(xì)桿狀，針狀，直或稍彎，(3.7～10.0) μm×(0.5～1.0) μm，av.(6.4±1.7) μm×(0.7±0.1) μm。

寄主昆蟲 一種蝠蛾幼蟲(Hepialus sp.)。

3 討論

雖然筆者未獲得細(xì)蛇形蟲草的成熟子座，但依據(jù)近成熟子座及其無性型的形態(tài)特征，且其寄主為鱗翅目的蝠蛾幼蟲，可與形態(tài)近似種，寄生于鞘翅目昆蟲的擬細(xì)蛇形蟲草區(qū)分開^[4-6]。

須要提及的是，Samson 等^[1]中描述的Paraisariadubia的分生孢子大小為(3.2～4.8) μm×0.8 μm，但在文中插附的形態(tài)線條圖和電鏡掃描圖上，其分生孢子長度的量度可達(dá)8.2 μm。

細(xì)蛇形蟲草分布于歐洲、中國、日本、北美洲、南美洲、北非等多個(gè)國家和地區(qū)^[7]，2003年Shresthal等^[8]在尼泊爾也采集到了該蟲草。

細(xì)蛇形蟲草已知分布于我國云南、江蘇、新疆、安徽^[9,10]。在我國新疆等地，作為冬蟲夏草入藥使用^[11]，其發(fā)酵菌絲體所含成分與新疆產(chǎn)天然細(xì)蟲蛇形蟲草和青海產(chǎn)冬蟲夏草所含成分性質(zhì)相同，是替代天然冬蟲夏草緩解市場急需的理想產(chǎn)品^[12]。在新疆，細(xì)蛇形蟲草產(chǎn)于阿爾泰林區(qū)的雪線附近，海拔1 250～2 000 m，生于半陽半陰坡，僵蟲體外有菌索，子座少見^[13]，我們采集到的標(biāo)本的形態(tài)特征與新疆的相似，在采集到的30枚標(biāo)樣中，只有2枚生有子座。采挖自甘肅夏河的部分冬蟲夏草交易品中，細(xì)蛇形蟲草混雜的比例可達(dá)1.00%～2.13%。

甘肅地處黃土高原、內(nèi)蒙古高原和青藏高原的交匯地帶，海拔大多在1 000m以上，四周為群山峻嶺環(huán)抱。北有六盤山、合黎山和龍首山，東為岷山、秦嶺和子午嶺，西接阿爾金山，和祁連山，南壤青泥嶺。境內(nèi)地勢起伏、山嶺連綿、江河奔流，地形地貌復(fù)雜^[14]。多樣的生態(tài)和氣候條件下，一定蘊(yùn)藏有豐富的蟲草種類資源，尚有待人們?nèi)ヌ剿靼l(fā)現(xiàn)。

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Ophiocordyceps gracilis, a new record in Gansu Province

HE Su-qin1,2,WANG San-xi3,LUO Jin-cang2,JIN Xiu-lin2,MA Fu-quan3,WANG Sheng-rong1

(1. College of Pratacultural Science,Gansu Agricultural University,Lanzhou 730070,China; 2. Institute of Plant Protection,Gansu Academy of Agricultural Sciences,Lanzhou 730070,China; 3. Institute of Agricultural Sciences of Gannan Prefecture,Hezuo 747000,China)

Abstract: In this paper,Ophiocordyceps gracilis is reported as a new record in Gansu Province,and the morpha both teleomorph on Hepialus larva and anamorph on culture are described.Samples were collected from Xiahe County with altitude of 3 500 m. Infected-larvae are covered by several yellow brown synnemata.Stroma are produced in solitary per host,usually from head or thorax region.Stroma consists of a stout cylindrical stipe, with a pale yellow brown,and ovoid to subglobose,dark yellow brown-colored head.Perithecia are completely immersed in head,brown-colored,saccate or flask shaped.Stroma are formed infrequently.

Key words: Ophiocordyceps gracilis；Paraisaria dubia；morphological characters