宋宏斌 蔣春琴 譚北平 申玉春 冷向軍

近年來(lái)，魚粉等動(dòng)物性蛋白源供應(yīng)緊張，價(jià)格高漲，使得餅粕類等植物性蛋白源在水產(chǎn)飼料中的應(yīng)用比例不斷增加。相對(duì)于魚粉，植物蛋白源通常表現(xiàn)為某些限制性氨基酸含量較低，尤其是賴氨酸和蛋氨酸[1]，因此，在飼料中補(bǔ)充這些限制性氨基酸成為提高其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的重要途徑。但魚的種類不同，飼料中添加晶體氨基酸的效果也存在著差異，在草魚(Ctenopharyngodon ide lla)[2]、異育銀鯽(Carassius auratus gibelio)[3]、鯉(Cyprinus carpio)[4]和凡納濱對(duì)蝦(Litopen-aeus vannamei)[5]等的飼料中添加晶體賴氨酸或(和)蛋氨酸，未能改善魚體生長(zhǎng)性能。晶體氨基酸的利用效果不佳，其主要原因是其水中溶失高[6-7]和與飼料蛋白質(zhì)中的氨基酸吸收不同步問(wèn)題[8-9]，一般可將晶體氨基酸包膜和微膠囊化處理，減緩氨基酸的釋放速率來(lái)提高氨基酸利用率[10]。

本試驗(yàn)以異育銀鯽(Carassius auratus gibelio)為研究對(duì)象，在基礎(chǔ)飼料的基礎(chǔ)上，降低魚粉用量，增加菜粕與棉粕用量，同時(shí)在飼料中補(bǔ)充限制性氨基酸——賴氨酸和蛋氨酸的晶體或微囊形式來(lái)考察對(duì)魚體生長(zhǎng)、肌肉成分、血清總游離氨基酸的影響，為氨基酸在水產(chǎn)飼料中的合理應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)飼料

高魚粉對(duì)照組的魚粉含量10%，在此基礎(chǔ)上降低魚粉含量5%，相應(yīng)增加菜粕、棉粕含量，得低魚粉對(duì)照組；在低魚粉對(duì)照組的基礎(chǔ)上，補(bǔ)充微囊氨基酸，使賴氨酸和蛋氨酸水平與高魚粉組基本一致，同時(shí)設(shè)置晶體氨基酸組，晶體賴氨酸、蛋氨酸添加量為微囊氨基酸組2倍，各組蛋白水平保持一致。飼料原料過(guò)40目篩，逐級(jí)混勻后經(jīng)制粒機(jī)加工成直徑1 mm顆粒，晾干備用。試驗(yàn)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)成分見表1。

氨基酸產(chǎn)品由佛山市海納川藥業(yè)有限公司提供，晶體賴氨酸為L(zhǎng)ys-HCl，賴氨酸有效含量為78%，DL-蛋氨酸有效含量為98%；微囊賴氨酸中賴氨酸有效含量為39%，蛋氨酸有效含量為49%。

1.2 試驗(yàn)用魚

試驗(yàn)選取規(guī)格一致，平均體重為(31.68±0.01)g的異育銀鯽共360尾，隨機(jī)分配于12個(gè)長(zhǎng)方形水泥池中（3.0 m×2.5 m×1.2 m，水深0.6 m），每池30尾，共設(shè) 4個(gè)處理組，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)。

1.3 飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)試驗(yàn)在上海海洋大學(xué)南匯特種養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行，試驗(yàn)前對(duì)異育銀鯽進(jìn)行為期1周馴化，待魚攝食正常后開始正式試驗(yàn)，按魚體體重的2%～4%確定投飼量，根據(jù)水溫、天氣、攝食情況調(diào)整，各組保持一致投喂量，每日投喂 3 次（8：30，12：30，16：30）。晝夜充氣，定期換水，飼養(yǎng)試驗(yàn)期間水溫 22～32 ℃、DO 6.5～8.3 mg/l、pH值6.9～7.8，飼養(yǎng)時(shí)間為8周。

表1 試驗(yàn)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)成分含量(%)

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能指標(biāo)

增重率(WGR，%)=(末均重-初均重)(g)/初均重(g)×100；

飼料系數(shù)(FCR)=攝食量(g)/(末均重-初均重)(g)；

特定生長(zhǎng)率(SGR，%)=[ln末均重(g)-ln初均重(g)]/飼養(yǎng)天數(shù)(d)×100；

成活率(SR，%)=成活尾數(shù)/總尾數(shù)×100。

1.4.2 肌肉成分分析

粗水分采用105℃恒重法（GB/T6435—86）；粗灰分采用550℃灰化法（GB/T 6438—92）；粗蛋白采用凱氏定氮法（GB/T 6432—94）；粗脂肪采用氯仿-甲醇抽提法。

1.4.3 血清總游離氨基酸

采樣時(shí)分別對(duì)投喂 0、1、2、3、4、5 h 后每池每時(shí)間段取異育銀鯽4尾，進(jìn)行尾靜脈取血，血樣置于1.5 ml離心管中6 000 r/min離心5 min后，取上清液即血清，于-20℃冰箱保存待測(cè)。采用總氨基酸（T-AA）測(cè)試盒（購(gòu)于南京建成生物工程研究所）測(cè)定血清總游離氨基酸的含量。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)結(jié)果表示為平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差，數(shù)據(jù)采用SPSS(Version 16.0)統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，差異顯著水平為P＜0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料中補(bǔ)充晶體和微囊氨基酸對(duì)異育銀鯽生長(zhǎng)性能的影響

經(jīng)過(guò)8周飼養(yǎng)，飼料中補(bǔ)充晶體和微囊氨基酸對(duì)異育銀鯽生長(zhǎng)性能的影響見表2。由表2可見，高魚粉組異育銀鯽的增重率最高，飼料系數(shù)最低，而低魚粉組的異育銀鯽生長(zhǎng)性能最差。相對(duì)于低魚粉組，晶體AA組的異育銀鯽生長(zhǎng)性能在數(shù)值上有所提高，但未達(dá)顯著水平（P＞0.05）；微囊AA組的增重率提高12.1%，餌料系數(shù)下降11.2%（P＜0.05），生長(zhǎng)性能與高魚粉組無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表2 添加晶體和微囊氨基酸對(duì)異育銀鯽生長(zhǎng)性能的影響

2.2 飼料中補(bǔ)充晶體和微囊氨基酸對(duì)異育銀鯽肌肉成分的影響(見表3)

表3 添加晶體和微囊氨基酸對(duì)異育銀鯽肌肉成分的影響(%)

由表3可見，各組異育銀鯽肌肉的水分、粗灰分、粗蛋白和粗脂肪含量均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

2.3 異育銀鯽攝食各組飼料后不同時(shí)間段血清游離氨基酸含量的變化

異育銀鯽攝食各組飼料后不同時(shí)間段血清游離氨基酸含量的變化見表4。由表4可見，高魚粉組、低魚粉組和微囊氨基酸組的血清游離氨基酸含量變化的趨勢(shì)一致，即攝食后隨時(shí)間增加而增加，在3 h時(shí)達(dá)到吸收高峰，其后下降；添加晶體AA組的血清游離氨基酸水平的峰值高于其他組（P＜0.05），高峰出現(xiàn)時(shí)間提前到2 h。

3 討論

表4 攝食各組飼料后不同時(shí)間段血清總游離氨基酸含量的變化(μmol/ml)

魚類對(duì)晶體氨基酸的利用能力依種類不同而呈現(xiàn)很大差異。一般認(rèn)為鮭鱒魚類能有效利用晶體氨基酸[12-13]，而無(wú)胃鯉科魚類對(duì)晶體氨基酸的利用能力較差。Violas[14]在鯉魚及劉永堅(jiān)等[2]在草魚飼料中添加晶體賴氨酸，冷向軍等[15]在異育銀鯽飼料中添加晶體賴氨酸、蛋氨酸，均發(fā)現(xiàn)對(duì)魚類生長(zhǎng)無(wú)明顯改進(jìn)效果。本次試驗(yàn)在魚粉用量5%的低魚粉組飼料基礎(chǔ)上，補(bǔ)充2倍晶體賴氨酸、蛋氨酸后，盡管飼料賴氨酸、蛋氨酸水平已經(jīng)超過(guò)了高魚粉組，但其增重率和特定生長(zhǎng)率只是在數(shù)值上有提高，并未達(dá)到顯著水平。進(jìn)一步提高晶體氨基酸的添加水平，是否會(huì)產(chǎn)生作用效果，有待于今后進(jìn)一步研究。

氨基酸吸收不同步是影響晶體氨基酸利用的主要因素，晶體氨基酸吸收快，無(wú)法與飼料蛋白態(tài)氨基酸同步吸收，而氨基酸合成蛋白質(zhì)必須按一定比例進(jìn)行，且水生動(dòng)物貯存游離氨基酸的能力較低，導(dǎo)致先吸收的晶體氨基酸不能用于合成蛋白質(zhì)而直接排泄或代謝，因而血液游離氨基酸高峰值提前[16-17]。本試驗(yàn)中，攝食晶體氨基酸魚體血清的總游離氨基酸的吸收峰值較其他組提前1 h，這與草魚補(bǔ)充晶體氨基酸后總游離氨基酸的變化趨勢(shì)相似[18]。

為解決晶體氨基酸吸收過(guò)快而產(chǎn)生的與蛋白態(tài)氨基酸吸收不同步問(wèn)題，可對(duì)氨基酸進(jìn)行包膜或微囊化處理。在魚粉含量5%的鯉魚飼料中以微囊形式補(bǔ)充賴氨酸、蛋氨酸0.14%、0.04%(均指有效含量)，提高了魚體增重率10.1%，降低了餌料系數(shù)10.7%[11]；在草魚飼料中添加0.3%、0.6%晶體賴氨酸，其生長(zhǎng)性能改善不明顯，而添加0.15%、0.30%微囊賴氨酸，其增重率顯著提高[19]；在斑節(jié)對(duì)蝦飼料中添加包膜精氨酸，其增重率是添加晶體精氨酸組的2倍[20]。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)在低魚粉飼料中補(bǔ)充微囊AA后，魚體生長(zhǎng)性能顯著提高，同時(shí)，其血清總游離氨基酸的變化趨勢(shì)與高魚粉組和低魚粉組一致，均在3 h時(shí)達(dá)到吸收高峰，較晶體AA組的血清總游離氨基酸峰值延遲了1 h，進(jìn)一步證實(shí)了氨基酸經(jīng)微囊處理后，延緩了其在腸道內(nèi)釋放速度，有利于解決外源性氨基酸與蛋白態(tài)氨基酸吸收不同步的矛盾，提高了利用率。

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